基于脂质与动脉粥样硬化通路探讨侯氏黑散治疗脑缺血再灌注损伤的机制研究

目的利用网络药理学和动物实验验证分析《金匮要略》侯氏黑散治疗脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)的成分、靶点及信号通路,并通过脂质与动脉粥样硬化通路研究其作用机制。方法在TCMIP、GeneCards和OMIM疾病数据库获取侯氏黑散与CIRI的交集靶点,使用STRING网站构建交集靶点的蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,使用Cytoscape软件筛选核心靶点和成分并构建“成分-靶点”网络。使用R语言进行GO和KEGG富集分析,使用AutoDock Vina验证成分与靶点的对接能。动物实验中将60只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、西药组和侯氏黑散低、中、高剂量组。用线栓法制备大脑中动脉闭塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)大鼠模型,造模7 d后通过改良神经功能评分(modifiedneurological severity score,mNSS)评估神经功能,TTC染色检测脑梗死体积,HE染色观察脑组织病理变化,全自动生化分析仪检测血清低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(how density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglycerides,TG)含量,ELISA检测血清白介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,免疫组织化学和RT-qPCR检测脑组织中HSP90AA1、NF-κB1、SRC的蛋白及mRNA表达水平。结果从侯氏黑散中筛选得到508种有效成分及549个药物靶标,1592个CIRI疾病靶点,交集靶点共153个,核心靶点为HSP90AA1、SRC、NF-κB1,与棕榈酸、三磷酸腺苷、穿贝海绵甾醇、腺苷等核心成分均具有较强的结合力。GO富集分析的生物过程主要涉及对外源性刺激的反应、位置维护、炎症反应的调节等,KEGG通路分析主要富集在脂质和动脉粥样硬化、cAMP信号通路、花生四烯酸代谢等。与模型组相比,侯氏黑散各剂量组mNSS评分、脑梗死率、血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量、脑组织HSP90AA1蛋白表达水平和HSP90AA1、NF-κB1和SRC mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01);侯氏黑散高剂量组LDL-C、TC、TG水平降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平增高(P<0.05);侯氏黑散中剂量组TG水平降低(P<0.01);西药组和侯氏黑散中、高剂量组NF-κB1和SRC蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。与侯氏黑散低剂量组相比,侯氏黑散中、高剂量组mNSS评分、脑梗死率,血清TG水平,血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量,脑组织中NF-κB1 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01);侯氏黑散高剂量组脑组织HSP90AA1、NF-κB1和SRC蛋白表达水平和HSP90AA1、NF-κB1 mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。与侯氏黑散中剂量组相比,侯氏黑散高剂量组mNSS评分、脑梗死率,血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量,脑组织HSP90AA1蛋白表达水平和NF-κB1 mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论侯氏黑散以多成分、多靶点、多通路治疗CIRI,其中抑制核心靶点HSP90AA1、NF-κB1、SRC的mRNA和蛋白表达,调控脂质与动脉粥样硬化通路是侯氏黑散治疗CIRI的重要机制。

侯氏黑散治疗缺血性中风的研究进展

在祖国医学的观点中,缺血性脑血管疾病被视为“中风”疾病是其中一个重要组成部分。最近几年的研究报告指出,经方侯氏黑散能够通过其降低血压、减少血脂和优化微循环的核心机制,为缺血性脑血管疾病的治疗带来显著的效果。同时还证实了该方药有良好的降低血液粘度的作用。这个药方源于《金匮要略•中风历节病篇》,并被医圣张仲景视为治疗中风的首选药方。该方以柴胡疏肝散合当归四逆汤为主药组方而成,并随症加减变化而有不同功用。从仲景的描述中,我们可以看出中风这一疾病已经形成了“内虚邪中”与“风药治风”的学术观点。因此,我们认为该方应成为防治缺血性脑血管病的重要基础方之一。本研究旨在深入探索侯氏黑散在治疗缺血性脑血管疾病中的作用机制,期望为后续的深度研究和临床实践提供有益的指导和参照。

侯氏黑散中风药、补虚药调控AQP-4、Cx43对脑缺血大鼠星形胶质细胞活化的影响

目的观察侯氏黑散方对脑缺血大鼠星形胶质细胞活化的影响,探讨其作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、风药组(7.7 g/kg)、补虚药组(2.59 g/kg)和全方组(10.5 g/kg),每组6只。各给药组预先灌胃相应药液3 d,假手术组和模型组灌胃等体积生理盐水,第4日灌胃20 min后采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,造模后每12 h给药1次,连续3 d。HE染色观察大鼠缺血侧脑组织病理变化,免疫荧光染色检测缺血侧侧脑室内囊胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、缝隙连接蛋白43(Cx43)表达,免疫组化染色检测缺血侧侧脑室内囊水通道蛋白-4(AQP-4)表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑组织大片坏死,血管管周间隙增大,缺血侧侧脑室内囊GFAP、Cx43、AQP-4表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,风药组、补虚药组和全方组大鼠星形胶质细胞损伤明显减轻,风药组、全方组缺血侧侧脑室内囊GFAP、Cx43表达明显降低(P<0.01),各给药组缺血侧侧脑室内囊AQP-4表达明显降低(P<0.01)。结论侯氏黑散及风药拆方可通过调节GFAP、AQP-4及Cx43表达抑制脑缺血大鼠星形胶质细胞活化,减轻其超微结构损伤及水肿。补虚药可协同风药减少水内流,减轻水肿,符合侯氏黑散重用风药的组方思想。

侯氏制碱法产物碳酸钠中氯化钠的有效去除

侯氏制碱法是中学和大学一个非常重要的无机合成实验,但由于沉淀过程中的包夹和吸附,产物中含有一定量的NaCl杂质,给Na_(2)CO_(3)产率真实性带来一定的假象。本研究使用乙醇洗涤中间产物Na_(2)CO_(3),实现终产物纯化。通过开展一系列单变量实验,探究了乙醇溶液洗涤Na_(2)CO_(3)去除NaCl的条件,比较了乙醇、甲醇、正丁醇、异丁醇为洗液对产物中NaCl的去除效果;探究了乙醇的回收率及回收的乙醇重复使用情况。在被选择的溶剂当中,甲醇的洗涤效果最好,其次是乙醇(甲醇>乙醇>正丁醇>异丁醇)。在室温环境下,用浓度为90wt.%的乙醇(m乙醇/m反应物=3∶1)在3min内浸润洗涤Na_(2)CO_(3),经过一次洗涤后,终产物Na_(2)CO_(3)中NaCl杂质含量由11.23wt.%降到0.12wt.%。5次重复实验后,乙醇回收率达到87.90wt.%。本研究结果为侯氏制碱法产物中氯化钠杂质去除难题提供了一个绿色、低成本的解决方案。

侯氏制碱模拟实验的改进

用注射器代替胶头滴管和量筒转移饱和食盐水,用医用引流袋代替集气瓶收集氨气和二氧化碳,成功地将侯氏制碱模拟实验带进课堂。改进后的实验具有现象明显、成功率高、见效快等优点,“碳酸氢钠饱和而析出”这一实验现象尤为突出。可作为初、高中“侯氏制碱法”原理教学的辅助实验。

从寒热并用法探析侯氏黑散治疗缺血性中风的理论

本文通过对侯氏黑散的源流、配伍特点、方证内涵进行探析,可知此方是张仲景博采众方所得,其“寒热温凉熔于一炉,清散补泄集于一方”的组方特点体现了中医“寒热并用”的方剂配伍理论。全方具有温阳益气养血、祛风清热化痰,内外风同治之功,主治以气血亏虚,运行不畅,复感外邪,痰湿郁热,引动肝风,痹阻经脉为主要病机的“大风”。侯氏黑散治寒、热、虚、实各有所为,治风、痰、气、血、瘀、热面面俱到,是中医治疗中风的“第一方”,其方证内涵与气虚血瘀型缺血性中风的病因病机相合,故分析总结侯氏黑散与缺血性中风的关系及其治疗缺血性中风的特点和理论,以期为侯氏黑散的运用提供新思路。

B超引导下的中医手法整复联合胫骨髓内钉治疗张-侯氏骨折疗效观察

目的探讨B超引导下的中医手法整复联合胫骨髓内钉治疗张-侯氏骨折的临床疗效。方法选择2019年6月—2022年2月在南京中医药大学附属南京中医院诊断为张-侯氏骨折并接受手术治疗的患者25例,其中接受中医手法整复联合胫骨髓内钉手术治疗的患者11例(5例在B超引导下治疗者为髓内钉A组,另外6例为髓内钉B组),接受传统钢板内固定治疗的14例患者为钢板组,回顾性分析比较3组患者手术及康复相关指标。结果髓内钉A组和髓内钉B组术中出血量少于钢板组,手术时间、住院时间、骨折愈合时间短于钢板组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。髓内钉A组手术时间短于髓内钉B组,术中透视次数少于髓内钉B组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。钢板组透视次数少于髓内钉B组,差异有统计学意义(P<0.05)。接受髓内钉手术的11例患者术后6个月功能优良率较钢板组患者高(P<0.05),术后12个月功能优良率无明显差异(P>0.05)。髓内钉A组和髓内钉B组患者术后1个月、3个月、6个月、12个月疼痛VAS评分均较钢板组低(P均<0.05),髓内钉A组和髓内钉B组术后各时间点疼痛VAS评分相近(P均>0.05)。髓内钉A组和髓内钉B组患者术后均无严重并发症发生,钢板组中2例患者出现伤口乙级愈合、1例出现骨不连。结论在张-侯氏骨折的临床治疗中,B超引导下的中医手法整复联合胫骨髓内钉手术具有手术时间短、术中创伤小、术后恢复快、并发症少等优势,且相比较于传统髓内钉手术可进一步缩短手术时间,减少术中透视次数,并且可缩短临床医师对髓内钉手术的学习曲线。

医巫闾山满族剪纸艺术特征与创新发展——张侯氏剪纸艺术研究

医巫闾山满族剪纸继承人张侯氏以满族生活与萨满巫文化为主要题材进行剪纸创作,内容丰富多样,风格简洁粗犷。本文以张侯氏剪纸作品为例,分析张侯氏满族剪纸现代题材取代传统剪纸题材的继承与创新,探索分析医巫闾山张侯氏满族剪纸的传承困境及创新发展之路,对推动医巫闾山满族剪纸的发展、促进我国非物质文化遗产的保护与传承具有重要意义。

从腹中寒辨证应用侯氏黑散治疗儿科风类疾病

侯氏黑散出自《伤寒杂病论》,该方组方配伍复杂,一方之中温凉并用,虚实寒热并见,而文中有关侯氏黑散的条文记载却极少。后世医家多应用侯氏黑散治疗成人中风类疾病,而应用该方治疗小儿疾病的记载则少见,与小儿疾病相关的临床研究也鲜有报道。总结在临床上应用侯氏黑散治疗儿科相关疾病取得良效的经典验案,分析归纳其病机、证候特点及应用指征,提出应用侯氏黑散时应抓住“风邪致病”与“腹中寒”这2个辨证要点,值得临床推广。

侯氏黑散加减治疗眩晕的效果分析

目的:探讨侯氏黑散加减治疗眩晕的效果。方法:选取2021年10月—2022年10月北京市海淀区西北旺镇社区卫生服务中心收治的眩晕患者40例作为研究对象,根据随机数字表法分为对照组和观察组,各20例。对照组给予盐酸氟桂利嗪胶囊治疗,观察组给予侯氏黑散加减治疗。比较两组治疗效果、中医证候积分及复发情况。结果:观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P=0.018)。治疗后,观察组主证、次证、舌脉象积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组复发率低于对照组,差异有统计学意义(P=0.028)。结论:侯氏黑散加减治疗眩晕可以在短期内改善眩晕症的临床症状,效果显著,安全可靠。

经方侯氏黑散对脑缺血损伤大鼠神经可塑性相关蛋白的影响

目的观察经方侯氏黑散对大脑中动脉闭塞大鼠模型缺血脑组织神经生长相关蛋白43(growth-associated protein-43,GAP-43)、微管相关蛋白2(microtubule-associated protein-2,MAP-2)、突触体素(synatophysin,SYN)表达的影响,探讨其促进脑缺血后大鼠神经功能康复的机制。方法用线栓法阻断大脑中动脉,建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,用免疫组化与图像分析相结合的方法观察缺血脑组织的轴突、树突、胞体以及突触损伤及修复情况。结果模型组大鼠MAP-2免疫阳性树突稀疏,SYN免疫反应物明显减低,仅能看到散在点状物,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。侯氏黑散组大鼠海马CA1区、CA3区GAP-43表达面积和表达强度均明显高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。侯氏黑散组大鼠MAP-2和SYN积分光密度值均明显高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经方侯氏黑散能够上调GAP-43、MAP-2以及SYN的表达,可有效诱导脑损伤修复过程中神经元结构蛋白的合成,促进神经再生和神经功能的康复。

侯氏黑散对脑缺血大鼠神经导向因子及Rho GTP酶的影响

目的探讨侯氏黑散对脑缺血大鼠神经导向因子Netrin-1/DCC和分子开关Rac1/Cdc42/RhoA表达的影响。方法采取线栓法制备永久性大脑中动脉栓塞(permanent middle cerebral artery occlusion,p MACO)模型。大鼠采用数字表法随机分为假手术组、模型组、侯氏黑散小剂量组、侯氏黑散中剂量组、金纳多组。运用Western blotting法和RT-PCR法检测术后7d大鼠缺血侧皮质Netrin-1、DCC、Rac1、Cdc42、RhoA蛋白和基因的表达。结果与模型组相比,侯氏黑散中剂量组、金纳多组大鼠Netrin-1蛋白的表达明显升高(P<0.01),侯氏黑散中剂量组大鼠Netrin-1基因的表达升高(P<0.05);侯氏黑散小剂量组、侯氏黑散中剂量组、金纳多组大鼠DCC、Rac1、Cdc42蛋白和基因的表达明显升高(P<0.05);侯氏黑散小剂量组、侯氏黑散中剂量组、金纳多组大鼠RhoA蛋白和基因的表达则明显下降(P<0.01)。结论侯氏黑散通过对脑缺血大鼠神经导向因子Netrin-1/DCC和分子开关Rac1/Cdc42/RhoA的调节促进脑缺血后神经功能的修复。

侯氏黑散对缺血性脑中风大鼠模型的保护作用

侯氏黑散是张仲景治疗中风的第一方。为了探求侯氏黑散治疗中风的机制,从存活率、神经功能评分、血清乳酸脱氢酶(LDH)三个方面观察其对大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO)的影响。结果:侯氏黑散可以明显提高MCAO大鼠的存活率,降低MCAO大鼠的神经功能评分及其血清LDH水平。

侯氏黑散化学成分对脂多糖诱导BV2细胞活化中炎性反应因子分泌平衡的影响

目的探究侯氏黑散方中绿原酸(chlorogenic acid,CGA)、木犀草苷(cynaroside,CYN)、木犀草素(luteolin,LUT)、人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,GS-Rg1)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小胶质细胞炎性反应因子表达的影响。方法实验分对照组、模型组、CGA、CYN、LUT、GS-Rg1处理组。利用LPS诱导BV2细胞过度活化,建立脑缺血后小胶质细胞炎性反应损伤体外模型;CCK-8法检测各组细胞活性;Griess法检测各组细胞上清中一氧化氮(nitric oxide,NO)的量;酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组细胞上清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-10(interleukin-10,IL^(-1)0)、转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)的量;蛋白印迹法(Western blotting,WB)检测各组细胞p-p65、p-IκBα蛋白表达。结果与模型组相比,不影响细胞生存活性的情况下,CGA、CYN、LUT、GS-Rg1可显著降低细胞上清中促炎因子NO、TNF-α、IL-6浓度;GS-Rg1可显著升高抑炎因子IL^(-1)0、TGF-β_1浓度;CGA、CYN、LUT、GS-Rg1可显著降低细胞中p-p65、p-IκBα蛋白浓度。结论 CGA、CYN、LUT、GS-Rg1分别从促炎、抑炎两方面调节脑缺血后炎性反应相关因子分泌的平衡,其机制与核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路活化有关。

安徽省兽类一属和种新纪录——侯氏猬

林猬属(Mesechinus)隶属于劳亚食虫目(Eulipotyphla)猬科(Erinaceidae)猬亚科(Eri-naceinae),包含达乌尔猬(M.dauuricus)、侯氏猬(M.hughi)、小齿猬(M.miodon)和高黎贡林猬(M.wangi)4种(Ai et al.,2018)。该属曾被归入刺猬属(Erinaceus)(Pavlinov and Rossoli-mo,1987)或大耳猬属(Hemiechinus)(Corbet,1988)。Frost(1991)根据其道上孔窄而浅,额部无裸露部分,耳长几与棘刺等长等特征将其独立出来。该属除最近新命名的高黎贡林猬分布在云南高黎贡山之外,其余种类主要分布在我国中北部的陕西、山西、内蒙古等省(自治区)并延伸至蒙古国和俄罗斯等国。侯氏猬最早由Thomas(1908)描记,模式产地在陕西省宝鸡市。

浅析侯氏黑散方后嘱

张仲景承《内经》"邪害空窍"的观点,根据风邪为病的具体情况,采用初服侯氏黑散二十日,用温酒调服,使药物迅速发挥填充皮毛肌腠的空窍;而后冷食之六十日乃图缓治,意在药积在腹中不下填补人体最大空窍。侯氏黑散篇对风邪为病的病因病机进行阐述,可知风邪为病乃因正气亏虚,风邪外致。方后嘱主要包括药物炮制、煎服方法、常用剂型、药后反应及调护等,正确理解方后解对于使用本方有极大的关系。

《金匮要略》侯氏黑散之我见

侯氏黑散载于《金匮要略.中风历节病脉证并治篇》中,因其文法与仲景惯用体例有别,加之组方与常规经方有异,况且方名冠以侯氏二字,故而后世注家对该方认识颇有分歧,褒贬各异,就是否为仲景方等问题争论不休。从注家认识来看,隋唐医家多认为该方是仲景之方;从病机分析来看,该方土虚风动之病机,切合医理;从药证分析来看,方药和病证丝丝入扣;从临证应用来看,该方用之得当疗效卓著,结合四方面的分析认为侯氏黑散应当属于仲景之方。

侯氏黑散对MCAO大鼠大脑皮质TGF-β_1 bFGF蛋白表达的影响

目的:观察侯氏黑散对MCAO(大脑中动脉闭塞模型)大鼠大脑皮质TGF-β1、bFGF蛋白表达的影响。方法:采用线栓法复制大鼠大脑中动脉闭塞模型,利用免疫组化方法观察大鼠大脑中动脉闭塞模型皮质TGF-β1、bFGF蛋白表达的变化,通过给大鼠连续14天灌胃侯氏黑散13g.kg-1.d-1,观察其对TGF-β1、bFGF蛋白表达的影响。结果:侯氏黑散以促进TGF-β1阳性蛋白的表达,与模型组比较具有显著意义;侯氏黑散可以促进bFGF蛋白的表达,但与模型组相比,没有统计学的意义。结论:侯氏黑散治疗中风的机理可能是通过促进TGF-β1蛋白的表达,保护和修复缺血性脑损伤。

侯氏制碱法中的绿色化学思想

本文依据索尔维制碱法和侯氏制碱法的化学反应,计算了两种制碱方法的原子利用率和E因子,从绿色化学原则和原子经济性的角度讨论了侯氏制碱法的绿色化学思想,证明了侯氏制碱法是原子利用率为百分之百、没有副产物、实现了零排放的理想原子经济反应。

侯氏黑散及其拆方对MCAO大鼠神经病理学的影响

目的:研究侯氏黑散及其拆方对大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠的保护作用,并探讨侯氏黑散组方配伍的意义。方法:线栓法阻断大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血损伤模型,以Bederson10分制评分标准对实验大鼠作行为评分,采用HE染色对脑缺血损伤部位进行整体观察,计数海马CA1区和CA3区完整的锥体细胞;尼氏体染色结合图像分析技术检测MCAO大鼠海马锥体细胞尼氏体的变化。结果:侯氏黑散全方及其拆方君加臣药、君加臣加佐药可明显改善MCAO大鼠神经功能缺损,减轻海马神经元变性程度,增加海马锥体细胞数;侯氏黑散全方组海马锥体细胞尼氏体的脱失较模型组减少,积分光密度值显著增高。结论:侯氏黑散具有明显保护海马神经细胞的作用,全方组的疗效明显优于拆方组,符合方剂学整体取性原理。