低分子肝素对大鼠创伤性深静脉血栓形成中促细胞分裂原活化蛋白激酶通路的影响

观察低分子肝素治疗大鼠创伤性深静脉血栓形成的效果,从基因水平探讨低分子肝素治疗创伤性深静脉血栓形成的作用机制。将150只SD大鼠采用定量击打双侧大腿+双后肢石膏固定的方式造模,再将造模后5天有血栓形成的大鼠,随机分为药物治疗组和对照组,分别用低分子肝素和生理盐水进行干预,第一次干预后3h,各组随机取10只大鼠股静脉血管及其主要属支,采用Trizol一步法提取总RNA,运用Gene-chip Rat Genome 4302.0芯片测定股静脉RNA表达。倍数变化分析筛查出差异性表达基因,进一步行path-way分析。结果表明:对照组比较,药物组血栓消退率较高(x2=4.698,P<0.05);有1229个基因呈现差异性表达,该基因主要参与了MAKP、Ca2+、细胞因子及受体信号传导通路,参与MAPK通路的始动基因如IL1、TGF、FGF及其受体,末端效应基因如c-Junn、ur77、p53等均呈现上调。低分子肝素可调控促细胞分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路并影响血栓的预后。

低氧激活ERK／JNK通路促进Smad2／3蛋白磷酸化诱导小鼠心脏成纤维细胞表型转换的实验研究

目的研究体外低氧诱导小鼠心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）向心脏肌成纤维细胞（cardiac myofibroblasts，CMFs）表型转换过程中，促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）信号通路与Smad2／3蛋白磷酸化的关系。方法新生小鼠第1代CFs低氧（37℃、3％O2）无血清培养48h，免疫荧光检测α-SMA蛋白；新生小鼠CFs给予3种MAPK（ERK、JNK和p38）特异性抑制剂常氧培养1h，进行低氧培养30min，免疫印迹检测ERK、JNK、p38和Smad2／3蛋白磷酸化水平。结果①低氧显著上调新生小鼠CFs中α-SMA蛋白的表达；②低氧能显著地促进ERK、JNK和P38蛋白磷酸化，PD98059（ERK特异性抑制剂）、SP600125（JNK特异性抑制剂）和SB203580（P38特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的ERK、JNK和P38蛋白的磷酸化；③PD98059（ERK特异性抑制剂）和SP600125（JNK特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的Smad2／3蛋白的磷酸化，SB203580（P38特异性抑制剂）无此作用。结论①低氧可诱导小鼠CFs细胞发生表型转化为CMFs；②ERK和JNK信号通路能调控Smad2／3蛋白的磷酸化表达；③MAPK和Smad信号通路可能参与低氧诱导的小鼠CFs细胞的表型转化。

丝裂原活化蛋白激酶对卵母细胞减数分裂成熟和排卵的调控作用及机制

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路是一条从酵母到人中都高度保守的信号转导途径,广泛地存在于各种真核细胞中。近30多年来的研究表明,在几乎所有物种的雌性生殖细胞发育和减数分裂成熟过程中,该信号通路都发挥着至关重要的作用。特别是在包括人、小鼠和家畜的哺乳动物中,MAPK信号通路在卵母细胞恢复减数第一次分裂过程中被激活,调控纺锤体组装和细胞周期进程,并在颗粒细胞中介导促性腺激素的生理作用,促进卵丘扩展、排卵和黄体形成。虽然MAPK信号通路在雌性生殖过程中发挥着如此广泛的生理功能,并且这些功能在进化过程中高度保守,但是对于其作用机制,特别是其直接作用靶分子,在很长一段时间没有被充分研究清楚。近些年,基于一些新的基因编辑小鼠模型和理论研究成果,以及各种组学技术的广泛应用,人们进一步揭示了MAPK在减数分裂恢复过程中直接磷酸化激活RNA结合蛋白--胞质聚腺苷酸化原件结合蛋白1 (cytoplasmic polyadenylation element-binding protein-1,CPEB1),促进母源m RNA的poly(A)尾延伸,介导蛋白翻译激活。这些研究结果不但构成了目前本领域哺乳动物卵母细胞成熟和排卵机制的基本理论,也对本领域其他相关研究提供了可借鉴的研究思路。结合本研究组和其他科学家近年来的系统研究工作,我们对MAPK与卵母细胞成熟和排卵的研究进行了历史回顾,介绍了当前研究进展,提出了新近出现但尚未解决的科学问题,包括MAPK在颗粒细胞中对m RNA翻译和降解的调控,以及对翻译起始复合体、m RNA加尾酶的直接磷酸化激活等。

表皮生长因子对Hela细胞紧密连接蛋白3表达的影响及其可能机制

目的探讨表皮生长因子(EGF)对宫颈癌Hela细胞紧密连接蛋白3(Claudin-3)表达的影响及其可能机制。方法培养Hela细胞至贴壁,接种至3组6孔板,分别进行如下处理:(1)以0.0、0.5、5.0、10.0及100.0 ng/ml EGF处理8 h,测评不同浓度EGF对Claudin-3蛋白及其信使RNA(m RNA)的影响;(2)培养基中加入10 ng/ml EGF,分别于培养0 min、10 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h、24 h,测评Claudin-3蛋白及m RNA水平、EGF相关作用通路各蛋白磷酸化情况;(3)分别以EGF受体(EGFR)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3-K)、促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)、p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)阻断剂干预1 h,随后加入含EGF 10 ng/ml的培养基培养,测评Claudin-3蛋白及m RNA水平。结果 EGF对Hela细胞Claudin-3蛋白及m RNA的表达有促进作用,且10 ng/ml EGF的促进作用最明显,该促进作用随EGF刺激时间的延长而增强。EGF刺激后,EGFR、蛋白激酶B(AKT)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p38、JNK均发生磷酸化,各阻断剂均能特异性阻断EGF诱导的上述磷酸化现象。阻断EGFR、PI3-K、MAPK、p38及JNK信号通路均能有效抑制Claudin-3蛋白的表达。结论 EGF能够增加Hela细胞Claudin-3的表达,其机制可能涉及EGFR、PI3-K、MAPK、p38及JNK信号通路。

胶质细胞源性神经营养因子对胰腺癌细胞侵袭的影响

目的：观察胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）在胰腺癌细胞侵袭中的作用及可能的机制。方法四甲基偶氮唑盐（MTT）法分别检测促分裂原活化蛋白激酶通道（MAPK）阻断剂PD98059和磷脂酰肌醇3激酶通道（PI3K）阻断剂LY294002在不同浓度、不同作用时间条件下对胰腺癌细胞MIA Paca-2存活率的影响，利用Trans-well装置在boyden小室的下室中分别加入不同的细胞因子（GDNF、GDNF抗体、PD98059、LY294002），通过计数各组跨膜细胞的数量并进行统计学分析，检测GDNF对胰腺癌细胞的趋化作用和PD98059、LY294002的阻断效果。结果 MTT实验中，培养基中分别加入不同浓度的PD98059或LY294002后，在不同作用时间下胰腺癌细胞形态未发生明显改变，各组的细胞存活率总体水平大都维持在90％～100％，且随药物作用时间或药物浓度变化均无明显规律性变化。Trans-well实验中，下室中加入GDNF后增加了Boyden小室跨膜细胞数量，加入阻断剂PD98059后跨膜细胞数量明显减少，差异有统计学意义（P＝0.014），加入阻断剂LY294002后跨膜细胞数量有减少趋势，差异无统计学意义（P＝0.221），同时加入两种阻断剂后跨膜细胞数量减少，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 GDNF可增强胰腺癌细胞MIA Paca-2的侵袭转移能力，发挥这一作用的途径可能与MAPK通道和PI3 K通道有关。

白细胞介素1受体相关激酶4基因沉默抑制人成骨样细胞相关基因的表达

背景:造成假体周围骨溶解的完整分子机制目前尚未完全清楚。假体周围骨溶解、吸收是人工关节松动的典型病理生理过程。白细胞介素1通过MAPK信号通路影响骨吸收进程。目的:实验通过观察siRNA沉默白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase-4,IRAK-4)基因表达对人成骨样细胞株MG63的MAPK信号转导通路的影响,为防治人工关节置换后假体周围骨溶解提供实验基础。方法:以Lipofectamine 2000为载体将IRAK-4-siRNA转染入MG63细胞。实验分为3组,空白组不加入任何转染试剂;对照组以scrambled siRNA序列进行转染;沉默组以特异性IRAK-4-siRNA序列进行转染。Western blot检测靶细胞细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。结果与结论:与对照组相比,靶基因沉默组的IRAK-4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。MG63细胞IRAK-4表达下调后,与空白组和对照组相比,c-Jun氨基末端激酶1/2P46、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化p38MAPK表达下调分别为62%,64%,68%(P<0.05)。结果证实,siRNA沉默IRAK-4基因抑制人成骨样细胞株MG63细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。

MAP激酶在植物信号传递网络中的功能

促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinases,MAP激酶,MAPK)链是真核生物信号传递网络中的重要途径之一.MAPK链由3类蛋白激酶MAP3K—MAP2K—MAPK组成,通过依次磷酸化将上游信号传递至下游应答分子.本文主要阐述MAPK链在植物的逆境反应、抗病反应和激素调控等信号传递网络中的功能.

细胞外组蛋白H4对淋巴细胞凋亡的影响及其与MAPKs信号通路的调控关系

目的探讨细胞外组蛋白H4对小鼠淋巴细胞Raw264.7细胞凋亡的影响及其与促分裂素原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路的调控关系。方法收集Raw264.7细胞分为低浓度刺激组、高浓度刺激组及对照组,分别加入50μg/m L、100μg/m L组蛋白H4及不做任何处理,采用FCM法检测各组细胞凋亡率,选取既能诱导细胞凋亡又具有较低细胞毒性的组蛋白刺激浓度进行后续实验。组蛋白H4在去除脂多糖污染后,使用筛选浓度刺激Raw264.7细胞,分别在刺激开始0、5、10、30、60、120 min收取细胞,Western blotting法检测细胞磷酸化ERK(p-ERK)、p-JNK、p-p38蛋白表达。分别使用ERK通路抑制剂、JNK通路抑制剂、p38通路抑制剂、DMSO细胞冻存液预处理Raw264.7细胞1 h,作为ERK抑制组、JNK抑制组、p38抑制组、阴性对照组,另设空白对照组正常培养不做处理,每组分别给予或不给予筛选浓度的组蛋白刺激,采用FCM法检测各组给予或不给予组蛋白刺激的细胞凋亡率。结果低浓度刺激组、高浓度刺激组细胞凋亡率均高于对照组(P均<0.05),低浓度刺激组、高浓度刺激组细胞凋亡率比较差异无统计学意义,但高浓度刺激组晚期细胞凋亡率及死亡率较低浓度刺激组增高(P均<0.05)。考虑到细胞毒性,选取50μg/m L作为组蛋白H4的刺激浓度。p-ERK蛋白表达在组蛋白刺激10 min及30 min时均高于0 min时,且在30 min时达到高峰,在60 min及120 min时降至初始水平;p-JNK蛋白表达在组蛋白刺激10 min及30 min时均高于0 min时,且在10 min时达到高峰,在60 min及120 min时降至初始水平(P均<0.05);p-p38蛋白表达在各时点差异均无统计学意义。空白对照组、阴性对照组组蛋白刺激的Raw264.7细胞凋亡率均高于没有组蛋白刺激的细胞(P均<0.05),ERK1、JNK及p38抑制组组蛋白刺激、不刺激的细胞凋亡率比较差异均无统计学意义。结论细胞外组蛋白H4刺激可促进淋巴细胞凋亡,其作用可能通过激活MAPKs信号通路中ERK和JNK信号分子来实现。

黄连碱预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠JNK/p38MAPK信号通路的影响

目的:探讨黄连碱预处理对心肌缺血再灌注(MI/RI)大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:将60只大鼠随机分为MI/RI组、假手术组、黄连碱低剂量组(黄连碱-L组,50 mg/kg黄连碱)、黄连碱中剂量组(黄连碱-M组,100 mg/kg黄连碱)、黄连碱高剂量组(黄连碱-H组,200 mg/kg黄连碱)及黄连碱-H+激活剂组(50 mg/kg黄连碱+25 mg/L JNK/p38MAPK通路激活剂茴香霉素),每组10只。除假手术组外,其余各组均进行冠状动脉结扎构建MI/RI大鼠模型,造模后,观察血流动力学参数左室内压最大上升(LVdp/dt_(max))、左室内压最大下降速率(LVdp/dt_(min))、收缩压以及舒张末压变化;采集大鼠腹部主动脉血,评估心肌损伤程度指标肌酸激酶同工酶(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)含量;分离心肌组织,检测心肌组织病理学变化、细胞凋亡、炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]水平及JNK/p38MAPK通路相关蛋白表达。结果:与假手术组比较,MI/RI组存在大量炎性细胞浸润、组织结构紊乱,病理损伤严重,LVdp/dt_(max)、LVdp/dt_(min)、收缩压均降低,但凋亡率、舒张压、LDH、CK-MB、TNF-α、IL-6含量、p-JNK/JNK、p-p38MAPK/p38MAPK表达增加(P<0.05);与MI/RI组比较,黄连碱-L组、黄连碱-M组、黄连碱-H组病理损伤得到改善,LVdp/dt_(max)、LVdp/dt_(min)、收缩压均增加,凋亡率、舒张压、LDH、CK-MB、TNF-α、IL-6含量、p-JNK/JNK、p-p38MAPK/p38MAPK表达降低(P<0.05);与黄连碱-H组比较,黄连碱-H+激活剂组病理损伤进一步加剧,LVdp/dt_(max)、LVdp/dt_(min)、收缩压均降低,但凋亡率、舒张压、LDH、CK-MB、TNF-α、IL-6含量、p-JNK/JNK、p-p38MAPK/p38MAPK表达增加(P<0.05)。结论:黄连碱预处理可通过抑制JNK/p38MAPK通路减轻MI/RI大鼠心肌损伤。

HMG20A对肝癌细胞体外增殖与迁移的影响及其机制

目的研究HMG20A在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展和转移中的功能与机制。方法在不同转移能力和遗传背景的肝癌细胞Huh7和HCCLM3中分别构建HMG20A过表达和敲低稳定株,通过实时定量PCR(real time quantitative PCR,qPCR)验证过表达和敲低该基因的效果。用CCK8试剂盒检测HMG20A对肝癌细胞增殖能力的影响,利用Transwell小室分析HMG20A调控肝癌细胞转移的能力。借助Western blot和qPCR分析HMG20A调控肝癌增殖和转移的机制。结果体外实验表明,HMG20A能够促进肝癌细胞的体外增殖和迁移,显著上调促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路中p38(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)的活性和表达水平,同时上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的标志物Vimentin、抗平滑肌抗体(anti-smooth muscle antibody,alpha-SMA)、N-cadherin受到显著的正调控,E-cadherin受到显著负调控。结论 HMG20A可能通过促进EMT进程和MAPK通路促进肝癌细胞的体外增殖与迁移。

白芥子涂法穴位贴敷调控TGFβ/MAPK/MMPs通路保护过敏性哮喘豚鼠气道上皮屏障作用的研究

目的:研究白芥子涂法穴位贴敷对哮喘豚鼠的保护作用机制。方法:将豚鼠分为正常组、模型组、贴敷治疗组,OVA致敏,首次激发后,行每周一次的贴敷治疗,共3次。HE染色检测炎症水平、明胶酶谱法检测肺组织金属蛋白酶活性,Western Blot法检测TGFβ、MMP9及Pan-cadherin及磷酸化和非磷酸化Erk1/2、p38的含量。结果:白芥子涂法穴位贴敷能明显减轻哮喘豚鼠的炎症,降低肺组织TGFβ水平并通过抑制Erk1/2及p38MAPK磷酸化,降低肺组织中金属蛋白酶活性、MMP9含量,减少气道上皮屏障关键蛋白Pan-Cadherin破坏。结论:白芥子涂法穴位贴敷可能是通过降低TGFβ-Erk1/2、p38途径抑制金属蛋白酶表达和活性,保护胞外基质细胞连接蛋白,起到防治过敏性支气管哮喘的作用。

人基质细胞衍生因子-1对骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的:探索人基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对间充质干细胞(MSC)增殖的影响.方法:采用经典的全骨髓贴壁法培养MSC,通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞仪分析其表面标记(CD133,CD34,CD90,CD105)等鉴定MSC特征;以P3-MSC为实验材料,采用H3-TdR参入法分析SDF-1对MSC增殖的影响.以50 nmol/L渥曼青霉素,10mmol/L LY294002,50 mmol/L PD98059,0.1g/L AMD3100等分别处理P3-MSC,观察SDF-1影响MSC增殖的信号机制.结果:培养的MSC呈现出CXCR4,CD90和CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;含有100 mg/L SDF-1的20mL/L促进了MSC增殖,而含有100 mg/L SDF-1的150 mL/LFBS抑制了MSC增殖.SDF-1抑制MSC增殖的效应与其使MSC停滞在G1/S期有关.促分裂原活化蛋白激酶P38MAPK阻断剂SB203580和CXCR4阻断剂AMD3100取消了SDF-1抑制MSC增殖的效应,而细胞外信号调节激酶阻断剂PD98059加强了SDF-1抑制MSC增殖的效应.结论:SDF-1/CXCR4介导的抑制MSC增殖的效应与促分裂原活化蛋白激酶和细胞外信号调节激酶等信号分子有关.

顺铂肝毒性机制的研究进展

顺铂是一种高效、广谱的抗肿瘤药物,但其临床应用受到耳毒性、肾毒性、肝毒性等不良反应限制,其中耳毒性和肾毒性已进入动物和临床研究阶段,但肝毒性尚未引起足够重视。因此,本文概述近年来国内外顺铂肝毒性机制的最新研究现状,为确立临床有效防护措施提供参考。

盐生杜氏藻MAPK基因的克隆及表达分析

克隆盐藻MAPK基因(命名为DsMAPK),为研究盐藻耐盐分子机制奠定基础。采用RT-PCR和RACE技术克隆DsMAPKcDNA全长,对其进行生物信息学分析,并通过QRT-PCR方法检测盐胁迫下该基因的表达情况。DsMAPK的cDNA全长序列为1861bp(GenBank AccessionJQ782412),包含一个开放阅读框,长度为1407bp,编码468个氨基酸;DsMAPK蛋白为亲水性蛋白,α-螺旋和自由卷曲是其蛋白质二级结构的主要结构元件,伸展链散布其中。据氨基酸序列同源性分析表明,DsMAPK和衣藻、团藻的MAPK蛋白具有较近的亲缘关系。盐藻在高盐胁迫下,DsMAPK基因表达显著上调,1h后达到最大值,为正常对照组的5倍,差异极显著(P<0.01)。DsMAPK基因可能在盐藻对盐胁迫的反应中起重要作用,是一种参与盐藻耐盐反应的早期快速反应基因。

变应性鼻炎患者中MAPK和NF-κB信号通路的表达变化

目的探讨变应性鼻炎(AR)患者中促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)和核转录因子(NF-κB)信号通路的表达及变化。方法采用酶联免疫吸附试验检测AR患者(试验组)和健康体检者(对照组)血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-Iβ、IL-4、p38MAPK和NF-κB的表达。结果与对照组相比,试验组中TNF-α、IL-Iβ、IL-4、p38MAPK和NF-κB的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AR患者血清中TNF-α、IL-Iβ、IL-4、p38MAPK和NF-κB呈过度表达状态;检测患者血清中的相关细胞因子,NF-κB有利于了解患者过敏状态并协助AR的诊断。

MAPKs在细菌所致细胞凋亡中的作用

MAPK家族是与细胞生长、分化、凋亡等密切相关的信号转导途径中的关键物质,它在介导细胞凋亡过程中起着重要的作用。近年研究发现MAPK途径在调控细菌诱导细胞凋亡的过程中发挥了极为重要的作用。探讨细菌诱导细胞凋亡的发生发展过程与MAPK信号途径中各成员间的关系,有助于从分子水平上更好地阐明病原微生物的致病机制,可能为开发新型抗感染药物提供新的靶点。

子痫前期孕妇TNF-α和MAPK信号转导通路表达情况的研究

目的了解肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在子痫前期孕妇的表达情况,为子痫前期发病机制的研究提供实验基础。方法选择2019年1月至12月因子痫前期于江西省妇幼保健院行剖宫产分娩的单胎孕妇30例作为研究组,选择同期因瘢痕子宫、骨盆狭窄、胎位不正行剖宫产分娩的单胎孕妇30例作为对照组,采用ELISA法检测两组孕妇血清中TNF-α的表达水平,采用Western blot法检测两组孕妇胎盘组织中MAPK信号转导通路相关蛋白p-p38、p-c-Jun氨基末端激酶通路(p-JNK)、p-细胞外信号调节蛋白激酶通路(P-ERK)及下游分子核转录因子κBp65(NF-κBp65)、c-fos、c-Jun的表达情况。结果研究组血清中TNF-α的表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组胎盘组织中p-p38和p-JNK的表达水平高于对照组,p-ERK的表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。子痫前期孕妇血清中TNF-α的表达水平与胎盘组织中p-p38、p-JNK的表达水平呈正相关,与p-ERK的表达水平呈负相关(P<0.05)。研究组胎盘组织中MAPK通路下游分子NF-κBp65、c-fos、c-Jun的表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MAPK信号通路可能通过调控炎症反应参与子痫前期的发病过程。

有机氯农药雄性生殖毒性中MAPK信号转导途径的作用机制

促有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导途径与细胞生长、分化、凋亡等密切相关,在介导细胞凋亡过程中起着重要作用。近年研究发现MAPK途径在调控有机氯农药诱导雄性生殖毒性中发挥了极为重要的作用,并且发现活性氧的大量生成是介导有机氯农药作用于MAPK途径的关键性物质。探讨有机氯农药诱导细胞凋亡的发生发展与MAPK信号途径关系,有助于从分子水平上深入的阐明有机氯农药诱导雄性生殖障碍的作用机制。

MADD抑制人前列腺癌PC-3细胞凋亡作用的研究

目的:检测含促分裂素原活化蛋白激酶激活死亡结构域蛋白(MAPK-activating death domain-containing protein,MADD)在前列腺癌组织及良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)组织中的表达并探讨其对前列腺癌细胞凋亡的作用。方法:收集40例人前列腺癌及35例BPH组织,免疫组化染色技术检测MADD的表达情况;Western blot技术检测MADD在人前列腺癌细胞株(LNCaP、PC-3和PC-3M)和良性前列腺细胞株(BPH1)中的表达情况;应用MADD siRNA转染人前列腺癌PC-3细胞,Western blot检测其MADD、caspase-3和PARP表达,MTT和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡变化。结果:MADD在前列腺癌组织中的表达高于BPH组织(P=0.000);人前列腺癌细胞株LNCaP、PC-3M和PC-3中MADD表达水平明显高于良性前列腺细胞株BPH1(P=0.009、P=0.001、P=0.000),沉默PC-3细胞中MADD表达,导致活化型caspase-3和PARP降解产物表达增加,并诱导PC-3细胞凋亡增加和增殖活力降低(P=0.000)。结论:前列腺癌组织中MADD表达明显增高,MADD在前列腺癌中可能作为凋亡抑制因子发挥功能。

水稻BWMK1互作基因的分离

为探明BWMK1介导的信号传导途径，采用酵母双杂交系统，构建水稻稻瘟病菌诱导后的cDNA文库，以BWMK1为诱饵，对文库进行筛选，通过验证、测序和基因编码分析，获得了7个BWMK1互作基因BWIPI-BWIP7，分别位于水稻基因组第12、2、3、10、6、4、5染色体上；7个互作基因中，除BWIP2和BWIP7未找到同源编码蛋白外，其余5个基因BWIP1编码硫甲基转运酶，BWIP3编码磷酸肌醇合成酶，BWIP4编码磷转运蛋白，BWIP5编码WD-40重复包含蛋白，BWIP6编码N-乙酰谷氨酸激酶。