可表达人呼吸道合胞病毒融合蛋白辅助病毒依赖型腺病毒载体的构建与制备

构建可表达A亚型人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytialvirus,RSV)融合蛋白(fusion protein,F)的辅助病毒依赖型腺病毒载体(helper-dependent adenoviral vector,HDAd),并完成大量制备、纯化和F蛋白的体外表达鉴定。将带有CMV启动子序列的F基因亚克隆至克隆载体pSC11,鉴定正确后,克隆至HDAd质粒pSC15B,构建pSC15B/F HDAd重组质粒,PmeⅠ消化pSC15B/F去除原核复制元件及抗性基因,获得HDAd/F DNA分子,经磷酸钙共沉淀法转染293Cre4细胞,16h后感染辅助病毒,收获HDAd/F载体粗提液,随后以HDAd/F粗提液及辅助病毒连续共感染293Cre4细胞直至HDAd/F达到复制极限,同时以可表达β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,LacZ)报告基因的HDAdLacZ载体作为平行对照监测载体复制过程。与辅助病毒共感染293Cre4细胞进一步扩增HDAd/F、CsCl梯度法超速离心制备大量纯化的HDAd/F载体,体外感染293细胞,RT-PCR检测到F基因有转录,Western blot分析表明F蛋白有特异性表达。总之,成功构建HDAd/F载体并在真核细胞中实现表达,为体内免疫学效力试验奠定基础,为研制RSV疫苗提供了一种新方法。

人乳头瘤病毒非依赖性宫颈癌的研究进展

宫颈癌的发病率及死亡率在女性恶性肿瘤中均位居第4,约占女性恶性肿瘤的6.5%,在2020年,全世界共有604127例新发病例及341831例死亡病例[1]。绝大部分宫颈癌由高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的持续感染所致,被称为HPV相关性宫颈癌。70%~75%宫颈癌及40%~60%癌前病变与HPV16型及18型感染相关。随着全球HPV疫苗接种率增高带来的保护性,以及HPV检测作为初筛技术的发展,很多早期病变得到筛查和处理,HPV相关性宫颈癌的死亡率逐渐降低。但近5%宫颈癌的发生与HPV感染无关,主要为一些少见的病理类型,根据第5版世界卫生组织(World Health Organization,WHO)女性生殖肿瘤分类,称之为HPV非依赖性宫颈癌[2-3]。随着宫颈癌研究的不断深入,目前对HPV非依赖型宫颈癌的研究越来越受到重视。HPV非依赖性宫颈癌常常发现时分期更晚,预后更差。因此了解HPV非依赖性宫颈癌的临床特点、病理及分子特征进展,可以为宫颈癌的治疗及改善预后提供新的思路。

超声辐照人血白蛋白微球与腺相关病毒感染人视网膜色素上皮细胞

目的探讨超声辐照全氟丙烷人血白蛋白微球促进携带增强型绿色荧光蛋白的2型重组腺相关病毒(rAAV2-EGFP)感染人视网膜色素上皮(RPE)细胞的价值。方法HRPE细胞隔孔接种于24孔板中(2×105/孔),加入微球与rAAV2-EGFP的混合液,在不同条件下进行超声辐照。48h后,应用流式细胞仪测定阳性细胞比例,并且评估不同辐照条件对细胞增殖有无影响。结果在声强1.0W/cm2,辐照持续时间60s,微泡细胞比值60∶1的条件下,全氟丙烷人血白蛋白微球组EGFP阳性细胞比例较对照组显著提高(P<0.001),MTS染色细胞生存率大于90%。结论超声辐照全氟丙烷人血白蛋白微球能够安全地提高rAAV2-EGFP对人RPE细胞的感染效率。

重组腺病毒相关病毒携带人血管内皮生长因子165诱导家兔缺血心肌血管生成的研究

目的 将携带人血管内皮生长因子 16 5 (hVEGF 16 5 )cDNA的重组腺病毒相关病毒 (rAAV)载体注入家兔缺血心肌 ,观察血管内皮生长因子 (VEGF)的血管生成效应。方法 制作家兔急性心肌梗死模型 ,将rAAV hVEGF 16 5注入缺血心肌。 4周后取注射部位心肌 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)和免疫组织化学、Westernblot方法检测目的基因的表达 ,并计数注射部位心肌毛细血管数目 ,评价外源VEGF的生物学活性。结果 注射rAAV VEGF部位心肌VEGFmRNA及其蛋白的表达可持续 8周 ,而且比对照组增加。远隔脏器未见外源VEGF的播散和表达。注射rAAV VEGF部位毛细血管密度比对照组增加。结论 rAAV hVEGF 16 5可以有效地转染成年家兔心肌组织 ,外源基因稳定长期表达 ,同时能够刺激新血管生成 ,并具有良好的安全性。

电针刺激厌恶治疗酒依赖的临床疗效评价

目的:评估电针刺激厌恶疗法治疗酒依赖的疗效。方法:于2006-04/07在四川大学华西医院心理卫生中心住院患者中随机选择35例男性患者,均符合CCMD-3酒依赖的诊断标准,且自愿参加本实验,无电针刺激厌恶治疗禁忌证。平均年龄(41.4±8.2)岁,平均饮酒年限(21.3±8.0)年,平均日饮酒量350～1200mL(乙醇含量50～60mL/L)。采用简单随机方法随机分为电针刺激厌恶治疗组20例及对照组15例。两组在年龄、性别、种族及饮酒史方面差异无显著性意义。应用汉密顿焦虑量表评价患者的焦虑症状(其评分为0～4分,5级:0-无症状,1-轻,2-中等,3-重,4-极重)。自编饮酒渴求程度量表评估患者饮酒渴求程度(包括想到酒、看见酒、闻到酒及其他触发事件共4项,每项以0～7分评定(0=无,7=经历过的最高渴求程度,总分28分)。入院后第1周,两组均接受生理性脱毒治疗,包括苯二氮类药物及对症支持治疗。第2周开始,两组均进行饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分并参加团体心理治疗。电针刺激厌恶治疗组同时接受1个疗程的电针刺激厌恶治疗:治疗所用仪器为韩氏穴位刺激仪,治疗时将电极安放在前臂,将电流从小到大逐渐增加,直至患者难以忍受,再取其1/4的值为基本电流,治疗中视患者反应可略加调整;选择单一的饮酒行为作为目标行为。治疗开始时给患者呈现其既往最常饮用的酒(种类、浓度及酒具应与平时一致),令其想象一个饮酒情境,当患者饮酒欲望出现时,立即给予电刺激,电流强度以求助者出现不愉快情绪体验及相应生理反应为宜,每次持续电刺激10min,然后休息5min,再重复进行1次前述操作;在治疗过程中应予言语暗示增强其厌恶体验。电针治疗1次/d,10次为1个疗程。电针治疗疗程结束后比较两组的饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分。结果:35例患者均进入结果分析。①两组住院第2周时饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分差异不显著。②两组治疗后的饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分与治疗前比较均降低,治疗后电针刺激厌恶治疗组饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分均低于对照组[治疗前:饮酒渴求程度评分:19.75±1.86,20.27±2.46,汉密顿焦虑量表评分:17.90±4.05,18.60±4.21;治疗后:饮酒渴求程度评分:1.45±1.28,4.27±3.03,汉密顿焦虑量表评分:2.45±2.46,6.33±4.37,P<0.001,P<0.005]。③出院后2个月随访中,电针刺激厌恶治疗组有4例复饮,复饮率20.0%,对照组有5例复饮,复饮率33.3%,两组复饮率差异不显著。结论:电针刺激厌恶治疗可有效消退饮酒行为,复饮率倾向于更低。酒艹卓依赖的理想心理治疗方案应在其他治疗模型的基础上加以电针刺激厌恶治疗。

EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞体外转移能力影响

目的探讨EB病毒（epstein-barr virus,EBV）潜伏膜蛋白1（Iatent membrane protein1，LMP-1）对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）细胞体外转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA（small hairpin RNA，shRNA）干扰序列，构建2种重组腺相关病毒（recombinant adeno—associated virus，rAAV）载体：rAAV-增强型绿色荧光蛋白（enhance green fluorescent protein，EGFP）和rAAV-shRNA—LMP-1，以不同滴度rAAV-EGFP转染鼻咽癌C666—1细胞确定最佳转染效率（multiplicity of infection，MOI），rAAV-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1，RT-PCR鉴定抑制效率，划痕试验和基底膜穿透试验检验细胞转移能力的变化。结果以rAAV-EGFP5×10^4v．g（virus genome，病毒基因组数），细胞转染C666—1细胞，转染效率大于95％，RT-PCR鉴定rAAV-shRNA—LMP-1以5×10^4v．g／细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90％，划痕试验显示在相同的时间内，越过划痕边缘移动到空白处的细胞数明显减少（P〈0．01），基底膜穿透试验提示细胞穿透能力显著下降（P〈0．001）。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达，并显著抑制了肿瘤细胞的运动及穿透转移能力。

超声靶向辐照微泡造影剂介导重组腺相关病毒转染肾癌细胞

目的以肾癌细胞为研究对象,探索超声靶向破坏微泡（UTMD）技术对重组腺相关病毒（rAAV）转染率的影响。方法应用不同感染复数（MOI）的rAAV2转染786-0细胞观察转染率。用不同条件UTMD预辐照rAAV2,观察病毒活性。以不同条件UTMD联合rAAV2转染人肾透明细胞癌（786-0）细胞,测定转染率及细胞生存率,RT-PCR检测细胞内病毒载体基因拷贝数。结果 1×10^4-1×10^6MOI的rAAV2在786-0细胞的转染率为（17.28±2.44）%。UTMD声强≤2.0 W/cm2,时间≤120 s,微泡体积比≤40%,频率1 MHz,占空比（DC）50%,脉冲重复频率（PRF）100 Hz时,UT-MD辐照不影响rAAV2的转染活性。在不影响细胞生存率及rAAV2活性的参数下（声强1 W/cm2,时间60 s,微泡体积比20%,频率1 MHz,DC 50%,PRF 100 Hz）,UTMD介导rAAV2组细胞的转染率较单纯rAAV组提高2~3倍,并在5天内稳定维持提高效应;实时PCR显示,UTMD介导rAAV2组细胞内病毒载体量较单纯rAAV组提高近9倍。结论 UTMD可安全、有效且稳定地提高rAAV2在肾癌细胞的转染率。

基因重组hVEGF165腺相关病毒载体的包装和鉴定

目的:采用rAAV Helper free System构建hVEGF165腺相关病毒和增强型绿色荧光蛋白腺相关病毒,并初步鉴定其感染情况。方法:采用AAV-Helper free system包装系,构建hVEGF165腺相关病毒和增强型绿色荧光蛋白腺相关病毒载体质粒,应用电穿孔方法质粒共转染HEK293细胞,分离纯化后获得rAAV-hVEGF165和rAAV-EGFP,AVSachTMELISA法测定rAAV颗粒滴度,并鉴定其对HEK293细胞的感染情况。结果:包装纯化后获得病毒滴度可达到2×1011,电镜观察病毒颗粒均匀,病毒大小20～25nm,呈多面体形态。结论:成功包装hVEGF165腺相关病毒和增强型绿色荧光蛋白腺相关病毒。

重组1和2型腺相关病毒载体在小鼠心脏转导研究

目的探讨重组1和2型腺相关病毒(rAAV1和rAAV2)载体向小鼠心脏转导效果。方法14只昆明小鼠应用经腹心包腔内注射术,分别将携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)、荧光素酶(LUC)报告基因的rAAV1(rAAV1-EGFP组6只,rAAV1-LUC组1只)r、AAV2(rAAV2-EGFP组6只,rAAV2-LUC组1只)分别转导入小鼠的心包腔内,使用共聚焦显微镜观察EGFP在心肌的表达,冷光CCD相机体内监测LUC在心肌表达。结果rAAV1-EGFP组绿色荧光出现于心肌组织全层;rAAV2-EGFP组绿色荧光仅局限于心外膜下少数心肌细胞。rAAV1-EGFP组小鼠心肌细胞的表达范围和强度优于rAAV2-EGFP组。rAAV1-LUC组小鼠心肌组织表达强度、持续表达时间优于rAAV2-LUC组。结论在小鼠心脏中,rAAV1是一种比rAAV2更为有效的转基因载体。

腺相关病毒-2介导增强型绿色荧光蛋白基因转染神经干细胞的实验研究

目的探讨血清2型腺相关病毒(rAAV2)介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染神经干细胞后绿色荧光蛋白(GFP)的表达规律及转染对神经干细胞生物学特性的影响。方法应用荧光显微镜观察转染神经干细胞的绿色荧光蛋白表达情况。传代后第10天,比较转染组和对照组子代细胞形成的神经球数;分化后第14天行免疫组织化学检查,比较转染组和对照组神经元和胶质细胞的比例。结果转染后第3天,可观察到神经球发出绿色荧光,强度逐渐增强,并在第9天达到稳定状态(90%的神经球发出强弱不等的荧光)。传代后第10天,转染组子代细胞每井形成的神经球数为(17.83±1.35)个,与对照组比较无显著性差别(P>0.05)。分化后第14天,转染组神经元、胶质细胞的胞体与纤细突起均可见绿色荧光,转染组神经元与胶质细胞比例分别为35.3%±3.1%和55.4%±7.3%,与对照组比较无显著性差别(P>0.05)。结论rAAV2-EGFP可以稳定、高效转染神经干细胞,且不影响神经干细胞的生物学特性,是神经干细胞理想的基因标记方法。

超声靶向破坏微泡介导腺相关病毒为载体的基因转染

腺相关病毒(AAV)是相对理想的基因治疗载体,但其转染效率低。超声靶向破坏微泡(UTMD)通过声孔效应、内吞作用和化学作用促进细胞摄取,是简单、易于操作、安全的提高基因转染率的方法。目前UTMD介导AAV为载体的基因转染已用于研究心脏、眼睛和肝脏的基因治疗。本文对AAV载体的转染特点、UTMD介导AAV为载体的基因转染机制及其应用进行综述。

动物博卡病毒研究综述

当前对细小病毒病毒科（Parvoviridae）的病毒进行分类时,可以进一步细分为2个亚科,即感染脊椎动物的细小病毒亚科（Parvovirinae）和感染无脊椎动物的浓病毒亚科（Densovirinae）。细小病毒亚科可以进一步分为5个属,分别是细小病毒属（Parvovirus）、嗜红细胞病毒属（Erythrovirus）、依赖病毒属（Dependovirus）、

腺相关病毒载体介导的眼部基因治疗相关免疫应答的研究进展

腺相关病毒载体已广泛应用于眼部及全身疾病的基因治疗中,然而,临床试验结果表明基因治疗可能引发与免疫炎性反应相关的严重不良事件,从而影响基因治疗的安全性和有效性。基因治疗后引起的眼内免疫炎性反应被称为基因治疗相关葡萄膜炎,这已成为限制眼部长期和有效基因治疗的主要障碍之一。本文从基因治疗的免疫应答机制、相关葡萄膜炎的眼部表现、免疫炎症影响因素和防治策略4个方面进行综述,旨在为发展更安全、有效的眼部基因治疗提供参考。

水貂阿留申病的病性和诊断

阿留申病( Aleutian Disease)( AD)是水貂的慢性进行性病毒病。病原病毒属细小病毒科( Parvoviridae)。下有两个属,即细小病毒( Parvovirus,又称小DNA病毒)和依赖病毒(Dependovirus)(以前称腺联病毒)。其病毒特征:单链DNA,分子量1.5～2.0×10~6道尔顿。是二十面体对称,无包膜的颗粒,直径18～26纳米(nm)。CSCI浮密度为1.39～1.42克/毫升。耐热,耐酸,耐乙醚。依赖病毒必须要有腺病毒同时存在,它才可以复制。所有成员都在细胞核内繁殖。

AAV-hTGFβ_1体外转染鼠椎间盘再移植的实验研究

目的探讨腺相关病毒（AAV）介导人转化生长因子β1（hTGFβ1）基因体外转染大鼠椎间盘细胞后再移植至大鼠的椎间盘中,对椎间盘高度、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的影响。方法 Wistar大鼠20只,以L6-S1椎间盘作为空白对照组,不进行处理;L5-L6椎间盘作为针刺组,暴露以后用显微注射器从椎间盘的前外侧向椎间盘内注射磷酸盐缓冲液;L4-L5椎间盘作为实验组,手术暴露后用显微注射器从椎间盘的前外侧向椎间盘内注射AAV-hTGFβ1体外转染后的椎间盘细胞悬液。术前、术后4周对大鼠腰椎间盘进行X线检查,术后4周利用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对腰椎间盘组织中的Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的基因表达进行半定量分析。结果针刺组手术前后椎间盘高度系数的变化（%DHI）均低于实验组和空白对照组,差异有显著性（F=321.22,q=30.44、32.56,P〈0.05）;实验组手术前后%DHI略低于空白对照组,差异无显著性（P〉0.05）。针刺组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖表达明显低于实验组和空白对照组,差异有显著性（F=55.05、34.79,q=8.96~12.43,P〈0.05）;实验组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖表达与空白对照组比较,差异无显著性（P〉0.05）。结论 AAV-hTGFβ1基因体外转染大鼠椎间盘细胞后再移植至大鼠的椎间盘中,有助于椎间盘高度的维持并能提高椎间盘细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖表达。

辅助病毒依赖型腺病毒载体研究进展

辅助病毒依赖型腺病毒载体(helper-dependent adenoviral vector,HDAd)缺乏所有腺病毒的编码序列,与非复制型的第一代腺病毒载体(first-generation adenoviral vector,FGAd)相比,具有载体免疫原性低、安全、转移容量大和持续表达等特点,现广泛用于遗传性疾病、神经退行性疾病和肿瘤等的基因治疗和特异性靶向治疗研究。本文综述了HDAd构建和应用等方面的研究进展及未来的发展方向。

辅助病毒依赖型腺病毒载体转基因的体外表达效率

构建可表达增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的辅助病毒依赖型腺病毒载体(Helper-dependent adenoviral vector,HDAd),并完成大量制备、纯化和体外表达鉴定。荧光显微镜证实HDAd/EGFP可表达,电镜下观察到经CsCl纯化后的腺病毒的典型形态。分光光度计法测定病毒的浓度为4.0×1012颗粒数(Virus particle,vp)/mL。与可表达EGFP的第一代腺病毒载体(First generation adenoviral vector,FGAd)FGAd/EGFP进行了体外感染和转基因表达效率的比较研究,分别用约2000vp/细胞的HDAd/EGFP和FGAd/EGFP感染A549细胞,流式细胞仪检测EGFP的表达情况。通过相同时间点流式细胞仪分析EGFP的表达情况,可见HDAd/EGFP感染早期的A549细胞较FGAd/EGFP有更高的荧光表达率及更高的表达强度,显示HDAd载体具有转基因瞬时高表达的特性,是一种更有价值的疫苗载体。

CD21非依赖性EB病毒对人胃印戒细胞癌细胞系的感染

目的 探讨CD2 1非依赖性EB病毒 (EBV)对人胃印戒细胞癌细胞系 (HSC 39)的感染作用。方法 用Akata和P3HR 1EBV毒株感染HSC 39,有限稀释法对感染细胞进行克隆。结果 两种EBV毒株感染细胞中均可检测到EBV编码的小RNA(EBER)的表达 ,两种EBV毒株感染的亲代细胞及大多数细胞克隆表达EBV核抗原 (EBNA1) ,但不表达EBNA2、潜伏期膜蛋白 (LMP1)和LMP2A。表现为潜伏Ⅰ型感染。未感染的HSC 39细胞及P3HR 1感染的细胞克隆CD2 1表达阴性 ,而AkataEBV感染的部分细胞克隆CD2 1mRNA阳性。结论 EBV可能通过不依赖CD2 1受体的途径感染HSC 39,印戒细胞癌细胞系可用作EBV感染的靶细胞。

可表达新型甲型H1N1流感病毒血凝素蛋白辅助病毒依赖型腺病毒载体的构建

根据甲型H1N1流感病毒美国加利福尼亚毒株基因序列(A/California/07/2009(H1N1)),全基因合成甲型流感病毒血凝素(HA)编码基因,利用辅助病毒依赖型腺病毒载体(HDAd)骨架质粒pSC15B,构建可表达HA基因的HDAd/HA DNA分子载体,以磷酸钙法转染293Cre4细胞,与辅助病毒H14连续共感染,获得HDAd/HA载体,并大量制备和纯化,进行形态观察和体外感染的初步鉴定。透射电镜下观察HDAd/HA载体具有典型腺病毒形态;与辅助病毒H14共感染293细胞,RT-PCR检测HA基因有转录,显示成功构建HDAd/HA重组腺病毒载体,为甲型流感病毒体内免疫效果和免疫保护作用的研究奠定实验基础。

重组腺相关病毒介导的人血管内皮抑素基因治疗裸鼠子宫内膜异位症

目的研究重组腺相关病毒介导的人血管内皮抑素（endostatin）基因对子宫内膜异位症（内异症）裸鼠模型的治疗作用。方法构建携带人血管内皮抑素基因和增强绿色荧光蛋白（EGFP）基因的重组腺相关病毒载体rAAV2-endostatin—EGFP。将2008年11—12月在天津医科大学第二医院妇科因子宫肌瘤行子宫全切除术的12例患者的子宫内膜种植于60只裸鼠的盆腹腔内，建立内异症裸鼠模型，1周后分为3组：治疗组20只，于异位病灶局部直接注射rAAV2-endostatin—EGFP；阴性对照组20只，于病灶局部直接注射空白载体rAAV2-EGFP；空白对照组20只，于病灶局部直接注射等体积的磷酸盐缓冲液。分别于给药后1、2、3周各开腹1次，观察裸鼠盆腹腔病灶，同时留取异位病灶组织，检测各组裸鼠异位病灶中人血管内皮抑素蛋白表达情况、腺体数、微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况；于给药后3周检测各组裸鼠血清中雌二醇、孕酮水平。结果（1）采用腹膜种植法建立内异症裸鼠模型，种植成功率达100％。给药1周后，治疗组裸鼠异位病灶平坦、中央下陷，光镜下可见腺体数减少，腺腔变窄，细胞稀疏、呈萎缩状态。（2）荧光显微镜下观察，给药后1、2、3周，治疗组裸鼠异位病灶组织腺体和间质内出现绿色荧光；而阴性对照组和空白对照组裸鼠异位病灶组织内未见绿色荧光。（3）各组裸鼠给药后1、2、3周的异位病灶内腺体数，治疗组分别为（7．8±1．9）、（7．0±1．5）和（5．54-1．7）个，均低于阴性对照组[分别为（10．1±1．7）、（10．2±2．0）和（9．8±2．4）个]和空白对照组[分别为（10．2±2．2）、（10．0±2．0）和（9．7±2．2）个]，差异均有统计学意义（P〈0．05）；治疗组裸鼠给药后1、2、3周的异位病灶内腺体数比较，差异也有统计学意义（P〈0．05）。（4）各组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶内的MVD，治疗组分别为（12．2±1．5）、（11．4±2．1）、（9．0±1．4）条，均低于阴性对照组[分别为（16．5±1．7）、（16．5±1．9）、（16．9±1．9）条]和空白对照组[分别为（16．2±1．6）、（16．0±1.6）、（16．3±1．7）条]，差异均有统计学意义（P〈0．05）；治疗组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶内MVD比较，差异也有统计学意义（P〈0．05）。（5）各组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶中VEGF的阳性率及表达强度，治疗组分别为35％、30％、25％和1．60±0．43、1．33±0．30、1．03±0．36，均低于阴性对照组（分别为80％、75％、85％和2．43±0．53、2．43±0．29、2．66±0．45）和空白对照组（分别为85％、90％、90％和2．36±0．53、2．64±0．57、2．53±0．52），差异均有统计学意义（P〈0．05）；治疗组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶中VEGF阳性率及表达强度比较，差异也有统计学意义（P〈0．05）。（6）给药后3周，治疗组裸鼠血清中的雌二醇、孕酮水平分别为（48±7）pmol/L、（61±8）nmol/L，分别与阴性对照组[分别为（50±9）pmol/L、（60±10）nmol／L]和空白对照组[分别为（48±7）pmol/L、（58±10）nmol/L]比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论携带人血管内皮抑素基因的重组腺相关病毒可抑制裸鼠内异症病灶的血管生成，从而抑制异位病灶的生长，而不影响体内生殖激素水平，抗血管生成基因治疗可能成为内异症治疗的新选择。