依曲替酸对银屑病患者皮损区IL-17表达的影响

目的探讨依曲替酸对中、重度银屑病患者皮损区白介素(IL)-17表达的影响。方法观察依曲替酸的临床疗效;用原位杂交技术及蛋白印迹法(Westernblot)检测患者治疗前、后皮损区IL-17mRNA和IL-17蛋白表达。结果依曲替酸在改善患者病情的同时,抑制了皮损区IL-17mRNA的表达(治疗前39.95±11.44,治疗后16.20±6.65)及蛋白表达(治疗前0.85±0.10,治疗后0.26±0.10),差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论依曲替酸治疗银屑病的作用可能涉及对患者皮肤Th17细胞的影响。

依曲替酸对寻常型银屑病皮肤IFN-γ、IL-4 mRNA表达的影响

目的探讨依曲替酸治疗寻常型银屑病(psoriatic vulgaris,PV)的作用机制。方法观察依曲替酸对30例PV患者的临床疗效,并用原位杂交技术对患者治疗前后皮损中Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)mRNA进行检测。结果依曲替酸能改善PV患者病情,有效率76.67%。IFN-γ、IL-4 mRNA主要在真皮表皮交界处的淋巴细胞胞质中表达,IFN-γ mRNA的表达治疗前(45.61±9.96)明显高于正常对照(4.40±1.20,P<0.01),治疗后(16.82±7.20)明显下降(P<0.01)。IL-4 mRNA表达无显著变化。结论依曲替酸治疗PV的作用机制可能与其抑制皮肤中IFN-γ mRNA的表达及调节Th平衡有关。

正常人角质形成细胞维A酸受体γmRNA在依曲替酸处理前后的改变

目的研究正常人角质形成细胞维甲酸受体(RAR)γmRNA在依曲替酸处理前后的改变。方法用0.1μmol/L和1.0μmol/L依曲替酸处理正常人角质形成细胞后12h,用RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR法检测维甲酸受体γmRNA表达的改变。结果正常人角质形成细胞可表达少量的维甲酸受体γmRNA;0.1μmol/L依曲替酸处理后,RARγmRNA的表达无明显增高,为正常对照组的1.8倍(P>0.05);1.0μmol/L依曲替酸处理后,RARγmRNA的表达明显增高,为正常对照组4.0倍(P<0.01)。结论低浓度依曲替酸(低于0.1μmol/L)对正常人角质形成细胞RARγmRNA的表达无明显影响,但较高浓度的伊曲替酸可明显诱导RARγmRNA的表达。

依曲替酸和窄谱中波紫外线对正常人角质形成细胞维甲酸受体γ mRNA表达的协同影响

目的研究依曲替酸和窄谱中波紫外线(NB-UVB)对培养的正常人角质形成细胞(KC)增殖和维甲酸受体γ(RARγ)mRNA表达的影响。方法用10-6mol/L依曲替酸和/或100mJ/cm2NB-UVB处理正常人KC后,继续培养12h,用RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR法分别检测KC增殖和RARγ mRNA表达的改变。结果10-6mol/L依曲替酸或100mJ/cm2NB-UVB处理后12h,KC的增殖均受抑制,抑制率分别为8.7%和14.4%,二者联合作用时,对KC的增殖抑制作用最强,抑制率为19.7%。正常人KC可表达一定量的RARγ mRNA,10-6mol/L依曲替酸处理后,RARγ mRNA的表达增高至正常对照组的2.3倍,100mJ/cm2NB-UVB照射对RARγ mRNA的表达无明显影响,为正常对照组的0.9倍,二者联合作用时,对RARγ mRNA的表达诱导作用最强,为正常对照组的2.8倍。结论依曲替酸和NB-UVB可协同诱导RARγ mRNA表达,并可能参与介导二者对KC增殖的抑制作用。

依曲替酸(R_O10-1670)对培养的正常人角质形成细胞Fas/Fasl系统表达及凋亡的研究

目的 通过研究依曲替酸作用于培养的正常人KC前后Fas/Fasl的表达及其与凋亡的关系 ,进一步探讨其治疗银屑病的作用机理。方法 依曲替酸作用培养的正常人KC后 ,进行免疫细胞化学研究 ,观察其对KC表达Fas/Fasl蛋白的影响。用流式细胞仪 (FACS)对依曲替酸处理后的KC进行凋亡检测。结果 ①正常人KC几乎不表达Fas和Fasl ;②依曲替酸作用 16h时KC的Fasl表达最强 ,40h时表达Fas最强 ;相同条件下 ,KC表达Fasl比Fas弱 ;③依曲替酸刺激后引起KC凋亡。结论 培养的正常人KC中Fas/Fasl系统不参与其凋亡 ;依曲替酸作用于培养的正常人KC后 ,上调Fas/Fasl系统表达 ,并促进KC凋亡 ,拮抗KC良性增生 ,Fas/Fasl介导的凋亡可能是维甲酸治疗银屑病的重要原因。

依曲替酸在皮肤科的应用

本文综述了依曲替酸在皮肤科的应用。依曲替酸不仅能够治疗银屑病,还能够治疗其他角化异常性皮肤病如鱼鳞病、可变性红斑角皮症、副肿瘤性肢端角化、厚甲症等,另外依曲替酸还能够治疗某些皮肤肿瘤以及大疱性皮肤病。

依曲替酸诱导皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1凋亡及其机制的初步研究

目的:探讨依曲替酸通过上调Fas基因表达诱导皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系SCL-1细胞凋亡的作用。方法:以体外培养的人皮肤鳞癌细胞系SCL-1为研究对象,MTT法观察依曲替酸对SCL-1细胞的生长抑制作用,Annxin V-FITC/PI法检测早期凋亡,流式细胞仪检测细胞膜表面Fas的表达情况,实时荧光定量RT-PCR方法检测Fas mRNA的表达。结果:依曲替酸能显著抑制SCL-1细胞的生长,并具有浓度及时间依赖性。浓度为1×10-5mol/L的依曲替酸能诱导凋亡,上调细胞膜表面Fas表达水平及Fas mRNA水平。结论:依曲替酸能抑制皮肤鳞癌细胞生长及诱导凋亡,上调Fas抗原表达可能是其分子机制之一。

依曲替酸诱导上皮鳞癌细胞凋亡及相关信号途径的改变

目的:研究依曲替酸诱导上皮鳞癌细胞凋亡及其分子机制。方法:用MTT法观察依曲替酸对A 431细胞的生长影响,电镜观察细胞形态,流式细胞仪检测凋亡峰的出现,A nnex in-V染色证实凋亡的发生。同时用逆转录PCR法观察,经依曲替酸作用不同的时间后,A 431细胞中信号传导和转录激活因子3(STAT 3)、细胞周期蛋白D 1(CyclinD 1)、p42/44丝裂原激活的蛋白激酶(p42/44MAPK)mRNA表达的改变;用蛋白印迹术,研究经依曲替酸作用不同的时间对A 431细胞中磷酸化STAT 3(p-STAT 3)、CyclinD 1蛋白表达的影响。结果:①随着依曲替酸作用时间的延长及剂量的增加,对A 431细胞增殖的抑制作用增加。流式细胞仪检测显示,亚G1期凋亡峰明显增加,电镜观察和A nnex in-V染色证实了凋亡的存在。②依曲替酸能明显抑制A 431细胞中STAT 3、CyclinD 1 mRNA表达的改变,随着作用时间的延长,抑制作用增强,P<0.05;并下调p-STAT 3、CyclinD 1蛋白的表达;下调p42/44MAPK mRNA的表达。③经依曲替酸作用后,A 431细胞中CyclinD 1 mRNA表达的下降与STAT 3 mRNA表达的下降呈正相关,P<0.05;p-STAT 3、CyclinD 1蛋白也同步下调,P<0.05;而CyclinD 1 mRNA表达的下降与p42/44MAPK mRNA的下调无相关性。结论:①依曲替酸具有抗上皮鳞癌细胞生长及诱导上皮鳞癌细胞凋亡作用。②依曲替酸抗上皮鳞癌细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡的机制,可能主要是通过调节JAK/STAT 3信号途径而实现的。

依曲替酸上调Fas、FasL诱导皮肤鳞癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨依曲替酸通过上调Fas、FasL基因表达诱导皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系SCC13细胞凋亡的作用。方法:以体外培养的人皮肤鳞癌细胞系SCC13细胞为研究对象,采用酶联免疫分析法(ELISA)、AnnxinV-FITC/PI法检测凋亡的诱导情况。用实时荧光定量RT-PCR方法检测Fas、FasL mRNA的表达。用Fas中和抗体ZB4检测Fas、FasL在依曲替酸诱导SCC13细胞凋亡中的作用。结果:依曲替酸能诱导SCC13细胞凋亡,并具有浓度及时间依赖性。依曲替酸能上调肿瘤细胞内Fas、FasL mRNA表达水平。单独应用依曲替酸的早期凋亡率为(16.76±1.04)%,与ZB4共同处理SCC13后,早期凋亡率下降为(7.12±0.85)%,ZB4显著阻断依曲替酸诱导的凋亡(P<0.05)。结论:依曲替酸能诱导皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡,其机制可能与Fas死亡受体信号转导途径有关。

依曲替酸诱导皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨依曲替酸对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞的生长抑制及凋亡的诱导作用。方法:体外培养人皮肤鳞癌细胞株SCC 13,分别用不同浓度依曲替酸作用,采用四唑盐比色法观察依曲替酸对SCC 13细胞的生长抑制作用,ELISA法及Annxin-V和PI结合试验检测细胞凋亡情况,透射电子显微镜下观察细胞形态学变化。结果:随着依曲替酸浓度的增加,SCC 13细胞的存活率降低,凋亡程度升高;在相同的作用浓度下,随着药物作用时间的延长,增殖抑制及凋亡作用明显增强,呈时间依赖性(P均<0.05)。对照组早期凋亡率仅为6.2%,1×10-5mol/L的依曲替酸处理SCC 13细胞72 h后,细胞早期凋亡率为26.3%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。透射电子显微镜下可见经依曲替酸处理的SCC 13细胞呈典型的凋亡征象。结论:依曲替酸具有抑制皮肤鳞癌细胞生长及诱导凋亡作用。

依曲替酸和黄芪对HaCaT细胞增殖及细胞周期的影响

目的：研究依曲替酸和黄芪对HaCaT细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用MTT比色法检测依曲替酸和黄芪对HaCaT细胞增殖的影响；应用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡并于透射电镜下观察凋亡细胞形态。结果：依曲替酸和黄芪均对HaCaT细胞增殖有明显的抑制作用；在一定浓度范围内其抑制率呈时间和剂量依赖性，但黄芪的抑制率较依曲替酸为低。细胞明显阻滞于G1期，有明显的凋亡峰出现，电镜下见典型的凋亡细胞形态学特征。结论：依曲替酸和黄芪均可抑制HaCaT细胞的增殖并诱导其凋亡，提示二者治疗银屑病机制可能与此有关。

FY-10、依曲替酸对寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞趋化功能的影响

目的研究FY-10、依曲替酸对寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞趋化功能的影响作用,探讨维A酸治疗银屑病的作用机制。方法采用密度梯度离心法分离寻常型银屑病患者外周血PMN,分别用FY-10、依曲替酸处理后用transwell趋化小室法检测PMN趋向IL-8以及MCP-3+IL-8的趋化功能改变。结果FY-10与依曲替酸从浓度10-9mol/L开始对银屑病病人外周血中性粒细胞趋化功能产生抑制作用,随剂量增加抑制作用先增强后减弱,FY-10在10-7mol/L浓度抑制作用最强,依曲替酸在10-7mol/L与10-6mol/L浓度之间作用最强。结论FY-10与依曲替酸可通过抑制PMN聚集影响银屑病病程。*

依曲替酸研究进展

维甲酸类药物在皮肤病治疗学上是继皮质类固醇之后又一类被称为带革命性的药物。其中依曲替酸(etretsn,acitretin,Ro10一1670,TMMP一RA,商品名neo-t igason)的治疗作用从实验室到临床研究都已有评价。

依曲替酸对HaCaT细胞维生素D受体表达的影响

目的探索依曲替酸治疗银屑病的机制。方法免疫组化法检测银屑病皮损和正常表皮维生素D受体(VDR)蛋白表达;Western印迹法半定量检测依曲替酸对HaCaT细胞VDR蛋白表达的影响。结果银屑病皮损VDR蛋白表达水平(33.41±2.22)明显高于正常皮肤(14.87±3.18),差异有统计学意义(P<0.01);不同浓度依曲替酸作用HaCaT细胞24h,48h和72h后细胞VDR蛋白表达均较阴性对照组降低,呈明显的时间和剂量依赖性。结论银屑病皮损VDR蛋白表达异常,依曲替酸可降低HaCaT细胞VDR蛋白表达。

依曲替酸关键中间体4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯甲醛的合成

设计了一种新的合成依曲替酸关键中间体4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯甲醛的方法。以Hagemann酯为原料,通过碳3位上的甲基化,芳香异构化,还原以及氧化共4步反应合成了目标化合物。所得到的化合物经过核磁共振氢谱,碳谱以及质谱确认,总收率达到49%。本合成路线原料廉价易得,操作简便,反应条件相对温和。

依曲替酸治疗银屑病效果分析

目的观察依曲替酸在治疗银屑病时的临床效果。方法选取我院2015年的7月~2017年的7月所收治的银屑病患者46例,均选择维甲酸类药物治疗,观察治疗效果和用药安全性。结果本组患者经过治疗,治疗总有效率达100%,用药期间不良反应发生率6.52%。结论维甲酸类药物是治疗银屑病有效的药物,用药前应对患者是否符合用药适应征进行严格把握,同时在用药过程,科学调整用药剂量,才能获得良好的效果并减少副作用的发生。

依曲替酸对表皮鳞癌细胞信号传导相关基因表达的影响

目的研究依曲替酸对表皮鳞癌细胞A431细胞中信号传导相关基因表达的影响。方法以体外培养的人表皮鳞癌细胞A431细胞为研究对象,用逆转录PCR法观察经10-5mol/L的依曲替酸作用不同的时间后,A431细胞中信号传导和转录激活因子3(STAT3)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p42/44丝裂原激活的蛋白激酶(p42/44MAPK)mRNA表达的改变;用蛋白印迹技术研究经10-5mol/L的依曲替酸作用不同的时间对A431细胞中磷酸化STAT3(pSTAT3)、CyclinD1蛋白表达的影响。结果(1)依曲替酸能明显抑制A431细胞中STAT3、CyclinD1mRNA表达的改变,随着作用时间的延长,抑制作用增强(P<0.05),并下调pSTAT3、CyclinD1蛋白的表达,下调p42/44MAPKmRNA的表达。(2)经依曲替酸作用后,A431细胞中CyclinD1mRNA表达的下降与STAT3mRNA表达的下降呈正相关(P<0.05),pSTAT3、CyclinD1蛋白也同步下调(P<0.05),而CyclinD1mRNA表达的下降与p42/44MAPKmRNA的下调无相关性。结论(1)依曲替酸能下调表达A431细胞中的STAT3和MAPK基因。(2)依曲替酸抗表皮肿瘤的作用可能主要通过调节JAK/STAT3途径,表皮肿瘤患者的pSTAT3表达异常,可首先考虑使用依曲替酸治疗。

依曲替酸治疗Darier's病的临床研究

目的观察依曲替酸治疗Darier's病的临床疗效和安全性。方法采用开放、随机对照临床研究方法,研究组23例患者口服依曲替酸,初始剂量为每次10mg,每天3次;对照组12例患者口服维胺脂,初始剂量为每次25mg,每天3次。第一个月每周随访一次,一个月后每2周随访一次,均治疗随访2个月。结果经2个月的观察,研究组临床痊愈率为69.6%,有效率为100.0%;对照组临床痊愈率为25.0%,有效率为91.7%。常见的副作用是皮肤粘膜反应,两组不良反应发生率无统计学差异(P>0.05)。结论依曲替酸治疗Darier's病疗效较好,对治疗Darier's病是一种良好的临床选择。

芳维A酸氨丁三醇对HaCaT细胞分化的影响

目的观察芳维A酸氨丁三醇作用于无血清培养的HaCaT细胞后,细胞内分化相关基因TGase1表达的变化,探讨其剂量-时间曲线,并比较芳维A酸氨丁三醇与依曲替酸对HaCaT分化的影响。方法将不同浓度的芳维A酸氨丁三醇和依曲替酸(0.001～1.0μm/L)分别加入无血清培养的HaCaT细胞培养液中,在添加芳维A酸氨丁三醇6h、12h和24h后分别回收总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)法检测HaCaT细胞分化的特异性标记基因TGase1 mRNA的表达情况;芳维A酸氨丁三醇和依曲替酸分别在孵育24h后回收总RNA,用RT-PCR法检测TGase1 mRNA的表达,比较这两种药物对HaCaT细胞分化的差异。结果0.001～1.0μm/L浓度的芳维A酸氨丁三醇作用于HaCaT细胞6h、12h和24h后能显著促进HaCaT细胞内分化基因TGase1mRNA表达,且呈剂量和时间依赖性(P<0.05)。芳维A酸氨丁三醇及依曲替酸都可促进TGase1 mRNA表达,且TGase1mRNA的表达呈剂量依赖性,这两种药物的剂量曲线非常相似,其促进TGase1 mRNA表达程度比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论芳维A酸氨丁三醇能显著促进HaCaT细胞内分化基因TGase1 mRNA的表达,且呈时间和剂量依赖性,其促进HaCaT细胞分化的作用与依曲替酸的效果类同。

方希胶囊联合防风通圣散治疗寻常型银屑病疗效观察

目的观察方希胶囊联合防风通圣散治疗寻常型银屑病疗效。方法将68例寻常型银屑病患者随机分为观察组38例和对照组30例,两组均随餐顿服方希胶囊30 mg,1次/d;观察组同时饭后服用防风通圣散冲剂6g,2次/d。疗程均为12周。结果观察组痊愈18例,显效15例,好转4例,无效1例,痊愈率为47.36%,有效率为86.84%;对照组分别为13、7、8、2例及40.00%、66.67%。两组有效率比较,P<0.05。观察组不良反应发生率为44.74%,对照组为76.67%,两组比较,P<0.05。结论方希胶囊联合防风通圣散治疗寻常型银屑病效果较好,不良反应较少。