拟线粒体促凋亡多肽N7在人卵巢癌细胞对顺铂增敏作用中的研究

目的:探讨拟线粒体促凋亡多肽N7(SmacN7)能否增加人卵巢癌细胞对顺铂的敏感性及其与Caspase-3表达的关系。方法:通过细胞增殖抑制率测定及平板克隆形成试验研究顺铂单独应用组(A组),50μg/L SmacN7+顺铂组(B组)、100μg/L SmacN7+顺铂组(C组)及200μg/L SmacN7+顺铂组(D组)的细胞增殖抑制率和细胞克隆形成率;采用细胞免疫化学法检测上述分组中Caspase-3的表达。结果:单独应用顺铂时,24、48、72 h的增殖抑制率分别为(6.12±1.16)%、(13.47±1.15)%及(28.91±1.08)%。SmacN7(50～200μg/L)联合顺铂应用时,随着SmacN7浓度的增加或作用时间的延长,细胞增殖抑制率明显增加,药物作用24、48、72 h后增殖抑制率分别为(9.34±1.78)%～(49.81±2.11)%、(25.24±2.11)%～(65.54±2.27)%、(44.45±1.21)%～(82.36±2.19)%。肿瘤细胞存活率明显降低,分别为(25.13±0.52)%、(21.17±0.55)%、(18.23±0.54)%和(15.27±0.56)%。SmacN7联合顺铂应用后,Caspase-3的表达比单独应用顺铂明显增加(P=0.000)。结论:SmacN7能够明显增加人卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。

热沉淀纯化对促凋亡铁蛋白纳米粒活性的影响

目的设计促凋亡铁蛋白纳米粒BAK-HFn,并探究热沉淀纯化对其活性的影响。方法设计与构建促凋亡活性蛋白纳米粒BAK-HFn,验证其成功可溶表达,采用热沉淀纯化以及非热沉淀纯化两种方式对其进行纯化,并用动态光散射法测定纯化后纳米粒的粒径,采用CCK-8法检测纯化后BAK-HFn对肿瘤细胞C6的细胞毒性。结果用热沉淀纯化后的BAK-HFn蛋白几乎不抑制C6细胞的生长,而非热沉淀纯化法获得的BAK-HFn蛋白促凋亡的活性明显提高。结论热沉淀纯化会使经过BAK修饰的促凋亡铁蛋白纳米粒降低甚至丧失活性。

可诱导肿瘤细胞免疫原性死亡的两亲性多肽的合成及评价

目的设计并合成可诱导肿瘤细胞免疫原性死亡的两亲性多肽KLL,探究多肽的细胞杀伤能力及诱导免疫原性死亡能力。方法将促凋亡多肽KLA序列中的丙氨酸替换为亮氨酸以提高两亲性多肽的疏水面,利用固相多肽制备技术、高效液相色谱、液质联用等方法制备并表征多肽;通过比较多肽的保留时间评价其相对亲疏水性;利用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染、免疫荧光染色、流式细胞术、ELISA检测等方法评价多肽的细胞杀伤能力和诱导免疫原性死亡能力。结果成功设计并合成了两亲性多肽KLL,与原始KLA多肽比较,KLL多肽的相对疏水性显著提高,同时具备更强的细胞杀伤能力和诱导肿瘤细胞免疫原性死亡能力。结论通过增强两亲性多肽的疏水面可获得具有更强的细胞杀伤与免疫原性死亡诱导能力的两亲性多肽,为发展可用于肿瘤免疫治疗的多肽类分子提供了研究基础。

脂肪组织与大脑对话——杰出科学成就奖获奖演说介绍

体重在下丘脑摄食／饱食中枢的调节下保持精确的平衡，瘦素在其中发挥重要的作用。当脂肪组织增多时，瘦素分泌也增加，从而抑制摄食中枢减少摄入，获得新的平衡。而在肥胖的动物，由于瘦素抵抗，这种平衡被打破。这可能与脂肪酸作为内源性的过氧化物酶体增殖物活化受体γ激动剂导致中枢瘦素抵抗有关。脂肪组织的扩张与其可塑性有关，后者与微血管增生有关，抑制微血管增生的促凋亡肽可抑制脂肪的扩张，同时通过脂肪组织发出的某种信号，导致摄食减少，为肥胖的治疗提供了新的思路。