大花蕙兰‘黄金小神童’胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

为解决大花蕙兰园艺品种‘黄金小神童’(Cymbidium Golden Elf‘Sundust’)人工繁育周期长、系数低等问题,该研究以其侧芽茎尖为外植体,在1/2MS+1.0 mg·L^(-1)NAA+50 g·L^(-1)香蕉泥+15 g·L^(-1)蔗糖中培养60 d后,以获得的愈伤组织与原球茎混合物为材料,通过L_(9)(3)^(4)正交与完全组合实验研究不同因素及组合对‘黄金小神童’胚性愈伤组织和原球茎发生及增殖的影响,进而建立‘黄金小神童’高效、稳定的丛芽增殖和植株再生体系。结果表明:(1)在MS+2.0 mg·L^(-1)6-BA+150 mL·L^(-1)椰汁+20 g·L^(-1)蔗糖中,培养70 d后增殖系数达8.13,同时可获得桑葚状原球茎团。(2)原球茎团在MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+1.0 mg·L^(-1)NAA中培养70 d后,原球茎发育为幼芽,丛芽发生系数可达5.36;此时,将由原球茎诱导得到的簇状丛芽转接至MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+1.0 mg·L^(-1)NAA中,以“芽繁芽”方式增殖,其增殖系数也达到4.28,此时可建立起稳定的增殖体系。(3)无菌苗生根则在MS+1.0 mg·L^(-1)NAA+150 g·L^(-1)香蕉泥中进行,培养60 d可得到具4~7片真叶、高度为8~10 cm的健壮生根苗,生根率达96.5%;再生苗经露苗后移栽到松树皮和山基土体积比为3∶2的基质中,成活率在85%以上。通过愈伤组织与原球茎-胚性愈伤组织与原球茎-原球茎-丛芽-再生植株途径最终建立了‘黄金小神童’高效、稳定的丛芽快速繁殖体系,该研究结果为进一步开展其人工繁育和遗传转化提供了实验依据,也为兰科其他物种的无性快速繁殖提供了参考。