中药通过细胞外信号调节激酶信号通路调控胃癌的研究进展

胃癌在我国发病率和死亡率较高,存在发现晚、5年生存率低的特点,手术切除仍然是临床治疗的主要方法。大鼠肉瘤蛋白(Ras)/迅速加速性纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在调控细胞增殖、转移、凋亡等方面具有非常重要的作用,与胃癌的发生与发展密切相关。近年来,很多学者探索调控Ras/Raf/MEK/ERK信号通路治疗胃癌的作用机制,在信号转导机制研究、靶向抑制剂筛选、中医药治疗等方面取得大量成果,实验验证在胃癌的治疗中干预其信号传递具有良好的效果和应用前景。

促分裂原活化的蛋白激酶信号通路与能量代谢的关系

能量代谢每时每刻都伴随着物质代谢在生命体内发生。生物通过利用物质代谢产生的高能磷酸化合物以维持各项生命功能的运转,不同状态下的细胞通过利用各种物质通过不同的通路进行不同的代谢方式。促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)通路作为生命体里广泛存在的一类信号蛋白,影响着细胞、生物体的生命活动。MAPK通路在能量代谢的各个环节起着非常重要的作用。通过研究MAPK通路中的胞外信号调节激酶(ERK)通路、Jun激酶(JNK)通路、P38通路均与能量代谢有关的蛋白、靶点、关键酶、转运体,与三大营养物质能量代谢相结合,从而为能量代谢相关的细胞功能进一步研究铺垫,并为今后治疗肿瘤性疾病、感染性疾病、代谢性疾病等提供新思路。

家蚕丝胶对糖尿病大鼠肾脏胞外信号调节激酶信号转导通路活性的影响

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病的严重并发症,其病理特征是肾小球肥大,系膜细胞增生、细胞外基质（extracellular matrix,ECM）积聚和基底膜增厚,从而导致肾小球高滤过和蛋白尿,最终导致肾小球硬化和肾间质纤维化.近年来有研究显示胞外信号调节激酶（extracellular signal regulated kinase,ERK）信号转导通路与DN密切相关.ERK是丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）家族的一个亚族,可被多种生长因子和细胞因子激活,介导细胞的生长、增殖和分化等多种生理、病理过程[1,2].本研究旨在探讨家蚕丝胶对糖尿病模型大鼠肾脏ERK信号转导通路的影响及可能机制,以期为临床治疗DN提供新思路.

敲低Raf激酶抑制蛋白促进LX-2人肝星状细胞增殖

目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在LX-2人肝星状细胞增殖中作用。方法将RKIP小干扰RNA(siRNA-RKIP)重组质粒转染至LX-2细胞,培养5 d,并筛选出稳定转染的细胞。MTT法检测沉默RKIP后LX-2细胞的增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期;实时定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和1型胶原蛋白(Col1)mRNA的表达。Western blot法检测RKIP、α-SMA、Col1及胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与空白对照组相比,RKIP低表达明显诱导LX-2细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加G2期细胞比例,提高Col1、α-SMA mRNA和蛋白表达。此外,RKIP的沉默明显提高ERK/MAPK磷酸化水平。结论敲低RKIP的水平促进LX-2细胞的增殖,其机制与激活ERK/MAPK信号通路有关。

细胞外信号调节蛋白激酶在人胃癌细胞Fas介导的凋亡信号通路中的作用

目的 分析在胃癌细胞系SGC 790 1中,细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在Fas介导的信号通路中的表达及其作用,探讨该信号通路与胃癌发生和发展的关系。方法 利用同位素标记法和特异性识别磷酸化ERK抗体进行Western印迹杂交,检测Fas抗体孵育不同时间点胃癌细胞ERK的活性;利用流式细胞术检测胃癌细胞在各处理因素作用下细胞凋亡情况。结果 经抗Fas抗体处理后,胃癌细胞中ERK活性升高,在30min时达高峰;在MEK1抑制剂PD980 5 9作用下,ERK活性明显下降。抑制剂预处理组sub G1 细胞占30 .5 %±2 .6 %,单纯抗Fas抗体处理组sub G1 细胞占3.1 %±0 .2 %,对照组为3.0 %±0 .1 %。结论 在胃癌细胞中,抗Fas抗体可介导ERK活性的升高,导致细胞对Fas介导的凋亡信号脱敏;MEK1抑制剂可使胃癌细胞对Fas介导的凋亡信号敏感;胃癌细胞通过Fas介导的ERK的活化,逃逸免疫监视,持续生长。

二甲双胍调节MEK/ERK通路及基质金属蛋白酶在恶性肿瘤中应用的研究进展

二甲双胍是目前治疗2型糖尿病的一线用药,其通过改善胰岛素抵抗、抑制肝脏糖异生等途径降低血糖。近年发现,二甲双胍还可通过促分裂原活化的蛋白激酶激酶/胞外信号调节激酶信号通路以及基质金属蛋白酶诱导细胞周期停滞、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭迁移,并可与各种抗肿瘤药物联用发挥协同作用以抑制肿瘤进展。但目前仍缺乏二甲双胍可以抑制癌症患者病情进展的研究证据,未来还需要对二甲双胍在恶性肿瘤治疗中的作用及其有效性、安全性进行进一步研究。

Kiss-1基因下调丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞转移能力

目的观察Kiss-1基因通过下调促细胞丝裂原细胞外激酶-胞外信号调节激酶．丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路（MEK—ERK—MAPK）途径对人结直肠癌HCTl16细胞侵袭、转移能力的影响。方法重组LV．Kiss-1基因慢病毒为载体转染人结直肠癌HCT116细胞，实验分为空白对照组（CON组）、慢病毒空载体阴性对照组（NC组）、Kiss-1基因过表达组（OE组）。细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测转染前后细胞增殖能力的变化，Transwell法分别检测转染前后细胞的侵袭和迁移能力的变化。应厢Westernblot法检测3组细胞中MAPK信号通路的关键分子丝裂原细胞外激酶（MEK）表达含量的变化以及下游效应蛋白肌球蛋白轻链（MLC）磷酸化水平的变化。结果OE组HCTll6细胞中MEK的表达含量为0．3920±0．0107，较CON组的0．8284±0．0167、NC组的0．8405±0．0092明显降低（P〈0．05），下游效应蛋白MLC磷酸化水平OE组为0．1783±0．0072，较CON组的0．5246±0．0122、NC组的0．5441-4-0．0135亦明显下降（P〈0．05），差异有统计学意义。OE组较CON、NC组细胞增殖受到明显抑制（P〈0．05），细胞侵袭、迁移能力亦出现明显抑制（P〈0．05）。结论LV-Kiss-1基因慢病毒转染人结直肠癌HCTl16细胞后，可能通过MEK—ERK—MAPK信号传导通路途径抑制其增殖、侵袭和迁移能力。

丝胶对糖尿病大鼠肾脏ERK信号通路的影响

目的探讨彩色蚕茧提取物——丝胶对2型糖尿病大鼠肾脏细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的作用。方法雄性SD大鼠48只,随机均分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组。糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠均建立链脲佐菌素(2%,25 mg.kg-1,3 d)致2型糖尿病大鼠模型;模型成功建立后,丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠分别给予丝胶(2.4 g.kg-1.d-1)和二甲双胍(55.33 mg.kg-1.d-1)灌胃治疗35 d。分别采用Western blot和RT-PCR法检测ERK信号通路相关因子ERK、丝裂原活化蛋白激酶的激酶(MEK)和原癌基因c-fos蛋白和mRNA的表达。结果糖尿病模型组大鼠肾脏ERK、MEK、c-fos的表达较正常对照组大鼠增高,差异具有统计学意义(P<0.01);丝胶治疗组、二甲双胍组ERK、MEK、c-fos的表达较糖尿病模型组大鼠降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肾脏ERK信号通路的激活可能参与了糖尿病肾脏损害的发生发展。丝胶可通过下调ERK及其上游MEK、下游c-fos的表达,抑制糖尿病大鼠肾脏ERK信号通路的激活,发挥对糖尿病大鼠肾脏损伤的保护作用。

ERK/MAPK信号传导通路在胃肠道肿瘤治疗靶向中的意义

细胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号传导通路在胃肠道肿瘤的发生和发展中有着重要的作用。ERK/MAPK信号传导通路有3个重要分子靶:小G蛋白Ras、Raf激酶及其MEK1/2和ERK1/2。目前主要有3种抑制ERK/MAPK信号传导通路的办法:⑴破坏靶蛋白的结构和(或)功能;⑵采用功能缺失策略;⑶破坏蛋白与蛋白之间的相互作用。这些办法可为胃肠道肿瘤的治疗提供新的思路。

MAPK/ERK信号通路在乳腺癌发生发展中的研究进展

信号通路在肿瘤发生发展中起关键作用,目前靶向治疗已经成为乳腺癌预后的研究热点。促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)/胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在控制关键细胞过程(包括细胞存活和增殖)中起重要作用。MAPK/ERK通路失调会引发乳腺癌细胞异常增殖和恶性转化,对目前已有的抗乳腺癌治疗药物产生耐药性。基于MAPK/ERK通路在乳腺癌中的作用,调控MAPK/ERK通路可能成为乳腺癌新的治疗靶点,具有重要的研究价值和应用前景。

ERK信号通路在阿尔茨海默病中的研究进展

胞外信号调节激酶(ERK)参与细胞增殖与分化,是促分裂原活化的蛋白激酶信号转导通路的家族成员之一,刺激信号通过ERK信号转导通路传至细胞核内。ERK信号通路可能与阿尔茨海默病(AD)病理生理发生发展过程涉及的神经元凋亡相关,有助于加深对AD发病机制及其与ERK信号通路关系的认识,并有助于发现AD研究的潜在方向。未来,对ERK参与AD作用机制的深入研究,将为AD的预防、药物研发、精准治疗提供新思路。

他莫昔芬通过丝裂原活化蛋白激酶抑制前列腺癌细胞系PC3细胞增殖

他莫昔芬是选择性雌激素受体（ER）调节剂（SERM）。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）主要包括细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1／2）、c-JunN端应力激活蛋白激酶（JNK）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38）。他莫昔芬（TAM）通过ER可以激活MAPK。本实验旨在研究MAPK信号转导通路在他莫昔芬抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3生长中的作用。

丝裂原活化蛋白激酶在肿瘤坏死因子α诱导滋养层细胞MMP-9基因表达中的作用

目的探讨早孕滋养层细胞有节制地侵入机制,研究肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导滋养层细胞基质金属蛋白酶9(MMP9)基因表达的调控机制。方法2004年南方医科大学南方医院将10-4g/LTNFα分别处理滋养层细胞0、5、10、20、30min后,应用细胞ELISA法测定滋养层细胞中蛋白激酶的活性变化;预先给予丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的特异性抑制剂处理滋养层细胞30min,然后给予10-4g/LTNFα处理滋养层细胞24h,应用反转录聚合酶链反应(RTPCR)检测滋养层细胞MMP9基因表达的变化。结果发现10-4g/LTNFα均能迅速激活滋养层细胞的细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、cjun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK激酶活性。TNFα刺激滋养层细胞引起MMP9mRNA表达显著增加,其能被ERK或p38MAPK的特异性抑制剂所抑制。结论ERK和p38MAPK可能是TNFα诱导滋养层细胞MMP9基因表达增加的重要调节物质。

ERK途径可能参与抗坏血酸诱导的神经干细胞向多巴胺能细胞分化

目的探讨抗坏血酸（ascorbic acid，AA）诱导神经干细胞（neural stem cells，NSCs）向多巴胺能神经元方向分化的作用并初步探索其机制。方法从12.5 d胚胎大鼠中脑获得NSCs，培养扩增后分为对照组和分别加入1、10、50、100、200 μmol/L AA处理组，比较NSCs向多巴胺能神经元分化结果；采用免疫细胞化学对NSCs以及分化后神经元进行鉴定和检测，RT-PCR检测酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）、多巴胺转运子（dopamine transporter，DAT）、SHH、Nurr1、Ptx3 mRNA表达；在AA诱导分化中加入ERK阻断剂 PD98059，以探讨ERK通路在分化中的作用。结果获得大量的神经球并且表达nestin强阳性；AA处理组比对照组表现出较强的多巴胺能分化，其中100 μmol/L AA诱导组表达TH和DAT阳性细胞数量比对照组明显增加（P〈0.05），增加30～50倍；AA诱导增加了Nurr1、TH、DAT、SHH mRNA的表达，ERK抑制剂PD98059能抑制AA诱导后Nurr1、TH、DAT mRNA的表达而不影响SHH mRNA表达（P〈0.05 ）。结论抗坏血酸能诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元，ERK途径可能是AA诱导过程中参与多巴胺能分化的途径之一，Nurr1基因可能参与到ERK途径中或者是其下游基因。

FTI-277对髓系白血病细胞的抗增生作用与抑制ERK/MAPK信号途径的关系

目的研究慢性髓系白血病(CML)细胞的胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达和法尼基转移酶抑制剂FTI-277抗细胞增生的作用机制。方法以CML细胞系K562细胞、21例初治CML患者和15例正常供髓者骨髓细胞为研究对象,采用MTT法、AnnexinV-FITC法,观察FTI-277对细胞增生和凋亡的影响;应用流式细胞术、Westernblot检测FTI-277对细胞周期、磷酸化ERK1/2(磷酸化P44/42MAPK)和ERK2(P42MAPK)表达的影响。结果CML细胞与正常细胞相比,磷酸化ERK1/2和ERK2表达明显增高。FTI-277对CML细胞的增生抑制及磷酸化ERK1/2的表达下调均呈剂量和时间依赖性,但对ERK2表达及正常细胞的增生无明显影响。FTI-277对CML细胞无明显诱导凋亡作用,但可使细胞阻滞于G2/M期时相。结论CML细胞存在着ERK/MAPK信号途径的过度激活。FTI-277可通过阻断Ras下游ERK/MAPK信号途径、干预细胞周期调控蛋白的表达、使细胞阻滞于G2/M期等机制,抑制CML细胞的恶性增生。

TGF-β1激活的p38MAPK在TGF-β1上调人卵巢癌细胞PAI-1表达中的作用

目的:纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)在凝血、创伤修复、炎症和肿瘤转移中起重要作用。已有报道转化生长因子β1(TGF-β1)能通过Smad通路诱导PAI-1表达,但TGF-β1能否通过激活非Smad通路诱导PAI-1表达尚不清楚,因此本研究探讨了在卵巢癌细胞中TGF-β1激活的非Smad通路p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和细胞外信号调节激酶(ERK)与TGF-β1上调PAI-1表达的关系。方法:用10μg/L TGF-β1处理卵巢癌SKOV3细胞和HO-8910细胞后,采用real-time PCR和Western blotting的方法检测PAI-1的表达,用磷酸化p38MAPK的抗体和磷酸化ERK的抗体检测p38 MAPK和ERK的激活情况,用p38 MAPK和ERK的特异性抑制剂SB203580和PD98059分别抑制其活性后,检测PAI-1的表达。结果:TGF-β1在卵巢癌细胞中可明显上调PAI-1mRNA和蛋白的表达,并可快速激活p38 MAPK和ERK。用p38 MAPK的抑制剂可以明显抑制TGF-β1上调PAI-1表达,但是抑制ERK活性对TGF-β1上调PAI-1表达没有明显影响。结论:TGF-β1激活的p38 MAPK通路参与了TGF-β1上调PAI-1的表达。

基于MAPK/ERK通路对脑缺血再灌注损伤作用机制的研究进展

再灌注是缺血性脑卒中最主要的治疗手段,但其会导致继发性脑损伤,从而造成缺血组织神经细胞丢失,神经功能严重受损,被认为是世界范围内人类致死的主要原因。目前信号转导通路在脑缺血再灌注损伤中的作用机制研究比较深入。其中,促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)/胞外信号调节激酶通路是MAPK家族中最重要的作用通路,其可通过介导多种信号转导通路发挥神经保护作用。但由于目前的研究缺乏系统性、整体性,未来应进一步提高研究质量,为缺血性脑卒中的治疗提供新思路。

干扰ERK／p-38 MAPK信号通路对乳腺癌骨转移的影响

我们选用乳腺癌高转移细胞株MDA—MB-231为实验对象，观察细胞内胞外信号调节激酶（ERK）和p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）在细胞侵袭和迁移能力方面的作用，探讨干扰ERK／p38MAPK信号通路在乳腺癌骨转移调控中的意义。

黄芪多糖对早产大鼠并发绒毛膜羊膜炎的改善及对胎鼠肺功能的影响

目的观察黄芪多糖对早产大鼠并发绒毛膜羊膜炎(CA)的改善及对胎鼠肺功能的影响,并探讨可能机制。方法于2021年10月至2022年4月取40只SD孕鼠以随机数字表法分为假手术组、CA组、黄芪多糖组、联合组,各10只。CA组、黄芪多糖组、联合组孕鼠羊膜囊均注射脂多糖生理盐水溶液40μL(含脂多糖1μg),假手术组注射生理盐水40μL。联合组孕鼠腹腔注射黄芪多糖(800 mg/kg),尾静脉注射表皮生长因子[丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/胞外信号调节激酶(ERK)通路激动剂(EGF)](10μg/kg);黄芪多糖组腹腔注射黄芪多糖(800 mg/kg),1 h后尾静脉注射等体积生理盐水;假手术组、CA组腹腔、尾静脉均注射等体积生理盐水。每日1次,干预2 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测胎盘组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;肺功能检测仪检测胎鼠肺功能;苏木精-伊红(HE)染色检测胎肺组织病理变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测胎肺组织p38 MAPK、ERK1/2 mRNA相对表达量;蛋白质印迹法检测胎肺组织p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达量。结果与CA组比较,黄芪多糖组胎盘组织TNF-α[(192.73±23.67)μg/L比(371.05±45.33)μg/L]、IL-6水平[(241.55±19.94)μg/L比(512.48±43.16)μg/L],吸气峰值流速(PIF)[(96.39±9.78)mL/s比(126.45±15.41)mL/s],胎肺组织p-p38 MAPK/p38 MAPK(0.15±0.02比0.87±0.12)、p-ERK1/2/ERK1/2(0.22±0.03比0.81±0.09)降低,每分钟通气量(MV)[(0.20±0.02)mL比(0.16±0.02)mL]、潮气量[(4.14±0.46)mL比(3.51±0.3)mL]、呼气峰值流速(PEF)[(214.28±23.81)mL/s比(180.45±16.93)mL/s]升高(P<0.05);与黄芪多糖组比较,联合组胎胎盘组织TNF-α[(293.24±27.35)μg/L比(192.73±23.67)μg/L]、IL-6水平[(367.13±32.88)μg/L比(241.55±19.94)μg/L],PIF[(119.06±11.81)mL/s比(96.39±9.78)mL/s],胎肺组织p-p38 MAPK/p38 MAPK(0.43±0.06比0.15±0.02)、p-ERK1/2/ERK1/2(0.34±0.04比0.22±0.03)升高,MV[(0.18±0.02)mL比(0.20±0.02)mL]、潮气量[(3.74±0.32)mL比(4.14±0.46)mL]、PEF降低[(192.03±21.81)mL/s比(214.28±23.81)mL/s](P<0.05),组间胎肺组织p38 MAPK、ERK1/2 mRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪多糖可抑制CA孕鼠炎症反应,提升早产胎鼠肺功能,并促进肺发育,推测其作用机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。

骨质疏松分子生物学研究专家共识

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。