PKM2对黑色素瘤细胞侵袭与迁移及巨噬细胞M2转变的影响

目的探讨黑色素瘤中丙酮酸激酶M2(PKM2)的表达情况及其与预后相关性,阐明PKM2如何通过糖酵解途径影响黑色素瘤侵袭与迁移及对巨噬细胞M2转变的影响。方法利用TCGA数据库及免疫组化分析PKM2在黑色素瘤组织中的表达情况;利用基因过表达、敲低及ECAR技术分析PKM2对黑色素瘤细胞糖酵解过程影响;通过划痕实验及Transwell实验验证PKM2对黑色素瘤细胞侵袭与迁移的影响;通过细胞共培养检测PKM2对巨噬细胞M1/M2转变的影响。结果TCGA数据库显示,与正常组织相比,PKM2 mRNA水平在黑色素瘤组织中表达明显升高(P<0.05),且PKM2高表达水平患者的生存率低于低/中表达患者(P=0.0018);免疫组化染色结果显示,PKM2在黑色素瘤发生转移患者中的评分明显高于未转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。敲低PKM2表达后,黑色素瘤细胞糖酵解能力、糖酵解容量和乳酸水平均明显降低(P<0.05)。细胞迁移实验结果显示,敲低PKM2表达后,黑色素瘤细胞的迁移和侵袭能力均明显降低,加入乳酸后,可部分逆转该现象。过表达组黑色素瘤巨噬细胞的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化碳合成酶(iNOS)水平低于对照组,而CD206和CD163水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);敲低组黑色素瘤巨噬细胞的TNF-α和iNOS水平高于对照组,而CD206和CD163水低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PKM2可通过影响糖酵解进程促进黑色素瘤侵袭与迁移,并对肿瘤微环境中巨噬细胞的M2转变起促进作用,是黑色素瘤代谢治疗的潜在靶点。

分析Tim-4促进子宫颈癌细胞侵袭与迁移及其相关机制

目的:分析Tim-4促进子宫颈癌细胞侵袭与迁移及其相关机制。方法:使用实时荧光定量PCR法检测子宫颈上皮永生化细胞系H8和子宫颈癌细胞系Siha中Tim-4的表达水平,用Tim-4的慢病毒载体感染低表达Tim-4的Siha细胞系,观察癌细胞感染后的Tim-4表达水平,进行细胞迁移侵袭试验检测Tim-4对子宫颈癌细胞系Siha的侵袭与迁移能力的影响,最后使用蛋白质印迹法检测子宫颈癌细胞系Siha中Tim-4和上皮细胞-间充质转化蛋白的表达。结果:Siha细胞系中Tim-4mRNA表达水平(1.63±0.03)>H8细胞系(0.97±0.06),P<0.05;Tim-4过表达的Siha细胞的穿模数为(102.14±5.14)>空载体(56.34±10.21),P<0.05;蛋白质印迹法结果显示Tim-4增强了EMT蛋白的表达。结论:Tim-4能够促进子宫颈癌细胞侵袭与迁移能力,其机制为Tim-4促进了癌细胞中的上皮细胞-间充质转化(EMT)。

Survivin基因沉默抑制食管癌Eca-109细胞的侵袭与迁移

目的应用RNA干扰(RNAi)技术沉默食管癌细胞Eca-109内源性survivin的表达,探讨survivin基因在食管癌细胞侵袭与迁移过程中的作用。方法构建靶向survivin基因的siRNA表达载体并借助脂质体稳定转染食管癌细胞;Western blot检测survivin蛋白表达水平观察基因沉默效果,同法观察细胞内基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平的变化;Transwell小室法检测细胞侵袭能力的变化,细胞划痕实验观察细胞迁移能力的改变。结果与对照组相比,干扰组survivin蛋白表达水平明显降低,抑制率可达85%;干扰组细胞MMP2、MMP9和VEGF蛋白表达受到明显抑制(P<0.05),同时观察到干扰组细胞的侵袭与迁移能力也明显下降(P<0.05)。结论 survivin基因与食管癌细胞的侵袭迁移潜能相关,特异性沉默survivin基因可能通过下调MMP2、MMP9和VEGF的表达显著抑制食管癌细胞Eca-109的侵袭与迁移能力。

长链非编码RNA FAL1对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭与迁移的影响

目的:探索人宫颈癌细胞Hela与正常人宫颈永生化上皮细胞H8中长链非编码RNA FAL1分子的表达差异及沉默人宫颈癌细胞Hela中FAL1的表达对人宫颈癌细胞Hela增殖、侵袭和迁移的影响。方法:利用qRT-PCR技术检测细胞中FAL1基因表达水平;设计并合成FAL1的siRNA片段(FAL1-siRNA)转染宫颈癌Hela细胞,qRT-PCR技术检测其沉默效率;MTT检测人宫颈癌细胞Hela增殖;Transwell实验检测人宫颈癌细胞Hela的侵袭、迁移能力的变化。结果:长链非编码RNA FAL1在人宫颈癌细胞Hela中的表达明显高于正常人宫颈永生化上皮细胞H8中的表达,FAL1-siRNA下调了Hela细胞中FAL1的表达,并抑制了宫颈癌细胞Hela的增殖和侵袭迁移能力。结论:FAL1-siRNA能够下调Hela细胞FAL1的表达,进而抑制人宫颈癌细胞Hela的增殖及其侵袭迁移能力,提示长链非编码RNA FAL1在宫颈癌中是一种癌基因,FAL1的表达异常增高可能是宫颈癌发生发展的重要分子机制。

LncRNAAC073352.1对肝细胞性肝癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响

探讨长链非编码RNA-AC073352.1(LncRNA AC073352.1)对肝细胞性肝癌(HCC)细胞(HepG2细胞)增殖、侵袭及迁移的影响。方法 利用生物信息学方法,通过癌症基因组图谱数据库分析LncRNA AC073352.1在肝细胞性肝癌和正常组织中表达情况(由于LncRNA AC073352.1该基因名称较长,以下均简称LncRNA)。常规培养HepG2细胞并随机分为空白对照组(Control组,仅加入培养基)、LncRNA敲低对照组(si-NC组,转染si-RNA空载质粒)、LncRNA敲低组(si-LncRNA组,转染敲低质粒)、LncRNA过表达对照组(pcDNA3.1-NC组,转染pcDNA3.1空载质粒)、LncRNA过表达组(pcDNA3.1+LncRNA组,转染过表达质粒),转染对应质粒24-48小时进行后续实验。采用qRT-PCR方法检测各组细胞内LncRNA的表达,并确定转染效率;CCK8方法检测各组细胞增殖能力;细胞划痕、Transwell实验观察各组细胞迁移与侵袭能力;Western blot法检测各组细胞内β-catenin、Vimentin、Slug蛋白的表达情况。结果 生物信息学分析结果显示与正常结肝组织相比,LncRNA AC073352.1在肝细胞性肝癌组织中表达增高(P<0.0001)。qRT-PCR分析结果显示,与si-NC组相比,si-LncRNA 组中LncRNA mRNA表达量明显降低(P<0.0001);与pcDNA3.1-NC组相比,pcDNA3.1+LncRNA组中LncRNA mRNA表达达量明显升高(P<0.0001),HepG2细胞敲低或过表达细胞模型构建成功。结论 LncRNA AC073352.1在肝癌组织中高表达,可能通过调控HepG2细胞上皮间充质转化过程进而参与其增殖、侵袭和迁移。

CPNE7通过上皮间质转化影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨CPNE7在胃癌组织和细胞中的表达及影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法:基于生物信息学数据库GEPIA从转录水平分析CPNE7在胃癌及癌旁正常组织中的表达差异。qRT-PCR法检测CPNE7在3种胃癌细胞系(AGS、MKN-45、HGC-27)和胃黏膜正常上皮细胞(GES-1)中的表达,选择表达量相对较高的AGS细胞作为后续实验细胞。通过慢病毒转染AGS细胞敲减CPNE7的表达,根据不同处理分为RNAi-vector组、RNAi-1组、RNAi-2组、RNAi-3组,qRT-PCR、Western blot验证细胞转染效率,选择敲减效率最有效的RNAi-1(实验组)和RNAi-vector(对照组)进行后续实验。采用CCK-8法检测细胞活力,EdU和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力,划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白(Caspase3、Caspase7、Caspase9、Bax、Bcl-2)及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达水平。结果:CPNE7在胃癌组织中的表达明显高于正常组织(P<0.05)。与正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)相比较,CPNE7在胃癌细胞中明显高表达(P<0.05),在AGS胃癌细胞中CPNE7相对表达量最高(P<0.001)。与RNAi-vector组相比较,敲减CPNE7可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。与RNAi-vector组相比较,敲减CPNE7可上调细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase7、Caspase9、Bax的表达,下调Bcl-2的表达(P<0.05)。与RNAi-vector组相比较,敲减CPNE7可增加上皮标志物蛋白(E-cadherin)的表达水平(P<0.01),降低间质标志物蛋白(N-cadherin、Vimentin)的表达水平(P<0.01)。结论:CPNE7在胃癌组织和细胞中表达上调,敲减CPNE7可通过影响EMT进程抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,其可能成为胃癌的潜在分子标志物。

14-3-3ζ、S100A8在膀胱癌中的表达及与膀胱癌侵袭和迁移的关系

目的:观察膀胱癌组织中14-3-3ζ、S100A8的表达变化,分析其与膀胱癌侵袭和迁移关系,并探讨其临床意义。方法:免疫组织化学法检测90例膀胱癌组织及癌旁组织中14-3-3ζ、S100A8的表达。图像分析技术分析两个指标在膀胱癌中的阳性表达率,并分析其与临床分期、病理分级的关系。结果:膀胱癌组织中14-3-3ζ、S100A8的阳性表达率为65.56%、54.44%,癌旁正常组织中分别为10%、0%,与癌旁正常组织相比,癌组织中的阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05)。14-3-3ζ、S100A8的表达均与膀胱癌的分化程度、临床分期、淋巴结迁移、复发性等有关(P<0.05)。结论:14-3-3ζ、S100A8在膀胱癌组织中异常表达与膀胱癌的侵袭和迁移有高度相关性。14-3-3ζ、S100A8检测可以有效应用于膀胱癌的检测、预后判断。

转化生长因子β1在血小板促进甲状腺未分化癌侵袭迁移中的作用

目的探索肿瘤患者血小板(platelet,PLT)是否通过分泌转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)参与调控甲状腺未分化癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)的转移。方法通过ELISA和Real-time PCR实验测定ATC细胞上清TGFβ1蛋白和mRNA表达情况;通过Transwell迁移实验、划痕实验和Western Blot方法探究TGFβ1对ATC细胞迁移及侵袭能力的影响及其作用机制。结果PLT与ATC细胞共培养上清液中TGFβ1蛋白水平显著上调(P<0.001)而mRNA水平不变;PLT或rhTGFβ1可使穿过小室的ATC细胞显著增加(P<0.001),提示PLT或rhTGFβ1能显著增强ATC细胞的迁移能力(P<0.001);划痕实验也证实rhTGFβ1可显著增强ATC细胞的迁移能力(P<0.001)。结论PLT可通过分泌TGFβ1诱导ATC细胞EMT进程最终增强ATC细胞迁移和侵袭能力,表明TGFβ1可能成为ATC患者靶向治疗的潜在靶标。

沉默GRP78/BIP表达对人膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及机制

目的:探讨体外沉默葡萄糖调节蛋白GRP78/BIP表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及可能机制。方法:设计、合成靶向GRP78基因的小干扰RNA,利用脂质体Liopfecta mineRNAIMAX转染入膀胱癌T24细胞,分别采用Realtime PCR、Western blot在mRNA和蛋白水平检测细胞内GRP78、MMP2、MMP9、Timp-2表达,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测沉默GRP78表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响。结果:实验(siRNA-GRP78)T24细胞中GRP78表达显著降低,细胞侵袭迁移能力明显受到抑制,MMP2、MMP9表达降低,而Timp-2表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:沉默GRP78能明显抑制人膀胱癌细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能与影响MMP2、MMP9、Timp-2表达相关。

黄芩苷抑制乳腺癌细胞侵袭、迁移与凋亡的机制研究

目的用黄芩苷干预人乳腺癌细胞株MCF-7,观察黄芩苷对乳腺癌细胞侵袭、迁移与凋亡的影响及其作用机制。方法实验分为正常组、模型组、黄芩苷组、miR-126组、LNA组、LNA-126组和LNA-126+黄芩苷组。采用RT-PCR检测miR-126、miR-145、miR-100和let-7c的表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞侵袭与迁移情况,Western blot法检测p53、Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax和p-p38蛋白的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 RT-PCR结果显示,与模型组相比,黄芩苷作用于MCF-7细胞后miR-126、miR-145、miR-100和let-7c表达明显上调(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其中以miR-126最为显著(P<0.001);与正常组相比,4种miRNA在模型组中的表达均下调,其中以miR-126下调最为明显(P<0.05);MTT结果显示,MCF-7细胞的增殖受到miR-126和黄芩苷的抑制(P<0.05),而MCF-7细胞的增殖受到LNA-126的促进(P<0.05);Transwell实验结果显示,MCF-7细胞的侵袭和迁移受到miR-126和黄芩苷的抑制(P<0.05),而黄芩苷对MCF-7细胞侵袭和迁移的抑制受到LNA-126的拮抗(P>0.05);Western blot结果显示,黄芩苷及miR-126作用于MCF-7细胞后Bcl-2表达水平下降(P<0.05),p53、Caspase-3、Caspase-9、Bax及p-p38表达水平上升(P<0.05);流式细胞术结果显示,黄芩苷及miR-126促进MCF-7细胞凋亡(P<0.05)。结论黄芩苷可以抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭与迁移,并促进其凋亡,其机制可能与通过上调miR-126有关。

miR-433-3p靶向MAPK8对肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡和迁移的调控作用

目的:探究miR-433-3p对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK8)的靶向调控作用及其对肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡和迁移的调控作用。方法:RT-PCR检测了SMMC-7721、HepG2、MHCC97H、Hep3B肝癌细胞株和HL-7702人正常肝细胞株中miR-433-3p的表达。荧光素酶报告实验检测miR-433-3p和MAPK8的相互作用。将MHCC97H细胞分为空白对照(Control)组、阴性对照(NC)组、miR-433-3p组、pc-MAPK8组和miR-433-3p+pc-MAPK8组,按照分组分别转染miR-433-3p mimic或pc-MAPK8,RT-PCR检测miR-433-3p和MAPK8转录水平,CCK8法检测细胞增殖,Hoechst法检测细胞凋亡,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测MAPK8、增殖细胞核抗原(PCNA)、活化半胱天冬酶3(cl-CASP3)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达。结果:与正常肝细胞株HL-7702比较,肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2、MHCC97H、Hep3B中miR-433-3p表达显著降低。在荧光素酶报告实验中,与MAPK8野生型(WT)+NC比较,MAPK8 WT+miR-433-3p组荧光素酶活性显著降低。在细胞实验中,与Control组比较,miR-433-3p组miR-433-3p表达升高,MAPK8转录和蛋白表达降低,MHCC97H细胞的增殖水平降低,凋亡水平升高,迁移和侵袭能力下降,PCNA和N-cadherin蛋白表达下降,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达升高;pc-MAPK8组MAPK8蛋白表达升高,MHCC97H细胞的增殖水平升高,凋亡水平降低,迁移和侵袭能力提高,PCNA和N-cadherin蛋白表达升高,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达降低。与pc-MAPK8组比较,miR-433-3p+pc-MAPK8组MAPK8蛋白表达降低,MHCC97H细胞的增殖水平降低,凋亡水平升高,迁移和侵袭能力下降,PCNA和N-cadherin蛋白表达降低,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达升高。结论:miR-433-3p可靶向作用于MAPK8,抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。

藤黄酸对卵巢癌细胞SKOV3生长、转移和侵袭的作用研究

目的探究藤黄酸(gambogic acid,GA)对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响.方法将SKOV3细胞分为GA(0μmol/L)组、GA(2μmol/L)组、GA(5μmol/L)组、GA(10μmol/L)组,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Hoechst染色和流式检测细胞凋亡,Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移,Western印迹检测增殖细胞核抗原(PCNA)、活化半胱天冬酶-3(cl-caspase-3)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT的蛋白表达水平.结果与GA(0μmol/L)组比较,GA(2μmol/L)组、GA(5μmol/L)组、GA(10μmol/L)组细胞增殖、侵袭及迁移能力降低,PCNA、VEGF、MMP-9、PI3K、p-AKT蛋白表达水平下调,细胞凋亡率升高,cl-caspase-3蛋白表达上调,上述变化均呈剂量相关性.结论藤黄酸能抑制卵巢癌细胞SKOV3的生长和运动能力,可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关.

胃癌患者术后血清中TGFBI与复发转移的关系及其机制

目的探讨术后血清细胞外基质蛋白转化生长因子β诱导(TGFBI)对胃癌复发转移的影响及其作用机制。方法利用shRNA结合慢病毒技术稳定敲低胃癌细胞SGC-7901中TGFBI的表达,并通过Western blot对其在细胞内及培养上清中的表达进行验证;MTT法检测TGFBI下调对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响,Transwell法检测其对细胞侵袭与迁移的影响;通过检测E-cadherin、Snail和ZEB1等转录因子的表达,探究TGFBI是否通过上皮间质转化促进胃癌的转移复发。结果胃癌患者血清样本中TGFBI表达水平显著高于正常样本,RNA干扰后TGFBI在胃癌细胞SGC-7901内及其培养上清中的表达水平均发生显著下降;TGFBI下调后胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭与迁移能力均受到显著抑制,同时上皮间质转化标志物E-cadherin的表达发生上调,而Snail和ZEB1的表达发生下调。结论胃癌细胞SGC-7901中TGFBI表达下调时可能通过抑制上皮间质转化,抑制胃癌细胞增殖、侵袭与迁移,最终抑制胃癌的转移复发。

RPS15A在肿瘤发生发展中的研究进展

核糖体是一种结构复杂的大分子物质,主要由一个40S和一个60S的核糖核蛋白亚单位组成,分别称为“小”和“大”亚单位,内含480个大小不等的独特核糖体蛋白(ribosomal proteins,RPs),它是蛋白质生物合成的工厂,其主要参与遗传信息的翻译,它对细胞的生长、增殖以及分化等生物学过程至关重要[1]。

慢病毒构建的细胞系中过表达FRK对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的:探讨在慢病毒构建的稳定表达酪氨酸相关激酶(fyn-related kinase,FRK)的细胞系中,过表达FRK对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法:1.将FRK慢病毒质粒与辅助质粒共转染293T细胞进行慢病毒包装,然后用包装好的慢病毒感染胶质瘤U251、U87细胞,建立稳定表达FRK的细胞系,同时运用Western blotting(WB)技术检测FRK在U251、U87细胞系中的过表达情况;2.细胞划痕实验与Transwell迁移实验检测过表达FRK对脑胶质瘤细胞迁移能力的影响;3Transwell侵袭实验检测过表达FRK对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响;4.Ed U实验与平板集落形成实验检测过表达FRK对脑胶质瘤细胞增殖能力的影响。结果:1.荧光显微镜下可见慢病毒感染U251、U87细胞的效率达到90%以上,WB结果显示外源性FRK蛋白在U251、U87细胞系中充分表达;2.细胞划痕实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251细胞迁移的细胞数在24 h和48 h分别减少了(50.00±1.04)%和(44.14±7.05)%,差异有统计学意义(P<0.01);而过表达FRK组U87细胞迁移的细胞数在24 h和48 h分别减少了(58.50±4.12)%和(44.67±3.82)%(P<0.001);3.Transwell迁移实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞穿过滤膜的细胞数分别减少了(67.76±4.88)%和(50.76±4.54)%(P<0.001);4.Transwell侵袭实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞穿过Matrigel基质胶及滤膜的细胞数分别减少了(50.94±4.83)%和(57.92±6.19)%(P<0.001);5.Ed U实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞的Ed U阳性细胞率分别下降了(28.06±4.31)%和(33.51±7.26)%(P<0.01);6.平板集落形成实验结果显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞集落形成分别减少了(35.94±6.76)%与(52.33±7.42)%(P<0.01)。结论:过表达FRK可以抑制脑胶质瘤细胞的增殖,并且可以抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。

桂枝茯苓丸对宫颈癌细胞生物学行为的影响及作用机制

目的:探究桂枝茯苓丸对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法:通过MTT检测不同浓度(200、400mg/ml)桂枝茯苓丸处理宫颈癌Hela细胞24、48h后对其增殖的影响;克隆形成实验检测不同浓度(200、400mg/ml)桂枝茯苓丸对宫颈癌Hela细胞克隆形成的影响;Transwell法检测桂枝茯苓丸对Hela细胞侵袭与迁移的影响;通过western blot检测PTEN和p-AKT等通路蛋白在Hela细胞中的表达水平,探究桂枝茯苓丸对Hela细胞可能存在的作用机制。结果:桂枝茯苓丸可显著抑制Hela细胞的增殖,且呈一定的时间和浓度依赖性;200和400mg/ml的桂枝茯苓丸均可显著降低Hela细胞的克隆形成、抑制其侵袭和迁移,且呈剂量依赖性。使用400mg/ml的桂枝茯苓丸处理Hela细胞48h,发现桂枝茯苓丸能够上调PTEN蛋白的表达,同时下调p-AKT蛋白的表达,进而抑制宫颈癌细胞恶性表型。结论:桂枝茯苓丸可通过上调PTEN蛋白的表达抑制AKT途径中AKT蛋白的磷酸化,进而抑制Hela细胞的增殖、克隆形成以及迁移侵袭等恶性细胞行为。

新型海藻糖衍生物的设计、合成及活性研究

以brartemicin为先导化合物设计合成了15个新型海藻糖衍生物,并通过1H NMR、MS及元素分析确证了其结构。采用MTT法考察目标化合物对肿瘤细胞Hep G2、A549和正常细胞HUVEC增殖的影响;采用Matrigel黏附实验,Transwell小室法考察目标化合物对Hep G2和A549细胞黏附、侵袭与迁移能力的影响。结果表明,在1~32μmol·L-1浓度内,15个目标物对Hep G2、A549和HUVEC细胞均无显著细胞毒性（P〉0.05）。在上述浓度范围内,化合物79和82对A549细胞黏附、侵袭与迁移的抑制作用以及对Hep G2细胞的黏附与侵袭抑制作用,均优于阳性对照brartemicin。

lncRNA MAMDC2-AS1作为竞争性内源RNA在结直肠癌发生发展过程中的作用机制

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) MAMDC2-AS1对结直肠癌细胞的作用及其机制。方法收集21对临床样本,利用实时逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肿瘤组织及其癌旁对照组织MAMDC2-AS1、miR-197-3p和丝裂原活化蛋白激酶4(mitogen-activated protein kinase 4,MAPK4)的表达情况,并分析其表达的相关性;培养结直肠癌细胞株HCT116细胞,合成MAMDC2-AS1 siRNA和构建表达质粒,转染至HCT116细胞,观察细胞侵袭、迁移能力的改变,同时利用流式细胞术检测细胞凋亡比例的改变;利用RT-qPCR检测转染siRNA和表达质粒后,HCT116细胞MAMDC2-AS1、miR-197-3p和MAPK4表达的改变。结果与癌旁对照组织比较,肿瘤组织的MAMDC2-AS1表达显著增高,miR-197-3p表达显著降低,MAPK4的表达显著增高,同时MAMDC2-AS1和miR197-3p的表达量呈显著负相关,MAMDC2-AS1与MAPK4的表达呈显著正相关;HCT116细胞转染MAMDC2-AS1 siRNA后,其细胞侵袭和迁移能力显著降低,细胞凋亡比例增高;MAMDC2-AS1和MAPK4的表达显著降低,miR-197-3P的表达显著增加;转染MAMDC2-AS1的表达质粒后则出现相反的结果。结论 lncRNA MAMDC2-AS1具有促癌作用,其作用机制可能为通过竞争性结合miR-197-3p而促进MAPK4的表达。