促性腺激素释放激素 GnRH 相关肽存在于培养的大鼠垂体前叶促性腺激素细胞

为了探讨垂体促性腺激素细胞中ＧｎＲＨ相关肽（ＧＡＰ）的来源，本实验选用两种特异性抗ＧＡＰ抗体和抗ＦＳＨ－β抗体，采用免疫细胞化学双重染色技术，研究了ＧＡＰ在培养的大鼠垂体前叶细胞内的分布和定位。结果发现一些培养细胞可表达ＧＡＰ，而且ＧＡＰ免疫反应产物和ＦＳＨ免疫反应产物共存于同一种细胞。这表明ＧＡＰ存在于培养的大鼠垂体前叶促性腺激素细胞内。本文讨论了ＧＡＰ的来源及其可能的生物学作用。

孕晚期孕妇B族链球菌感染对血清β-绒毛膜促性腺激素、降钙素原、白细胞介素-8水平及妊娠结局的影响

目的探讨孕晚期孕妇B族链球菌(GBS)感染状况及对血清β-绒毛膜促性腺激素(β-hCG)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-8(IL-8)水平和妊娠结局的影响。方法回顾性选取2018年1月至2022年12月河南省驻马店市中医院进行GBS筛查的690例孕晚期孕妇作为研究对象,根据GBS感染情况分为感染组(83例)和未感染组(607例)。比较感染组和未感染组孕妇孕37周的血清β-hCG、PCT、IL-8水平及不良妊娠结局发生率;分析感染组孕妇血清β-hCG、PCT、IL-8水平与不良妊娠结局的关系。利用受试者操作特征(ROC)曲线分析β-hCG、PCT、IL-8对不良妊娠结局的预测价值。结果690例孕晚期孕妇检出GBS感染者83例,占12.03%。感染组孕妇血清β-hCG、PCT、IL-8水平均高于未感染组(P<0.05);感染组孕妇不良妊娠结局发生率为37.35%,高于未感染组的21.09%(P<0.05)。感染组孕妇中,发生不良妊娠结局的孕妇血清β-hCG、PCT、IL-8水平均显著高于正常妊娠结局孕妇,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清β-hCG、PCT、IL-8均具有预测不良妊娠结局的效能,效果各有所长。结论孕晚期孕妇GBS感染检出率为12.03%,血清β-hCG、PCT、IL-8水平升高与孕晚期孕妇GBS感染及不良妊娠结局有关系,各指标具有预测不良妊娠结局的效能。

促性腺激素释放激素激动剂通过ERK MAPK途径调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA表达

目的:促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的10肽激素,通过刺激促性腺激素释放激素的合成和分泌,调节性激素的合成。GnRH对睾丸间质细胞也具有直接的刺激作用。文中研究GnRH激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞ERK MAPK信号通路和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,血清饥饿2 h。GnRHa(10-7mol/L)和ERK抑制剂PD98059(50μmol/L)刺激细胞后Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK(t-ERK)的蛋白表达,荧光实时定量PCR检测3β-HSD mRNA表达。结果:结果显示GnRHa刺激间质细胞0、5、10、30、60和90 min后,p-ERK水平在5 min时达到最高,与对照组比较升高了约3.5倍(P<0.05);10 min时开始下降,但与对照组相比较仍显著升高2.2倍(P<0.05);90 min时恢复到正常水平。加入ERK选择性抑制剂PD98059后,p-ERK水平显著下降50%(P<0.05);再用GnRHa刺激细胞5 min,p-ERK水平仍无法恢复正常水平。用PD98059处理细胞后,再加入GnRHa培养24 h,3β-HSD mRNA水平也显著下降(与GnRHa组相比,P<0.05)。结论:GnRH激动剂可能通过ERKMAPK信号通路来调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA的表达,进而调控睾酮的分泌。

促性腺激素释放激素激动剂联合加味桂枝茯苓汤对子宫内膜异位症不孕患者血清细胞因子的影响

目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合加味桂枝茯苓汤对子宫内膜异位症(EMS)不孕患者血清细胞因子的影响。方法选取医院妇产科2016年6月至12月收治的行腹腔镜手术的子宫内膜异位症不孕患者50例,分为对照组(30例)和试验组(20例)。对照组患者采用GnRH-a治疗,试验组患者在此基础上加味桂枝茯苓汤,疗程均为3个月。结果治疗后,试验组血清血清血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、糖类抗原125(CA125)明显低于对照组(P<0.05)。结论加味桂枝茯苓汤辅助西药治疗子宫内膜异位症不孕可调控血清细胞因子的表达。

大鼠睾丸间质细胞中促性腺激素释放激素激动剂调控睾酮合成的机制

目的:研究促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的调控机制。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞,GnRHa(10-7 mol/L)分别处理间质细胞6、12、24、36、48 h后,Western blot方法分析3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)蛋白的变化;MEK1/2抑制剂PD98059(50μmol/L)和GnRHa共作用于间质细胞后,分析3β-HSD蛋白表达和睾酮水平的变化。结果:GnRHa处理间质细胞不同时间后,结果显示3β-HSD蛋白的表达对GnRHa的刺激具有时间依赖性。GnRHa处理12 h后,3β-HSD蛋白表达与对照组相比显著上升45%(P<0.05),24 h达到最高水平,升高1.0倍(P<0.05);48 h后3β-HSD恢复至正常水平。加入PD98059后,显著抑制了GnRHa对3β-HSD的刺激作用,3β-HSD水平下降了61%(与GnRHa组相比,P<0.05),睾酮水平也随之显著下降45%(与GnRHa组相比,P<0.05)。结论:GnRHa可能通过细胞外信号调节激酶(ERK1/2)途径调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD的表达,进而促进睾酮的合成。

胃腔内促性腺激素释放激素类似物对大鼠消化道胃泌素细胞功能的影响

目的 研究胃腔内促性腺激素释放激素 (GnRH)类似物对大鼠消化道胃泌素免疫阳性细胞及血液、胃液中胃泌素含量的影响。 方法 应用免疫组织化学和酶联免疫分析 (ELISA)方法分别检测大鼠消化道内胃泌素阳性细胞的密度及血液、胃液中胃泌素的含量。 结果 胃腔注射GnRH类似物后 ,胃壁内单位面积胃泌素阳性细胞数为 19 6 0± 3 6 3,与对照组 10 30± 2 4 1相比 (P <0 0 1) ;而十二指肠阳性细胞数为 18 0 0± 2 31,与对照组 9 0 0± 2 0 5相比 (P <0 0 1)。血液中胃泌素ELISA检测的A值为 0 5 5± 0 0 83,与对照组 0 2 3± 0 0 39相比 (P <0 0 1) ;胃液中为 0 5 2± 0 0 83,与对照组 0 30± 0 0 31相比 (P <0 0 1)。 结论 外分泌的GnRH对大鼠消化道中胃泌素的合成与分泌均起显著的促进作用。

促性腺激素释放激素激动剂对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD的表达影响

目的:探讨阿拉瑞林(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白V(annexin5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)的表达的影响.方法:建立体外分离、纯化和培养大鼠睾丸间质细胞原代培养技术,采用3β-HSD免疫细胞化学方法对间质细胞进行鉴定,同时用不同终浓度的GnRHa(分别为1×10-5,1×10-6,1×10-7mol/L)作用于间质细胞24h后,通过Western Blot检测间质细胞中annexin5和3β-HSD的表达变化情况.结果:间质细胞经GnRHa处理后,Western Blot结果显示,与对照组相比,当GnRHa终浓度为1×10-5mol/L时,anenxin5的表达量显著升高了69.2%(P<0.01),3β-HSD的表达量也升高了25.2%(P<0.05);当GnRHa的终浓度为1×10-6mol/L和1×10-7mol/L时,anenxin5的表达量分别升高了61.5%(P<0.05)和16.64%(P>0.05),3β-HSD的表达量则无显著性变化,分别升高了7.7%(P>0.05)和2.22%(P>0.05).结论:GnRHa在原代培养的睾丸间质细胞中,对annexin5,3β-HSD的表达具有调节作用.

培养的大鼠胃壁细胞促性腺激素释放激素的定位、克隆及序列分析

目的 研究培养的大鼠胃壁细胞GnRH的定位及其基因序列。 方法 应用免疫组织化学和原位杂交的方法进行定位研究 ;从壁细胞中提取总RNA ,应用RT PCR的方法扩增GnRH基因 ,并对产物进行纯化回收 ,连接入pUC19载体中扩增 ,经PCR和酶切鉴定后进行序列分析。 结果 大鼠胃壁细胞呈GnRH免疫反应性阳性物质位于细胞质 ,细胞核为阴性 ;壁细胞内亦可检测到GnRHmRNA杂交信号 ,信号物质位于细胞质 ,细胞核为阴性 ;同样从大鼠胃壁细胞中扩增出GnRH基因的特异性条带 ,经序列分析发现 ,扩增产物的基因序列与文献报道的大鼠下丘脑的完全一致。 结论 大鼠胃粘膜壁细胞能表达GnRH基因 ,其序列和下丘脑的完全一致 ,并能自身合成GnRH ,说明GnRH可能以自分泌或以旁分泌的方式参与胃壁细胞功能的调节。

促性腺激素释放激素(GnRH)对人绒毛膜上皮癌细胞系JEG-3侵润性的调节

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是生殖过程中起重要调节作用的激素.近年来的研究发现,Ⅰ型GnRH(GnRHⅠ)和Ⅱ型GnRH(GnRHⅡ)在胎盘和胎盘来源的滋养层细胞中发挥生理功能.利用人滋养层细胞模型人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)细胞,探讨GnRHⅠ和GnRHⅡ对人滋养层细胞侵润的调节作用.荧光实时定量PCR证实,GnRHⅠ和GnRHⅡ可调节JEG-3细胞中经典GnRH受体(GnRHRⅠ)的表达.RNA干扰实验显示,特异性针对GnRHRⅠ的siRNA可显著阻断GnRHⅠ对JEG-3细胞的促侵润作用,但不能影响GnRHⅡ的促细胞侵润功能,提示GnRHⅡ可能通过经典GnRH受体以外的其他受体介导,以发挥促进滋养层细胞侵润的功能.对信号通路的进一步研究表明,GnRHⅠ和GnRHⅡ通过ERK和JNK激酶级联促进基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,以调节细胞的侵润.

促性腺激素释放激素激动剂对子宫内膜基质细胞蜕膜化的影响

目的研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-α)对子宫内膜基质细胞蜕膜化的影响。方法体外原代培养人子宫内膜细胞并构建蜕膜化模型,用不同浓度的GnRH-α处理细胞,Real-Time PCR方法检测标志子宫内膜基质细胞蜕膜化程度的分子催乳素(prolactin,PRL)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)mRNA的表达,ELISA法检测其在细胞上清液中的蛋白表达。结果 10^(-8)g/ml浓度,10^(-7)g/ml浓度和10^(-6)g/ml浓度的PRL mRNA表达均增加,10^(-7)g/ml浓度和10^(-6)g/ml IGFBP-1mRNA的表达增加(P<0.05,P<0.01);蜕膜化72h10^(-6)g/ml浓度基质细胞上清液中PRL蛋白增加,10^(-7)g/ml浓度上清液中IGFBP-1蛋白增加(P<0.05)。结论 GnRH-α促进了子宫内膜基质细胞蜕膜化PRL和IGFBP-1mRNA的表达和上清液中PRL和IGFBP-1蛋白的分泌。GnRH-α可以促进对人子宫内膜基质细胞的蜕膜化。

促性腺激素释放激素细胞模型研究进展

促性腺激素释放激素 (GnRH)神经元是哺乳动物中枢生殖调控体系的最终共同通路。然而 ,由于GnRH神经元在脑内数目稀少以及散在分布 ,长期以来给GnRH神经元的分离鉴定和功能研究带来了极大的困难。因此 ,科学家们一直致力于寻找理想的细胞模型。离体GnRH细胞株 (GT1)以及最近在体绿色荧光蛋白 GnRH(GnRH GFP)转基因小鼠的诞生 ,给生殖内分泌领域的研究创造了极好的条件 。

神经营养因子受体Trkb对湖羊垂体细胞增殖及促性腺激素分泌的影响

[目的]本研究旨在探究神经营养因子酪氨酸激酶B受体(Trkb)基因对湖羊垂体促性腺激素分泌的影响。[方法]利用qPCR方法对Trkb进行组织表达谱分析;构建Trkb过表达载体并转染至湖羊垂体细胞,利用qPCR、Western blot、EdU以及ELISA等技术检测过表达Trkb对垂体细胞增殖及促性腺激素分泌的影响。[结果]Trkb在湖羊心、肝、脾、肺、肾以及下丘脑和垂体等各个组织中均有表达,但在垂体中表达水平显著高于其他组织(P<0.05)。Trkb在湖羊垂体组织不同发育阶段差异表达,其中在6月龄垂体组织中高表达(P<0.05),在5日龄和3月龄表达水平较低。与对照组相比,过表达Trkb基因显著促进了垂体细胞增殖率(P<0.05),增殖标记基因Pcna表达水平与Bcl2/Bax比值均显著提高(P<0.05)。此外,过表达Trkb显著提高了促性腺激素相关基因Fshβ和Lhβ的表达水平,促进了垂体细胞促卵泡素(FSH)分泌(P<0.05)。[结论]过表达Trkb能够显著促进湖羊垂体细胞增殖,降低细胞凋亡水平从而显著提高促性腺激素的分泌水平。本研究初步验证Trkb基因在湖羊垂体细胞中功能,为深入研究Trkb调控垂体功能的分子机制提供了试验依据。

促性腺激素释放激素类似物对In-R1-G9细胞中胰高血糖素分泌的影响

目的研究表明促性腺激素释放激素(gonadotrop in-releasing hormone,GnRH)可能对胰高血糖素具有调节作用,文中观察GnRH类似物对仓鼠胰高血糖素瘤细胞(In-R1-G9)胰高血糖素分泌的影响。方法通过W estern blot和免疫细胞化学的方法检测GnRH受体在In-R1-G9细胞中的表达和定位,然后分别用终浓度为0、0.1、10、1000 nmol/L的GnRH类似物处理培养的In-R1-G9细胞2 h,用放射免疫法分别检测对照组和实验组中胰高血糖素分泌量。结果 GnRH受体在In-R1-G9细胞中表达并定位在细胞膜上。低浓度的GnRH激动剂(GnRHa)(0.1 nmol/L)增强胰高血糖素分泌的作用不显著;而高浓度的GnRHa(10、1000 nmol/L)能显著增强胰高血糖素的分泌(P<0.05)。低浓度的GnRH拮抗剂(GnRHant)(0.1 nmol/L)降低胰高血糖素分泌的作用不显著;而高浓度的GnRHant(10、1000 nmol/L)能明显地抑制胰高血糖素的分泌(P<0.05)。结论促性腺激素释放激素类似物能以浓度依赖性的方式调节In-R1-G9细胞中胰高血糖素的分泌,这一过程可能通过GnRH受体作用。

人胎胰腺促性腺激素释放激素免疫反应细胞的形态测量分析

目的: 探讨不同胎龄人胎胰腺GnRH-IR细胞的变化。方法:用免疫组化方法对33例第13周至32周人胎胰腺GnRH-IR细胞显示定位后,用体视学方法对其进行形态学测量分析。结果:(1)GnRH-IR细胞分布于胰岛及外分泌部的腺泡、导管上皮细胞间。(2)人胎胰腺GnRH-IR细胞的数量和大小均随胎龄而增大。胰头和胰尾内、外分泌部GnRH-IR细胞的数密度(Nv)、体密度(Vv)、平均截面面积(A )和平均周长(B)均随胚胎发育而逐渐增大。(3)胰头GnRH-IR细胞的分布密度比胰尾的小。胰头内分泌部和外分泌部GnRH-IR细胞的Vv、Nv比胰尾的小(分别P<0.05和P<0.01=。(4)内分泌部GnRH-IR细胞比外分泌部的大而且密集。相同胎龄组同一部位的内分泌部GnRH-IR细胞的Vv、Nv、A、B参数比外分泌部的要大(分别P<0.05和P<0.01)。结论: 胰腺GnRH-IR细胞存在于人胎胰腺导管、腺泡和胰岛,随胎龄而增多增大,胰头部GnRH-IR细胞比胰尾部少,内分泌部的GnRH-IR细胞比外分泌部更多更大。

促性腺激素释放激素激动剂联合反加疗法治疗EMs的疗效及其对T淋巴细胞的影响

目的研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)联合反加疗法治疗子宫内膜异位症(EMs)的临床疗效,探讨其对T淋巴细胞的影响。方法 66例EMs患者随机分为治疗组和对照组。对照组采用GnRHa治疗,治疗组采用GnRHa联合反加疗法治疗。治疗前后采用流式细胞技术测定外周血T淋巴细胞亚群,治疗结束后评价临床疗效。结果治疗组临床疗效总有效率为97.0%,显著高于对照组(P<0.05);治疗后两组CD4+细胞、CD4/CD8比值与治疗前比较显著上升多(P<0.05),且治疗组与对照组比较差异有显著性(P<0.05);两组治疗前后外周血CD3+和CD4+细胞差异无显著性(P>0.05)。结论 GnRHa联合反加疗法治疗EMs能有效地改善EMs患者的免疫功能,临床疗效显著,值得临床上应用。

促性腺激素释放激素对人卵巢癌细胞系OVCAR3体外生长调控作用的研究

目的观察GnRH受体在人卵巢癌细胞系OVCAR3中的表达,并研究促性腺激素释放激素激动剂(Triptorelin)对卵巢癌细胞体外生长调控作用。方法采用免疫组化SP法检测卵巢癌细胞系OVCAR3 GnRH I受体的表达;分别应用不同浓度Triptorelin作用于细胞,MTT法检测细胞生长抑制率。结果人卵巢癌细胞系OVCAR3表达GnRH I受体,Triptorelin可明显抑制GnRH I受体阳性的OVCAR3细胞生长。结论促性腺激素释放激素激动剂Triptorelin通过与人卵巢癌OVCAR3细胞株GnRH I受体结合,发挥抗增殖的作用。

促性腺激素释放激素和多巴胺对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)离体脑垂体细胞分泌促性腺激素的影响

本文研究了不同性腺发育时期淡水饲养的雌雄虹鳟 (Oncorhynchusmykiss)血浆促性腺激素 (GTH)浓度的变化规律 ;以及在离体条件下 ,探讨了促性腺激素释放激素 (GnRH)、GnRH拮抗物和多巴胺对虹鳟脑垂体细胞分泌促性腺激素 (GTH -Ⅱ )的影响 .结果表明 :( 1)在雄性 ,血浆中GTH -Ⅱ的水平随性腺发育而逐渐增高 ;在雌性 ,仅排卵期血浆中GTH -Ⅱ的水平明显增高 .( 2 )未成熟期和成熟期的雌性虹鳟脑垂体细胞对sGnRH和cGnRH刺激的敏感性表现不尽相同 .成熟期和排卵后的脑垂体细胞对GnRH的刺激较为敏感 ,GTH -Ⅱ的分泌量较多 .( 3)在没有sGnRH的存在下 ,GnRH拮抗物对GTH -Ⅱ的分泌不发生作用 ,而在sGnRH的存在下 ,GnRH拮抗物对GTH -Ⅱ的分泌表现出浓度依赖的抑制作用 .( 4 )在没有sGnRH的存在下 ,多巴胺对GTH-Ⅱ的分泌不发生作用 ,而当多巴胺的浓度一定时 ,随着sGnRH浓度的增加 ,GTH -Ⅱ分泌的量增大 .另外 ,不论sGnRH还是cGnRH都不影响不同时期的脑垂体细胞GTH -Ⅰ的分泌 .这些结果可为虹鳟的人工催产提供一些理论依据 .

异基因造血干细胞移植对女性卵巢功能的影响及促性腺激素释放激素激动剂保护效果的研究

目的 探讨清髓预处理异基因造血干细胞移植(HSCT)对女性卵巢功能的影响,促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)对该类患者卵巢功能保护的有效性及临床应用价值。方法 回顾性分析我院2016~2019年青春期及育龄期女性血液病患者35例行清髓预处理异HSCT后卵巢功能不全(POI)的发生率;比较2020~2021年青春期及育龄期女性血液病患者37例清髓预处理HSCT前使用GnRH-a和未使用GnRH-a两组的移植后闭经、血卵泡刺激素(FSH)水平、POI发生率。结果 行清髓预处理治疗的青春期及育龄期女性血液病患者在移植后均发生了闭经及POI;清髓预处理HSCT使用GnRH-a和未使用GnRH-a两组患者移植半年后均发生了闭经、FSH增高、POI。结论 青春期及育龄期女性血液病患者行清髓预处理HSCT后均发生了POI,该类患者在HSCT前使用GnRH-a对卵巢功能没有明确的保护作用。

人肝癌细胞自分泌促性腺激素释放激素的形态学证据

目的 :明确肝癌组织细胞是否具有分泌促性腺激素释放激素 (GnRH)的功能。 方法 :采用免疫组化和原位杂交技术 ,研究人肝癌组织中GnRH及其受体的表达。 结果 :10例石蜡包埋的肝细胞癌 (HCC)组织中有 7例表现为GnRH及其受体蛋白免疫反应阳性 ,GnRH及其受体均定位于肝癌细胞的胞膜和胞质 ;4例新鲜肝癌组织中有 2例检测出GnRH mRNA ,阳性杂交信号定位于肝癌细胞的胞质 ,胞核未见杂交信号。 结论 :本研究表明 ,肝癌组织细胞具有自分泌GnRH的功能 。

促性腺激素释放激素激动剂预处理对性成熟雌鼠调节性T细胞的影响

目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropin releasing hormone agonist,GnRHa）预处理对性成熟雌鼠调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）的影响。方法 30只动情周期正常的7-8周未交配KM雌鼠随机分成5组,第1组连续9 d每日注射醋酸曲普瑞林1次,第2组连续9d每日注射醋酸曲普瑞林后,在第9天注射重组人促卵泡激素1次,第10天注射绒毛膜促性腺激素1次,第3组、4组分别与第1组、2组对应,用生理盐水代替醋酸曲普瑞林,其余处理不变,第5组无药物干预。流式细胞学检测各组外周血、脾脏T淋巴细胞亚群及Treg比例;并分别从前4组中随机选取4只小鼠留取子宫内膜,用实时荧光定量PCR方法检测子宫内膜Foxp3 mRNA含量。结果 流式细胞技术检测结果发现,外周血T淋巴细胞亚群及Treg比例各组比较无明显差异。比较脾脏T淋巴细胞亚群及Treg比例发现,与第5组比较,第1、2、3、4组CD3＋比例下降（P〈0.05）,第2组CD4^＋比例下降（P〈0.05）;第2组CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg比例高于第4、5组（P〈0.05）;CD8^＋比例在各组间未见明显差异。实时荧光定量PCR检测结果发现,与第3组比较,第1组子宫内膜Foxp3 mRNA升高（P〈0.05）;与第4组比较,第2组子宫内膜Foxp3 mRNA升高（P〈0.05）。结论 GnRHa预处理后促排卵,可提高脾脏Treg比例及子宫内膜Foxp3 mRNA含量,可能提高机体免疫耐受水平。