依那普利拉对新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及NOS/NO系统的影响

目的:观察血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(ACEI)依那普利拉(Ena)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(CFb)增殖及其对一氧化氮合酶/一氧化氮系统(NOS/NO)的影响,探讨Ena抑制心肌成纤维细胞增殖的初步机制。方法:培养的新生Wistar大鼠CFb,分为对照组、模型组和3个剂量Ena给药组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;流式细胞仪测定细胞周期;硝酸还原酶法和分光光度法分别测定不同干预条件下CFb培养液中NOS/NO活性。结果:Ena能够显著抑制AngⅡ诱导的CFb增殖,Ena 3个剂量组作用24、48和72 h时间点的MTT值与模型组比较,差异具有显著性(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,Ena能提高细胞周期G0/G1百分率,降低S期百分率,差异具有显著性(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,Ena能够提高CFb上清液中NOS/NO水平,且随着用药剂量和作用时间增加,NOS活性和NO含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:Ena抗CFb增殖的作用与提高CFb NOS/NO系统活性,拮抗AngⅡ的生物效应有关。

Ang(1-7)和依那普利拉对大鼠严重烧伤早期心脏保护作用的研究

目的:观察Ang(1-7)和依那普利拉对烧伤早期心功能及心肌损伤的保护作用。方法:健康雄性Wistar大鼠24只,随机分为正常组、烧伤组、Ang(1-7)组和依那普利拉组。于烧伤后6H检测血流动力和心肌力学指标(SBP,DBP,LVSP,LVEDP,+LVdp/dt-_(max),-LVdp/dt_(max)),血清cTnI,及血清和心肌组织中AngⅡ含量变化。结果:ACEi组和Ang(1-7)组SBP,DBP,LVSP,+LVdp/dt-_(max),-LVdp/dt_(max)较烧伤组均明显增高(P<0.01),LVEDP和血清cTnI明显降低(P<0.01),ACEi组血清和心肌中AngⅡ较烧伤组明显降低(P<0.01)。结论:Ang(1-7)和ACEi均能有效的改善大鼠烧伤早期心功能,减轻心肌损伤。

HPLC-MS法同时测定人血浆中依那普利及其代谢物依那普利拉的浓度

目的建立一种可同时检测人血浆中依那普利及其代谢物依那普利拉的浓度HPLC-MS方法。方法采用HPLC-MS法，色谱柱为Thermo Hypersil-HyPURITY C18 （150mm×2．1mm，5μm），流动相为20mmol·L^-1醋酸铵（pH3．0，0．15％TFA）-甲醇＝47：53（v／v），流速为0．25mL·min^-1；正离子检测，电喷雾电离，喷雾电压4．5kV，选择性离子监测，分别监测m／z377（依那普利）、m／z349（依那普利拉）和m/z425（贝那普利）。结果依那普利和依那普利拉的定量下限均为1．56ng·mL^-1；线性范围均为1．6～400ng·mL^-1（n＝9，r1＝0．9997，r2＝O．9998）；提取回收率均〉80％，日内、日间变异均〈8．5％。结论该方法灵敏、快速、重现性好，可用于依那普利人体生物利用度和药物动力学研究。

人血浆中依那普利及依那普利拉的测定及其在人体内的药动学

目的建立人血浆中依那普利及其代谢物依那普利拉的HPLC-MS测定法，以研究健康志愿者口服依那普利片后的药动学过程。方法血浆样品加入内标贝那普利，以甲醇沉淀噩白后，进行HPLC-MS分析，色谱柱为Lierospher C18，流动相为甲醇-0．1％甲酸水溶液（66：34，V／V），内标为贝那普利，检测离子为m／z377．4（依那普利）、m／z349．3（依那普利拉）和m／z425．4（内标），传输区电压为80V。20名健康受试者121服20mg依那普利片，计算主要药动学参数。结果在1，300μg·L^-1范围内依那普利和依那普利拉与内标峰面积的比值与浓度的线性关系均良好。依那普利的日内RSD〈3．2％，日间RSD〈7．0％；依那普利拉的日内RSD〈3.2％，日间RSD〈11.3％。依那普利和依那酱利拉的t1/2分别为（1.5±0．4）、（10.1±2．6）h；ρmax分别为（222．9±57．6）、（86．51±44.8）μg·L^-1；tmax分别为（0．8±0．2）、（3．5±0．9）h。结论本方法灵敏度高，测定结果准确，可用于人体药动学及相对生物利用度研究。

依那普利拉通过调控ET-1水平和NO含量抗新生鼠心室成纤维细胞增殖

目的观察血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(angiotensinⅠconverting enzyme inhibitor,ACEI)依那普利拉(enalaprilat,Ena)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心室成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)增殖及其对内皮素-1水平和一氧化氮含量的影响,探讨Ena抑制CFb增殖的初步机制。方法以培养的新生Wistar大鼠CFb为研究对象,分为对照组、模型组、给药组3个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;羟脯氨酸(HYP)法测定胶原蛋白含量;流式细胞仪测定细胞周期;硝酸还原酶法和放射免疫法分别测定不同干预条件下CFb培养液中ET-1水平和NO含量。结果Ena能够明显抑制AngⅡ诱导的CFb增殖,降低HYP含量(P<0.05或P<0.01);提高细胞周期中G0/G1期百分率、降低S期百分率(P<0.05或P<0.01);降低ET-1水平、提高CFbNO含量,并呈剂量和时间依赖性(P<0.05或P<0.01)。结论Ena抗增殖的作用与改善CFbET-1水平和NO含量,即降低ET-1,升高NO含量,拮抗AngⅡ的生物效应有关。

依那普利拉治疗重症高血压动态血压监测

目的观察依那普利拉治疗重症原发性高血压的 2 4h降压疗效和不良反应。 方法 2 0例重症原发性高血压 (Ⅲ级 )患者在接受依那普利拉治疗前 3d ,未用任何降压药物。静脉注射依那普利拉 1 2 5mg +0 .9%NaCl2 0ml,每 6h注射 1次 ,共 4次。用动态血压监测仪监测 2 4h血压。第 1次注射依那普利拉 1 2 5mg ,以后每次注射根据血压调整依那普利拉的用量。 结果治疗后 2 4h动态血压 (ABPM)呈平稳下降 ,每 6h平均收缩压及舒张压均明显下降 (P <0 0 1)。注射后 6h及 2 4h降压有效率分别为 75 %和 90 %。无明显不良反应。 结论多次静脉注射依那普利拉治疗重症原发性高血压可使 2 4h血压平衡下降 。

依那普利拉注射液对高血压亚急症病人内皮素-1、Ang-Ⅱ、胱抑素C水平的影响

目的探讨依那普利拉注射液治疗高血压亚急症的疗效及对内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)、胱抑素C(Cys-tain C)水平的影响。方法选择我院心内科收治的168例高血压亚急症病人,随机分为对照组和治疗组。对照组给予硝普钠50mg加入5%葡萄糖注射液50mL,以0.3μg/(kg·min)微量泵泵入。治疗组给予依那普利拉注射液1.25mg加入生理盐水注射液20mL静脉输注,观察病人10min、2h、6h、8h、12h降压效果、呼吸、心率变化情况。检测治疗前及治疗后24hCys-tain C、ET-1、Ang-Ⅱ水平。结果治疗组总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后不同时间点收缩压(SBP)及舒张压(DBP)分别较治疗前均有显著下降,且SBP随用药后时间延长,下降更为显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组用药后10min SBP和DBP即开始下降,血压在用药后2h降低20%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组病人治疗后与治疗前比较,ET-1、Ang-Ⅱ、Cys-tain C均降低,治疗组较对照组降低明显,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论依那普利拉注射液降压平稳、安全,持续时间长,并能降低ET-1、Ang-Ⅱ、Cys-tain C水平。

依那普利拉抑制大鼠心室成纤维细胞增殖的实验研究

目的观察血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(ACEI)依那普利拉(enalaprilat,Ena)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFb)增殖作用及作用机制。方法以培养的Wistar大鼠乳鼠CFb为模型,实验分为对照组、AngⅡ组、用药组三个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测CFb增殖;羟脯氨酸法测定胶原含量;流式细胞仪、免疫细胞荧光染色法、免疫印迹法检测细胞周期和p27^(kipl)表达。结果Ena能够抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P<0.01,P<0.05),降低羟脯氨酸含量(P<0.01,P<0.05),提高p27^(kipl)表达(P<0.01,p<0.05)。结论Ena抑制CFb增殖与提高p27^(kipl)表达相关。

依那普利拉对新生鼠心室成纤维细胞增殖的影响

目的观察血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(angiotensinⅠ converting enzyme inhibitor,ACEI)依那普利拉(enalaprilat,Ena)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFb)增殖及其对细胞周期蛋白的影响,探讨Ena抗CFb增殖的机制。方法以培养的新生Wistar大鼠乳鼠CFb为实验模型,实验分为对照组、AngⅡ组、用药3个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测CFb增殖;羟脯氨酸法测定胶原量;流式细胞仪、免疫细胞荧光染色法、免疫印迹法测定细胞周期和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1(cyclin dependent kinase inhib-itor,CKI)表达。结果Ena能够抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P<0·01,P<0·05),降低羟脯氨酸含量(P<0·01,P<0·05),提高细胞周期抑制蛋白p27kip1表达(P<0·01,P<0·05)。结论Ena能够通过提高p27kip1含量抑制AngⅡ诱导的CFb增殖。

依那普利拉注射液治疗高血压亚急症疗效观察

目的探讨依那普利拉注射液治疗高血压亚急症24 h降压疗效和安全性。方法将164例高血压亚急症患者随机均分成3组:A组50例,B组50例,C组64例。A组给予卡托普利25 mg舌下含化,B组给予硝普钠0.3μg/(kg·min)静脉泵入,C组给予依那普利拉注射液1.25 mg静脉推注。观察患者用药后10 min、2 h、6 h、12 h、24 h降压效果,临床症状、体征、呼吸、心率变化情况。结果 C组总有效率显著高于A、B组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组治疗后不同时间点收缩压及舒张压较治疗前下降,C组用药后10 min收缩压及舒张压即开始下降,血压在用药后2 h降低最高值的20%,血压下降情况与A组、C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。用药后6 h、12h、24 h 3组间血压下降情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组不良反应发生率明显高于A、C组(P<0.05)。结论依那普利拉注射液降压平稳、安全,持续时间长,治疗高血压亚急症临床疗效好,无明显不良反应。

依那普利拉抗心肌成纤维细胞增殖的分子机制

目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)依那普利拉(Ena)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红(Chele)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生鼠心肌成纤维细胞(CFb)增殖、细胞周期、Ⅰ型胶原纤维(collagenⅠ)、PKC和细胞周期蛋白cyclinD1蛋白表达的影响,阐明Ena抗CFb增殖的分子机制。方法:培养的新生Wistar大鼠CFb分为对照组、AngⅡ组、Chele+AngⅡ组、Chele+AngⅡ+Ena组和AngⅡ+Ena组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;免疫细胞化学染色(IC)法测定collagenⅠ含量;流式细胞术(FCM)检测细胞周期;免疫印迹法检测PKC和细胞周期蛋白cyclinD1表达。结果:与AngⅡ组比较,Chele和Ena组及Chele+AngⅡ+Ena组CFb增殖率均显著降低(P<0.05或P<0.001),collagenⅠ含量降低(P<0.05或P<0.01),CFb G0/G1期细胞百分率升高,S期细胞百分率降低(P<0.05或P<0.01),PKC和cyclinD1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:Ena和Chele能抑制AngⅡ诱导的CFb增殖和胶原蛋白分泌,其机制可能是通过抑制PKC-cyclinD1转导通路实现的。

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中依那普利和依那普利拉的浓度

目的建立人血浆中依那普利和依那普利拉含量测定的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/M S）方法。方法血浆样品加入内标（贝那普利拉）,以含0.1%甲酸的甲醇沉淀蛋白后,进行HPLC-M S/M S分析。色谱柱为Hedera ODS-2 C18（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为0.4 m L/min,柱温为30℃,采用多反应监测（M RM）方式进行定量分析,用于监测的离子质荷比分别为m/z377.2→m/z 234.3（依那普利）、m/z 349.3→m/z 206.2（依那普利拉）和m/z 397.4→m/z 351.4（内标,贝那普利拉）。结果人血浆中依那普利和依那普利拉的线性范围分别为0.2~200 ng/m L（r=0.999 9）、0.5~120 ng/m L（r=0.999 3）;批内、批间精密度均〈11.3%。结论该方法快速、灵敏、专属性强,可用于人血浆中依那普利和依那普利拉浓度的测定。

依那普利拉通过调控TGF-β_1表达对抗AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖

目的探讨血管紧张素转换酶抑制剂依那普利拉(enalaprilat,Ena)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生鼠心室成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)增殖及对羟脯氨酸水平和TGF-β1蛋白表达的影响及机制。方法以培养的新生Wistar大鼠CFb为研究对象,分为对照组,模型组,用药组三个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;羟脯氨酸法测定胶原含量;逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和流式细胞仪(FCM)检测Ena对TGF-β1转录及表达的影响。结果 Ena能够显著抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P<0.05或P<0.01),降低羟脯氨酸含量(P<0.05或P<0.01);抑制TGF-β1转录及其蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论 Ena抗CFb增殖的作用与抑制TGF-β1转录和表达、拮抗AngⅡ的生物效应密切相关。

依那普利拉注射剂的HPLC测定

以反相高效液相色谱法测定依那普利拉注射剂的含量。采用国产ＹＷＧ－Ｃ１８柱，乙腈－ｐＨ３．０磷酸盐缓冲液（２８：７２）为流动相，紫外检测波长为２１５ｎｍ，平均回收率为９９．８０％，ＲＳＤ为０．８３％。方法简便、准确。

依那普利拉对严重烧伤大鼠心肌损伤的保护作用及其机制探讨

目的探讨应用依那普利拉的早期干预对严重烧伤大鼠心肌损害的保护作用,并对其作用机制进行初步研究。方法 66只雌性清洁级SD大鼠,随机将大鼠分为对照组6只、烧伤组30只、治疗组30只。烧伤组和治疗组分为伤后1、3、6、12、24 h 5个时相点,每时相点6只大鼠。烧伤组与治疗组大鼠采用热水直接烫伤法制作严重烧伤模型,伤后予以腹腔注射补液抗休克,治疗组加用依那普利拉早期干预,均在伤后各时相点行腹主动脉采血,留取心脏组织,ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、白介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平、心肌AngⅡ水平,部分心肌组织应用TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果烧伤组与治疗组血清cTnI水平在伤后各时相点较对照组均有显著性升高(P<0.05),治疗组各时相点血清cTnI水平升高幅度均低于烧伤组(P<0.05);烧伤组与治疗组血清IL-1、TNF-α水平各时相点较对照组均有显著性升高(P<0.05),治疗组各时相点血清IL-1、TNF-α水平升高幅度均低于烧伤组(P<0.05);烧伤组心肌匀浆及血清中AngⅡ在伤后显著性升高(P<0.05),治疗组各时相点血清及心肌匀浆中AngⅡ水平升高幅度均低于烧伤组,其中伤后1、12 h差异有统计学意义(P<0.05);烧伤后心肌细胞凋亡数量在各个时相点显著增加,治疗组各个时相点凋亡数量显著少于烧伤组(P<0.05)。结论严重烧伤大鼠早期即发生心肌损伤,依那普利拉对烧伤大鼠心肌损伤起保护作用,其保护作用机制可能与减少烧伤后IL-1、TNF-α、AngⅡ的释放,减少心肌细胞凋亡有关。

依那普利拉注射液细菌内毒素检查法研究

目的探讨依那普利拉注射液细菌内毒素检查的方法。方法按《中国药典》2005年版二部附录XI E进行实验和结果判断。结果依那普利拉注射液对细菌内毒素检查法无干扰作用,其细菌内毒素限值L为2.5EU.mg-1。结论用细菌内毒素检查法检查依那普利拉注射液合理可靠。

依那普利拉对顿抑心肌功能的保护作用

目的:试图通过药物促使短暂缺血后顿抑心肌朝着有利方面转化,促使心功能更快恢复。方法:采用犬颈总动脉—左旋支旁路模型,27只犬随机分为3组。结果:未用药组(n=9)旁路闭塞后心功能下降,再通后仍继续下降,生理盐水组(n=9)经旁路滴入后心功能指标无改善,而用依那普利拉[Enalaprilat,n=9,0.2 ml(0.01mg)/min]滴入5分钟,左心室压力下降最大速率(—dp/dt max)由161±53 kPa/s(1208±398 mmHg/s)升至175±75 kPa/s(1313±553 mmHg/s),滴入30分钟时达193±56 kPa/s(1448±420 mmHg/s)(P<0.05,与滴入即刻比较)。左心室压力上升最大速率(+dp/dt max)亦有明显升高。结论:依那普利拉似可加速顿抑心肌功能的恢复,可能具有心肌保护作用。

依那普利拉通过调控PKC/TGF-β_1通路抗鼠心室成纤维细胞增殖

目的依那普利拉(Ena)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜赤碱(Chele)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生鼠心室成纤维细胞(CFb)增殖、细胞周期、Ⅲ型胶原纤维(CollagenⅢ)、PKC和转化生长因子(TGF-β1)蛋白表达的影响,揭示Ena抗CFb增殖的内在机制。方法培养的新生Wistar大鼠CFb分为对照组、AngⅡ组、Chele+AngⅡ组、Chele+AngⅡ+Ena组和AngⅡ+Ena组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;免疫细胞化学染色(IC)法测定CollagenⅢ含量;流式细胞仪(FCM)检测细胞周期;免疫印迹法(WB)检测PKC和TGF-β1表达。结果与AngII组相比较,Chele和Ena组及Chele+AngⅡ+Ena组能显著降低CFb增殖率(P<0.05或P<0.001)、降低CollagenⅢ含量(P<0.05或P<0.01),提高CFb G0/G1期细胞百分比,降低S期细胞百分比(P<0.05或P<0.01),抑制PKC和TGF-β1蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论 Ena和Chele能显著抑制由AngⅡ诱导的CFb增殖和间质胶原分泌,可能通过抑制PKC-TGF-β1信号通路实现。

依那普利拉注射液联合氢氯噻嗪治疗高血压危象的临床疗效观察

目的研究依那普利拉注射液联合氢氯噻嗪对高血压危象患者的临床疗效。方法纳入2019年3月至2021年3月该院急诊科收治的80例高血压危象患者作为研究对象,按随机数字表法分为观察组与对照组,各40例。对照组患者采用依那普利拉注射液治疗;观察组在对照组基础上联合氢氯噻嗪治疗。比较两组患者的治疗效果,治疗前后的心率和血压,以及不良反应情况。结果观察组治疗总有效率为95.0%,明显高于对照组的77.5%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.165,P<0.05)。治疗前两组心率、收缩压及舒张压比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组心率、收缩压及舒张压均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率为17.5%,与对照组不良反应发生率(12.5%)比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.392,P>0.05)。结论依那普利拉注射液联合氢氯噻嗪治疗急诊高血压危象患者的效果较好,能有效降低患者血压和心率,安全性较高,有一定临床应用价值。