斑马鱼侧线神经丘毛细胞发育的研究

目的 研究斑马鱼后部侧线系统神经丘细胞早期迁移及增殖分化过程。方法 选取不同发育阶段的野生型斑马鱼胚胎,采用免疫组织化学染色和原位杂交方法,观察斑马鱼后部侧线原基的迁徙以及神经丘的沉积过程,Brd U 标记原基增殖细胞,观察原基细胞团的增殖情况;选择不同发育时期的转基因斑马鱼（Brn3c ：mGFP ）胚胎,统计绿色荧光蛋白（GFP ）阳性表达的神经丘毛细胞数目;采用活细胞染料F M1 43FX标记神经丘中的功能性毛细胞并进行统计计数,Brd U 标记神经丘增殖细胞,观察神经丘细胞的增殖情况。结果 受精后20 小时的斑马鱼侧线器基板沿水平肌隔开始向后迁移并形成后部侧线神经丘,迁徙速度约为1 .7 肌节/小时;受精后48 小时,初级后部侧线系统基本发育完全,包括躯干部的5～6 组神经丘细胞团,尾部的2～3 组神经丘细胞团;受精后3 5、7、天时的斑马鱼神经丘毛细胞数量分别为5 .68±1 .46、10 .10±0 .99、12 .45±1 .32 个;F M1 43FX阳性毛细胞数量分别为3 .68±1 .11、8 .18±1 .86、10 .22±1 .24 个。结论 受精后3～7 天是斑马鱼侧线神经丘毛细胞发育的活跃时期。

西伯利亚鲟侧线神经丘发育过程的观察

研究对西伯利亚鲟(Acipenser baerii)的胚后幼鱼进行石蜡切片HE染色,同时利用荧光染料DiA[4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide]对侧线管中侧线神经丘毛细胞特异性标记的特点,示踪了西伯利亚鲟胚后仔鱼各个时期侧线神经丘分化发育的过程。结果显示,西伯利亚鲟侧线管内侧线神经丘毛细胞如纤毛状,呈竖立紧密排列。出膜3d仔鱼眼眶后神经基板发育分化活动剧烈,出膜10d的仔鱼眼眶后方的神经基板分化出眼眶上下侧线神经丘的两个分支,同时眼眶后神经基板进一步向后分化发育在眼眶后部形成躯干侧线神经丘,但整个侧线神经丘还未完全发育完成,待出膜15d时,眼眶上下和躯干侧线神经丘已基本发育完全,出膜22d的仔鱼侧线神经丘发育基本完成。研究为今后深入研究西伯利亚鲟侧线发育过程中的神经分化发育、细胞迁移奠定了初步形态学基础。