文昌鸡促卵泡素受体(FSHR)基因外显子区域SNPs分析

寻找与鸡繁殖性能相关的遗传标记,为高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。本研究以促卵泡素受体(FSHR)基因作为影响鸡繁殖性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术结合测序对FSHR基因部分包括所有外显子区域进行单核苷酸多态性检测和分析。结果发现,在区域2、区域4、区域6、区域9共4个区域存在SNPs位点。exon4编码区43bp处T→C突变,但没有导致翻译后氨基酸序列的改变,在exon2中编码区5′端—49bp处的C→T突变;exon6编码区3′端+12bp处的A→G突变;exon8编码区3′端+38bp处的G→T突变。促卵泡素受体(FSHR)是促卵泡素(FSH)的特异性受体,这些位点的单核苷酸多态性为下一步研究探讨FSHR基因对文昌鸡繁殖性能的遗传效应奠定了基础。

鸡促卵泡素及其受体基因在多个非繁殖组织中的表达研究

本研究利用PCR和免疫组化等方法,对FSHR和FSH基因在鸡多个非繁殖系统的组织器官中的mRNA和蛋白水平的表达以及相关性进行了分析。结果显示:在心脏、肝脏、肾脏、肺和十二指肠中FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平具有相同的表达趋势,表达丰度从大到小依次为肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠。而在脾脏、胃、腿肌和胸肌中未检测到FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平的表达;在检测的9个组织中,均无FSHmRNA的表达。相关性分析结果表明,在肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠中各组织器官质量与组织中的FSH蛋白水平具有显著或极显著的正相关(P<0.05或P<0.01);各组织中的FSHR mRNA和蛋白水平均与FSH蛋白水平存在显著或极显著正相关(P<0.05或P<0.01)。本研究初步证明,机体其他部位表达分泌的促卵泡素,在多个非繁殖组织器官(肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠)中通过调控促卵泡素受体基因的表达来影响北京油鸡不同组织的发育。

超数排卵效果不同绵羊卵巢卵泡促卵泡素受体的分布

【目的】探讨在具有不同超数排卵效果的绵羊品种中,进行超排处理后其卵巢上促卵泡素受体(FSH receptor,FSHR)的分布情况,为进一步研究二者的相关性及据此改进超排效果奠定基础。【方法】根据超数排卵效果优劣依次选择3个中国地方品种的绵羊:小尾寒羊、白滩羊和乌珠穆沁羊。在常规超排最后一次注射FSH后的8、16和24 h分别各取3只绵羊的卵巢,并采用免疫组织化学法观察3种绵羊卵巢上FSHR的分布情况。【结果】FSHR主要分布于3个品种绵羊卵巢的颗粒细胞上;小尾寒羊最后一次注射FSH后8、16和24 h的各时期卵泡中FSHR的表达都显著高于另外两个品种绵羊(P<0.05),在早期卵泡和中期卵泡中,白滩羊的FSHR表达量也高于乌珠穆沁羊;3个品种绵羊在最后一次注射FSH后第8、16、24小时,其晚期卵泡FSHR表达阳性率都显著高于各自相应的早期和中期卵泡(P<0.05)。【结论】推测出3个不同地方品种绵羊的卵巢对FSH处理的敏感性应该依次为:小尾寒羊>白滩羊>乌珠穆沁羊,表明绵羊超数排卵效果与其卵巢上FSH受体分布存在一定联系。

多浪羊和卡拉库尔羊卵巢促卵泡素受体的定位研究

【目的】探讨多浪羊和卡拉库尔羊卵巢组织中FSHR基因表达变化规律。【方法】采用免疫组织化学SP方法对两种绵羊卵巢组织上FSHR进行定位研究。【结果】FSHR阳性细胞主要表达在颗粒细胞上,在卵母细胞和膜细胞上也有少量表达,两地方品种绵羊卵巢上原始卵泡和闭锁卵泡时期表达差异不显著(P>0.05),而在初级卵泡、次级卵泡时期和成熟卵泡上表达差异显著(P<0.05);对同种绵羊分析时又发现原始卵泡与其他卵泡之间FSHR阳性细胞表达差异显著(P<0.05),成熟卵泡时期阳性细胞表达显著(P<0.05)高于初级和次级卵泡。闭锁卵泡是阳性细胞率与其他各级卵泡差异极显著(P<0.01)。【结论】推测出多浪羊对FSH的敏感性高于卡拉库尔羊,表明FSHR含量越高繁殖率越高。FSHR可能也参与其他因子的调控。

雌性哺乳动物促卵泡素受体与促黄体素受体的结构与表达

本文从雌性哺乳动物促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)的结构及在卵泡发育过程中的表达和功能加以综述,指出FSHR及LHR在卵泡的生长发育、优势化及排卵等方面具有重要的功能。

颗粒细胞上促卵泡素受体与体外受精-胚胎移植的相关研究

目的 探讨颗粒细胞上促卵泡素 (FSH -R)的含量与体外受精胚胎移植 (IVF -ET)结果的关系。方法 在 38个IVF周期中 ,将受精后获得的颗粒细胞 ,采用流式细胞测定仪测定其表面FSH -R的含量 ,并与IVF结果进行比较。结果 颗粒细胞上FSH -R的含量与获卵个数无显著的相关关系 (P >0 .0 5 )。受精率、卵裂率随颗粒细胞上FSH -R的含量增加而增加 (r =0 .5 7P <0 .0 1,r =0 .6 1P <0 .0 1)。妊娠组与非妊娠组的颗粒细胞上FSH -R含量有显著性差异 (P <0 .0 0 0 1)。结论 卵泡液中FSH与颗粒细胞膜上FSH -R相互作用共同促进卵母细胞的成熟和发育。

小尾寒羊促卵泡素受体基因5′端序列的TaqI酶切多态性分析

采用PCR -RFLP技术 ,TaqI酶切、分析了 38头份样品的小尾寒羊FSHR基因 5′端转录启动调控区序列。检测结果未发现多态性 ,在牛FSHR基因 5′端 - 387→ - 384位点 ,中国西门塔尔牛表现TaqI酶切多态的位点 ,小尾寒羊表现为无TaqI酶切序列的B等位基因类型 ,所有个体均为BB型。由于小尾寒羊的双羔率在10 0 %以上 ,通过比较表明

文昌鸡促卵泡素受体基因多态性分析

以促卵泡素受体(FSHR)基因作为影响鸡繁殖性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术结合测序对编码FSHR胞外区部分的第1外显子(exon1)至第9外显子(exon9)共9个外显子区域进行单核苷酸多态性(SNPs)分析,寻找与鸡繁殖性能相关的遗传标记,为高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。结果表明:在exon2、exon4、exon6、exon8区域存在SNPs位点,分别在exon2片段中编码区5′端-49 bp处的C→T突变;exon4片段中编码区43 bp处的T→C突变,但未引起氨基酸的改变;exon6片段中编码区3′端+12 bp处的A→G突变;距exon8编码区3′端+38 bp处的G→T突变。经适合性检验,各基因的基因频率在群体内的分布均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。FSHR是促卵泡素的特异性受体,这些位点的多态为进一步研究FSHR基因多态性对文昌鸡繁殖性能的遗传效应奠定了基础。

促卵泡素受体表达与调节研究进展

促卵泡素 (FSH)的生理作用是通过其受体 (FSHR)介导的 ,作者对 FSHR在睾丸和卵巢上的表达和调节以及在细胞系中表达的研究进展进行综述 ,以加深 FSH对动物生殖机能调控的理解 ,促进 FSHR在生殖生物学和生殖生理学上的研究。

山羊促卵泡素受体基因研究进展

促卵泡素受体(FSHR)作为影响动物繁殖力的主效基因,已在不同物种中被广泛和持续地研究。作者归纳和分析了山羊FSHR基因的结构及其蛋白质的结构、作用机制、表达范围和规律,总结了该基因单核苷酸多态性的遗传效应,发现山羊FSHR基因的生物信息和基因效应相关研究比较深入,且近期在信号传导方面的研究证实FSHR基因是卵泡形成和发育过程中的关键因素;与不同种群繁殖性能的关联分析提示,FSHR基因的某些单核苷酸突变位点可作为遗传标记辅助选择的依据,但不同山羊种群中的突变效应仍需进一步证实。

促卵泡生成素受体基因的SNP对牛双胎性状的标记研究

以秦川牛和荷斯坦奶牛的双胎母牛和单胎母牛为实验材料,以牛的FSHR基因的第10个外显子作为标记牛双胎性状的候选基因,用SNP法进行了多态检测。结果发现,在秦川牛的双胎母牛中突变率为60%(6/10),而在单胎母牛中突变率为20%(2/10);在荷斯坦奶牛中,双胎母牛突变率为31.25%(5/16),单胎母牛突变率为6.67%(1/15);由此可见双胎牛和单胎牛二者之间FSHR基因的第10个外显子的突变率差异明显。这表明选择FSHR基因的第10个外显子有可能作为双胎性状的候选基因。经序列分析发现在FSHR基因的第1506个碱基发生了突变(T→C),但氨基酸没有发生变化。

促卵泡素受体和促黄体素受体在乏情期和怀孕期牦牛卵巢中的表达

应用免疫组织化学技术和图象分析方法对乏情期、怀孕期牦牛卵巢的促卵泡素受体(FSHR)、促黄体素受体(LHR)的表达特点进行了研究。结果表明,牦牛卵巢的皮质、髓质、颗粒层和膜内层、黄体中都分布有FSHR和LHR。且牦牛卵巢皮质、髓质中的FSHR光密度值在乏情期显著大于怀孕期(P<0.05);怀孕期无黄体侧卵巢颗粒层和膜内层中FSHR光密度值均大于乏情期和怀孕期有黄体侧(P<0.05)。怀孕期有黄体侧卵巢皮质处LHR光密度值最大,乏情期次之,怀孕期无黄体侧最小,各组间差异显著(P<0.05);在怀孕期无黄体侧卵巢髓质处LHR光密度值显著小于怀孕期有黄体侧和乏情期(P<0.05);在乏情期、怀孕期无黄体侧和怀孕期有黄体卵巢颗粒层和膜内层处LHR光密度值之间差异均不显著(P>0.05)。表明牦牛卵巢中FSHR和LHR随着生殖阶段的不同而变化。

牛促卵泡素受体基因多态性的频率差异研究

采用PCR-RFLP技术,利用限制性内切酶TaqI分析了河南南阳黄牛、吉林延边黄牛、湛江荷斯坦奶牛3个牛品种的促卵泡素受体基因5＇端-387→-384位点的多态频率,并进行了不同牛品种间的差异比较研究.结果表明,所比较的4个不同牛品种在该位点的频率差异极其明显,但4个牛品种均为A等位基因频率高于B等位基因频率.

卵巢高刺激综合征与促卵泡素受体的关系

目的探讨卵巢高刺激综合征发生与促卵泡素受体(FSH-R)的关系。方法基因测序和功能检测,即从周边白细胞中提取DNA,FSH-R基因外显子及内合子的基因,用点突变的方法将突变的FSH-R基因引入一表达质粒(PSVL),引入的突变基因再次用测序的方法核实。结果基因测序显示第10外显子的第567位密码子的第一个碱基对的腺苷酸(A)替代鸟苷酸(G)。这点突变导致蛋白序列的天冬酰氨替代天冬氨酸,从而破坏了T6P451的酶切位点。结论卵泡素受体(FSH-R)的异常刺激是卵巢高刺激综合征(OHSS)发生发展的一个基本因素,医源性卵巢高刺激综合征(OHSS)发生可能与促卵泡素受体(FSH-R)突变有关。

贵州地方山羊促卵泡素受体基因部分外显子多态性研究

本试验以贵州白山羊、黔北麻羊和贵州黑山羊3个地方品种为研究对象,采用DNA池结合PCR直接测序法对促卵泡素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)基因进行单核苷酸多态性检测,同时结合在线软件预测不同基因型的mRNA的二级结构。结果表明,在3个山羊品种中共检测到3个SNPs位点:C126T、C1246A和A1412C,其中C126T和C1246A分别位于外显子1和外显子10中,且均为同义突变,A1412C位于内含子中。对外显子1和10中的2个SNPs位点进行生物信息学分析,结果显示均导致了mRNA二级结构发生改变。

关元命门序贯针刺激活FSHR/cAMP/PKA通路促进早发性卵巢功能不全模型大鼠颗粒细胞增殖的机制研究

【目的】观察关元命门序贯针刺方案对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将雌性SD大鼠分为空白组、模型组、蛋白激酶A(PKA)抑制剂(H89)+针刺组、针刺组各12只。除空白组,其他3组大鼠采用雷公藤多苷片灌胃制备POI模型。模型成功建立后,空白组和模型组每日捆绑一次;针刺组大鼠在动情间期取关元穴针刺,在动情前期取命门穴针刺;H89+针刺组按照针刺组针刺方案干预,在每次针刺前30 min内腹腔注射H89。连续干预20 d。各组大鼠分别在干预后第1个动情间期和动情前期取材。酶联免疫吸附分析(ELISA)检测动情间期促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)水平,Western Blot法检测动情间期促卵泡激素受体(FSHR)、芳香化酶P450(P450arom)蛋白表达,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测动情间期和动情前期颗粒细胞活性,免疫组织化学法检测动情前期增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平。【结果】(1)与空白组比较,模型组和H89+针刺组血清FSH水平显著升高(P<0.01),E2水平显著降低(P<0.001);H89+针刺组FSH水平与模型组无差异(P>0.05),E2水平低于模型组(P<0.05);针刺组FSH水平低于模型组和H89+针刺组(P<0.05),与空白组无差异(P>0.05),E2水平显著高于模型组和H89+针刺组(P<0.01),仍低于空白组(P<0.05)。(2)模型组和H89+针刺组FSHR、P450arom蛋白表达均低于空白组(P<0.01);H89+针刺组FSHR蛋白表达水平与模型组无差异(P>0.05),P450arom蛋白表达水平低于模型组(P<0.05);针刺组FSHR、P450arom蛋白表达水平均高于模型组和H89+针刺组(P<0.05),但仍低于空白组(P<0.05)。(3)模型组和H89+针刺组GCs活性和PCNA平均光密度值均低于空白组(P<0.05);H89+针刺组GCs活性和PCNA平均光密度值均低于模型组(P<0.05);针刺组的GCs活性和PCNA平均光密度值显著高于模型组和H89+针刺组(P<0.05或P<0.01)。【结论】关元命门序贯针刺方案可通过上调促卵泡激素受体(FSHR)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路FSHR、P450arom蛋白的表达,调控性激素水平,提高GCs活性和促进GCs细胞增殖,从而改善POI。

不同培养时间对鸡卵泡颗粒细胞孕酮、雌激素分泌水平及FSHR、LHR基因表达的影响

目的:研究培养不同时间鸡卵泡颗粒细胞孕酮和雌激素的分泌水平,促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)的基因表达水平,推断体外培养时间对颗粒细胞激素分泌及相关受体基因表达的影响。方法:通过细胞体外培养的方法,分别于0 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集鸡卵泡颗粒细胞上清液,采用ELISA法测定细胞上清液内的孕酮及雌激素分泌水平,并采用荧光定量PCR技术检测颗粒细胞内FSHR和LHR基因表达情况。结果:在培养初期0 h^48 h孕酮和雌激素分泌量显著降低(P<0.05),随着培养时间增加到72 h两种激素的分泌量又开始增加,并达到培养初期水平,培养至96 h细胞内孕酮和雌激素分泌量再次降低;颗粒细胞FSHR和LHR m RNA的表达水平则随着培养时间的增加而降低(P<0.05)。结论:体外培养的卵泡颗粒细胞内孕酮和雌激素的分泌量随体外培养时间的延长呈先降低后升高的趋势,可能与体外培养细胞的生长状态相关,从整体上看随着培养时间的延长,细胞内孕酮和雌激素的分泌量均降低,可能与两种促性腺激素受体FSHR和LHR基因表达量下降相关。

抑制素对促卵泡素作用机制的研究进展

抑制素(inhibins)是一种主要由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的性腺激素,可以选择性抑制垂体促卵泡素(FSH)的合成与分泌。文章综述了众多学者建立的抑制素对FSH的作用机制,以及该作用机制与近年来研究结果的矛盾之处,并依据近年来的研究结果修正了抑制素对FSH的作用机制模型,以期为将来研究抑制素提供新的思路。

日粮赖氨酸水平对绿壳蛋种鸡生产性能和血清激素及卵巢FSH和LH受体mRNA表达的影响

本试验旨在研究日粮赖氨酸水平对绿壳蛋种鸡生产性能、血清激素及卵巢FSH受体(FSHR)、LH受体(LHR)mRNA表达的影响。试验选用30周龄的新杨父母代绿壳蛋鸡720只,随机分成6组,每组5个重复,每个重复24只鸡,分别饲喂赖氨酸水平为0.60%、0.65%、0.70%、0.75%、0.80%和0.85%的日粮。结果表明:0.65%赖氨酸水平组产蛋率显著高于0.85%水平组(P<0.05),0.70%赖氨酸水平组料蛋比显著低于0.60%水平组(P<0.05);血清FSH和LH含量均以0.70%赖氨酸水平组最高(P<0.05);与0.75%和0.85%赖氨酸水平组相比,0.65%水平组卵巢FSHR mRNA的表达量显著提高(P<0.05);血清FSH含量与卵巢FSHR、LHR mRNA表达量呈现较强相关性(r^2>0.85)。二次曲线分析表明,以产蛋率和料蛋比为主要评价指标,绿壳蛋种鸡赖氨酸需要量分别为0.70%和0.73%。综上所述,日粮赖氨酸水平为0.70%~0.73%时能够提高新杨绿壳蛋种鸡(31~43周龄)生产性能、血清促性腺激素含量及卵巢FSHR基因的表达。