鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的研究进展

促性腺激素抑制激素是2000年由日本学者首次从鹌鹑脑中分离出的一种新型下丘脑神经肽,通过其受体介导参与机体的生长、生殖以及摄食等生理过程。迄今,只在金鱼、斑马鱼、星点东方鲀、罗非鱼以及斜带石斑鱼等几种鱼中鉴定出促性腺激素抑制激素。目前,鱼类促性腺激素抑制激素的生理学功能研究相对较少,且存在争议。鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的表达调控以及其他生理学功能仍有待进一步研究。本研究简要总结鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的研究进展,并对促性腺激素抑制激素的生理学功能进行概括讨论,旨在加深对鱼类促性腺激素抑制激素的认识和了解,为进一步研究做铺垫。

促性腺激素抑制激素的研究进展

促性腺激素抑制激素(GnIH)是近年在鸟类首先发现的一种神经肽,C端具有精氨酰-苯丙酰胺(RF酰胺),GnIH及其受体在脑和多种器官分布,具有抑制促性腺激素合成和分泌、刺激摄食等作用。在哺乳动物发现C端具有RF酰胺的多肽,为鸟类GnIH类似物,具有相似的作用和组织分布。本文对GnIH的发现、结构、受体、分布定位、生理功能和作用机制进行了综述。

促性腺激素抑制激素在公猪下丘脑-垂体-睾丸轴的分布定位研究

为揭示促性腺激素抑制激素(GnIH)在公猪生殖发育中的作用,本研究以15头雄性小梅山猪为研究对象,用免疫组化和半定量RT-PCR方法研究3、30、60、90和120 d的公猪(n=3)GnIH阳性细胞在下丘脑-垂体-睾丸轴的分布定位及在下丘脑的发育学变化。结果表明:GnIH在下丘脑主要分布于室旁核,GnIH阳性神经元呈纺锤形和多角形,且在下丘脑室旁核GnIH阳性神经元数目随日龄增长而上下波动,形态趋向成熟;在垂体分布非常广泛,无论是腺垂体还是神经垂体均有强烈的免疫阳性反应;在睾丸集中分布于生精小管内部,可见强烈的免疫阳性反应,在间质细胞也可见免疫阳性反应。GnIH mRNA的丰度随日龄增长而呈规律性波动,在120 d出现显著降低(P<0.05)。结论:GnIH分布于小梅山公猪下丘脑-垂体-睾丸轴,并对其发育有调节作用。

哺乳动物促性腺激素抑制激素的生殖内分泌调节与行为作用

哺乳动物中促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)同源物(RF-amide related peptide,RFRP)的神经元胞体主要存在于下丘脑背内侧核(dorsomedial hypothalamicnucleus,DMH),其神经纤维主要投射到视前区(preoptic area,POA)和下丘脑正中隆起,其受体主要分布在下丘脑。RFRP神经元投射到促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)神经元上;最终,RFRP和GnRH共同完成哺乳动物生殖轴功能调节。

促性腺激素抑制激素对SD大鼠性腺生殖功能与糖代谢的影响

【目的】探究促性腺激素抑制激素(GnIH)对SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢的影响,以及SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢之间的相关性。【方法】将36只SD大鼠随机均分为对照组(0.9%生理盐水)、1μg/100μL GnIH组(Ⅰ组)、10μg/100μL GnIH(Ⅱ组),每组12只(雌雄各半)。每天07:00和19:00注射生理盐水或GnIH(200μL/次),连续注射14 d后测量大鼠体重,计算肥胖程度,麻醉处死后采集卵巢和睾丸,称重并计算卵体比和睾体比;运用阴道涂片法观察雌性大鼠发情周期的变化;显微镜下观察并计算雄性大鼠精子活力;HE染色观察卵巢和睾丸组织变化;用实时荧光定量PCR法检测卵巢和睾丸中糖代谢基因胰岛素受体(IR)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和炎症相关因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的表达水平,并用SPSS 22.0软件分析生殖功能和糖代谢之间的相关性。【结果】与对照组相比,Ⅰ组雌性SD大鼠和Ⅱ组雄性SD大鼠肥胖程度均显著升高(P<0.05);Ⅱ组卵巢大小/重量、卵体比显著升高,睾丸重量、睾体比显著下降(P<0.05)。HE染色结果显示,与对照组相比,Ⅱ组雌性大鼠卵泡呈囊性扩张,颗粒细胞层减少,卵泡腔变大;Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠的生精小管均出现空泡样改变,生精细胞排列紊乱、层次减少。与对照组相比,Ⅱ组大鼠发情前期的持续时间显著延长(P<0.05)、精子活力显著下降(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,Ⅰ、Ⅱ组雌性大鼠GLUT4基因的表达量极显著下降(P<0.01)、Ⅱ组中IR基因的表达量显著降低(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠GLUT4基因的表达量均极显著降低(P<0.01);Ⅰ组雌性大鼠TNF-α、IL-1β基因和雄性大鼠IL-1β基因的表达量均显著升高(P<0.05),Ⅱ组雌、雄大鼠TNF-α基因的表达量均极显著升高(P<0.01)。相关性分析结果显示,腹腔注射GnIH后,雌性大鼠的卵体比与GLUT4基因表达水平呈极显著正相关(P<0.01),与IR基因的表达水平呈显著正相关(P<0.05);雌性大鼠的发情周期与GLUT4基因表达水平呈极显著负相关(P<0.01);雄性大鼠睾体比与GLUT4基因表达水平均呈显著正相关(P<0.05),而精子活力与GLUT4基因表达水平均呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】腹腔注射GnIH能够抑制大鼠的生殖功能和导致糖代谢功能紊乱,而且GnIH可能参与性腺能量代谢与生殖功能的交叉对话,是能量代谢与生殖功能的新型联络因子。

亲吻肽与促性腺激素抑制激素:调控生殖轴的新型RF酰胺肽

亲吻肽为G蛋白偶联受体54(GPR54)的内源性配体,其C末端为精氨酸-苯丙氨酸-NH2(RFamide)。促性腺激素抑制激素(GnIH)的受体为GPR147,其C末端亦为RFamide。雌激素通过上调脑内亲吻肽的表达,促进促性腺激素释放激素(GnRH)分泌。GnIH对GnRH亦可发挥直接作用,在下丘脑和垂体两个水平上抑制促性腺激素的合成和分泌。十余年来越来越多的证据证实,这两条C末端为RFamide的调节性神经肽(RF酰胺肽)能直接作用于GnRH神经元,并相互拮抗地参与性类固醇激素对生殖轴的反馈调控。

促性腺激素抑制激素—抑制素—卵泡抑制素融合基因疫苗的构建

促性腺激素抑制激素(GnIH)是唯一被阐明对GnRH、LH起着负调控作用的神经肽,在非繁殖期抑制动物的繁殖功能,为运用生殖免疫原理中和GnIH,调节GnRH、LH激素水平,诱导藏羊非繁殖季节发情提供契机。本研究以GnIN-INH-Follistatin-(C3d)融合的PET28a-GnIN-INHFollistatin-(C3d3)原核表达载体为基础,将GnIN-INH-Follistatin-C(3d3)转入真核疫苗表达载体pSEC-tag2a中构建pSEC-tag2a-GnIN-INH-Follistatin-C(3d3)基因疫苗。将质粒转染HEK293细胞,转染24h后收集细胞,做采用takara的荧光定量PCR用2Xpremix对基因进行RT-PCR试验来验证,表明pSEC-tag2a-GnIN-INH-Follistatin-C3d3质粒转染HEK293细胞后能够在HEK293细胞内稳定表达。结果表明,成功构建INH-GnIH融合基因疫苗,为开展研究免疫后非繁殖季节藏羊生殖激素表达规律工作提供理论和技术支撑。

促性腺激素抑制激素与生殖轴的关系

下丘脑的促性腺激素释放激素(GnRH)对调控促性腺激素释放十分重要。10年前在鸟类中首先发现了促性腺激素抑制激素(GnIH),它的鉴定提示GnRH不是唯一能直接影响垂体促性腺激素释放的下丘脑神经肽。GnIH及其同系肽广泛存在于鸟类及哺乳动物体内,GnIH在脑部与GnRH神经接触,GnIH可以直接抑制垂体促性腺激素的合成和释放,GnIH及其受体在鸟类和哺乳动物的生殖腺存在。因此GnIH可以在多个水平直接影响生殖轴:脑部、垂体、生殖腺。

促性腺激素抑制激素基因疫苗pVAX-RFRP和抑制素基因疫苗pXAIS对水牛卵泡发育的影响

40头奶水牛分4组,每组10头。Ⅰ组:p VAX-RFRP质粒肌注+p XAIS质粒肌注+p XAIS活菌苗喷鼻;Ⅱ组:p XAIS质粒肌注+p XAIS活菌苗喷鼻;Ⅲ组:p VAX-RFRP质粒肌注;Ⅳ组:PBS肌注对照。研究抑制素基因疫苗(p XAIS)和促性腺激素抑制激素基因疫苗(p VAX-RFRP)对水牛发情和卵泡发育的影响。结果表明:Ⅰ组和Ⅲ组水牛很快发情,与Ⅳ组(PBS对照)差异显著(P<0.05),Ⅱ组与Ⅳ组(PBS对照)差异不显著,3个试验组之间差异不显著。3个试验组总卵泡数都比对照组多(P>0.05),Ⅱ组大卵泡数较多,与Ⅳ组(PBS对照)差异显著(P<0.05),各试验组间大卵泡数不存在显著差异。结果表明,两种疫苗都显著促进水牛发情,并有利于大卵泡发育。

促性腺激素释放激素抑制剂在卵巢功能低下患者促排卵中的应用

目的:比较卵巢功能低下患者应用促性腺激素释放激素抑制剂(GnRH antagonist,GnRH-A)促排卵与促性腺激素释放激素激动剂(GnRH agonist,GnRH-a)短方案促排卵有无差异。方法:A组应用GnRH-a与HMG/rFSH(Gn)促排卵共53个周期,B组应用HMG/rFSH(Gn)与GnRH-A促排卵共30个周期,比较两组HCG注射日的血清E2与LH水平及内膜厚度、卵泡刺激素用量及所用天数,获卵数、受精率、卵裂率、种植率和妊娠率。结果:B组与A组相比,两组的促卵泡激素(Gn)所用天数有明显差异(10.87±2.43 vs 9.62±1.70,P<0.05),B组平均获卵数要高于A组但两组无统计学意义(10.43±7.94 vs 9.00±6.98,P>0.05),两组之间的HCG注射日血清E2与LH水平及内膜厚度、Gn用量、受精数、受精率、卵裂数、卵裂率、妊娠率均无显著性差异(P>0.05)。结论:GnRH-A是卵巢功能低下患者的促排卵治疗可行方案。

促性腺激素抑制激素研究进展

促性腺激素抑制激素（GnIH），这种神经肽最初在鹌鹑被发现，无论是体内还是体外都抑制垂体促性腺激素的释放。这种影响随后也被证实，

促性腺激素释放激素激动剂长方案和促性腺激素释放激素抑制剂方案对卵巢功能减退患者促排卵效果和临床妊娠的影响

目的探讨促性腺激素释放激素激动剂长方案和促性腺激素释放激素抑制剂方案对卵巢功能减退患者促排卵效果和临床妊娠的影响。方法 80例卵巢功能减退患者为研究对象,随机分为观察组和对照组,各40例。观察组采用促性腺激素释放激素激动剂长方案进行治疗,对照组采用促性腺激素释放激素抑制剂方案进行治疗,观察治疗周期结束之后,两组患者促排卵效果(包括获卵数、受精率、种植率、卵裂率)和临床妊娠(包括妊娠率和足月分娩率)情况。结果两组患者的获卵数、受精数、卵裂数、受精率、种植率、卵裂率比较,差异无统计学意义(P>0.05),但观察组妊娠率和足月分娩率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论促性腺激素释放激素激动剂长方案比促性腺激素释放激素抑制剂方案对卵巢功能减退患者临床妊娠效果更显著,值得临床推广应用。

促性腺激素释放激素抑制剂及口服避孕药在子宫内膜异位术后86例的辅助治疗对比分析

子宫内膜异位症是一种慢性复发性疾病,在生育年龄妇女中有10%发病率,80%有明显痛经,10%合并不育,目前尚无完全满意的治疗手段。虽然腹腔镜保守手术目前被认为是治疗育龄妇女子宫内膜异位症较好的选择,但防止复发不是很有效,而术后药物治疗显得大为重要。我们与妇产科合作对本院86例中重度子宫内膜异位症患者在腹腔镜术后应用促性腺激素释放激素抑制剂（CnR H-a）和口服避孕药辅助治疗,比较其临床疗效。

GnIH/RFRP-3通过受体GPR147抑制PI3K/AKT/mTOR通路诱导雌激素受体阳性人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的研究

目的:基于G蛋白耦联受体147(GPR147)受体探讨促性腺激素抑制激素(gonadotropin inhibitory hormone,GnIH)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响及分子机制。方法:①体外培养人乳腺癌细胞系MCF-7,设空白调零组、对照组和GnIH实验组(0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL、10000ng/mL)。应用CCK-8法检测细胞增殖能力;用流式细胞仪检测凋亡率;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印记分析(Western Blot),在mRNA和蛋白质水平上检测GnIH对凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、cytochrome C、Caspase-3、P53)和PI3K/AKT/mTOR信号通路上PI3K、AKT/p-AKT、mTOR蛋白表达情况。Western Blot法检测GnIH的受体GPR147在MCF-7细胞系上的表达情况。②将细胞分为PBS对照组、DMSO对照组、GnIH组和GnIH+RF9抑制剂组培养24h,分别加入PBS15μL、DMSO3μL、GnIH10000ng/mL和GnIH10000ng/mL+RF910μmoL进行干预,继续培养24h。Western Blot检测AKT/p-AKT蛋白表达情况。结果:①CCK-8结果显示:GnIH实验组0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL的细胞与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);GnIH10000ng/mL实验组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果:对照组和GnIH实验组10000ng/mL时的细胞凋亡率分别为(7.76±1.57)%和(16.14±3.001)%,差异有统计学意义(F=6.164,P=0.0351)。凋亡相关蛋白Bax、cytochrome C、Caspase-3蛋白表达(P<0.01)和P53蛋白表达显著上调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01)。PI3K/AKT/mTOR信号通路中,PI3K、AKT/pAKT、mTOR蛋白表达显著下调(P<0.05)。MCF-7细胞系上存在GnIH的受体GRP147,当药物浓度为10000ng/mL时,与对照组比较受体激活(P<0.01)。抑制剂干预后,与GnIH组相比,GnIH+抑制剂RF9组细胞的AKT/p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:乳腺癌细胞系MCF-7上存在GnIH受体GPR147。GnIH可能通过与GPR147受体结合抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖和诱导凋亡,并且凋亡的发生可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

精子发生的内分泌激素调节

下丘脑-垂体-睾丸轴系对男性生殖功能起着关键性作用,精子发生是这个轴系精密调节的结果。下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)脉冲式释放控制了卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的波动性分泌,GnRH脉冲频率的变化调节垂体促性腺细胞分泌两种不同的激素,是一种独具一格的机制。促性腺激素抑制激素(GnIH)于2000年首次从鹌鹑垂体鉴定出来。GnIH的发现使我们更深入地了解下丘脑激素对垂体促性腺细胞的调节。哺乳动物的GnIH神经元定位于下丘脑背内侧核,轴突延伸至正中隆突。GnIH通过其受体GPR147抑制垂体促性腺细胞的功能。成年男子的精子发生需要FSH和睾酮的共同作用,任何二者之一缺失会损害Sertoli细胞的分化和功能以及生精细胞在精子发生过程的发育。睾酮至少从4个方面促进精子发生:(1)紧密连接(tight junction)的形成和功能;(2)附睾的发育和功能;(3)生精细胞的发育;(4)精子释放。在体研究提示,雌激素亦对精子发生起重要作用,雌二醇调节小鼠精原细胞系和精母细胞系调亡和抗调亡之间的平衡。

GnIH与INH表位多肽疫苗主动免疫对甘肃高山细毛羊生殖激素的影响

本试验通过合成促性腺激素类的抑制激素——抑制素（inhibit hormone,INH）与促性腺激素抑制激素（gonadotropin inhibiting hormone,GnIH）的INH表位多肽疫苗和GnIH表位多肽疫苗,主动免疫甘肃高山细毛羊并对促卵泡素（follicle stimulating hormone,FSH）和促黄体素（luteinizing hormone,LH）激素水平进行比较分析。试验选用15只处在非发情季节的3.5岁的甘肃高山细毛羊,注射INH表位多肽疫苗与GnIH表位多肽疫苗分别为表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组,对照组注射等量生理盐水。采血后进行免疫,每隔7d免疫和采血,同时在发情后每隔15min采集一次血液,分离血清,用ELISA试剂盒检测抗体水平及FSH和LH激素变化。结果表明,表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组在初次免疫后都产生了相应的抗体,且表位多肽疫苗B组较表位多肽疫苗A组产生的抗体浓度高,75、90、105min时,表位多肽疫苗B组相对表位多肽疫苗A组显著促进了FSH的分泌水平（P〈0.05）。在45～105min时,表位多肽疫苗B组相对表位多肽疫苗A组显著促进了LH的分泌水平（P〈0.05）,且在90到105min时表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组血清中FSH和LH的水平均显著高于对照组（P〈0.05）。本试验结果表明,INH表位多肽疫苗和GnIH表位多肽疫苗主动免疫促进了甘肃高山细毛羊的FSH、LH的分泌,GnIH表位多肽疫苗在甘肃高山细毛羊上具有更好的免疫作用,本研究为该表位多肽疫苗在绵羊上的运用奠定了基础。

为什么性早熟的孩子需要用生长激素治疗

如果女孩在8岁前、男孩在9岁前出现性发育征象(第二性征),就是"性早熟",是临床上比较常见的一种内分泌疾病。对于性早熟的孩子,国内外公认的治疗办法是使用促性腺激素释放激素抑制剂(GnRHa)来有效抑制性发育的进程。但有很多孩子还伴有骨龄明显提前,因此,建议促性腺激素释放激素抑制剂治疗同时,联合使用生长激素,来促进身高增长。为什么需要用生长激素呢?这也是很多家长的困惑,让我们一起来看看其中的原因。

光照周期对动物下丘脑-垂体-性腺轴的调节机制

褪黑激素、kisspeptin、促性腺激素抑制激素、多巴胺和营养水平通过各自的作用方式对下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴)产生综合调节作用,同时,光照周期通过改变褪黑激素、褪黑激素受体、kisspeptin、促性腺激素抑制激素、多巴胺的表达或脉冲方式以及营养水平的反馈效应而对这种调节作用产生影响。为深入研究光照周期对HPG轴的调节机制提供参考,对光照周期通过褪黑激素、kisspeptin、促性腺激素抑制激素、多巴胺调节HPG轴机制进行了综述。

不同非手术治疗方案在子宫腺肌病中的临床效果分析

目的探讨不同非手术治疗方案在子宫腺肌病中的临床效果。方法回顾性分析非手术治疗子宫腺肌病患者临床资料130例,根据主治医师及患者选择治疗方案分为A组(曼月乐组,50例)、B组[促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)+曼月乐组,50例]和C组(地诺孕素组,30例)。观察各组治疗前与治疗后不同时间的子宫体积变化、月经量、痛经症状缓解情况、不良反应发生率及复发率等,评估临床治疗效果。结果治疗后各时间点子宫体积B组均小于A组,A组均小于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后各时间点VAS评分C组均小于A组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后3个月、6个月痛经VAS评分、PBAC评分B组小于A组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后6个月月经量评分C组小于B组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后12个月、24个月PBAC评分C组小于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。不规则流血发生情况C组与A组差异无统计学意义(P>0.05)。结论3组治疗均可以缓解临床症状,但以GnRHa+曼月乐效果最佳。

不同促排卵方案在卵巢功能减退患者中的有效性观察

目的比较促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)长方案和促性腺激素释放激素抑制剂(GnRH-A)方案对卵巢功能减退患者促排卵效果和临床妊娠的影响,为促排卵优选方案提供理论依据。方法选取符合标准的患者80例,随机分为观察组(GnRH-A方案)和对照组(GnRH-a长方案)各40例,比较二组治疗效果。结果两组患者hCG日血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)及孕酮(P)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);对照组Gn用药天数及用药量明显多于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组临床妊娠率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组取卵数及受精数低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GnRH-A方案可提高患者临床妊娠率,可能是卵巢功能减退患者一种较好的促排卵治疗方法。