半滑舌鳎促滤泡激素受体基因克隆及其在雌鱼生殖周期中的表达

通过简并引物扩增及RACE技术,首次克隆了半滑舌鳎促滤泡激素受体(FSHR)基因cDNA全长序列。该基因全长3105bp,编码704个氨基酸,含有典型的跨膜螺旋结构区域(TMhelix),属于糖蛋白激素受体(GHR)家族。该基因编码区共有19个Ser,4个Thr和5个Tyr磷酸化位点;3个潜在的N基端糖基化位点,分别是62NISS,226NGIK和356NSTS;441T为潜在的PKC位点。基酸序列比对结果表明,半滑舌鳎FSHR含有GpHR家族的特殊信号序列,如82CCAF,481ERW,594FTD和667NPFLY,含有10个LRRs(LRR1-10)。组织表达分析表明,FSHR表达广泛,除在性腺中大量表达外,其他非性腺组织也有表达,尤其以脾、肾、头肾表达最较高。采用125Ⅰ标记放射免疫分析法(RIA)测定雌鱼血清中E2含量的季节变化,发现4月时E2含量最低,10月时含量最高。卵巢中FSHR mRNA在10月表达量最高,1月最低。

半滑舌鳎促滤泡激素基因全长cDNA的克隆与组织表达分析

从半滑舌鳎Cynoglossus semilaevis Günther脑垂体中提取总RNA，利用RT-PCR和RACE技术首次克隆得到半滑舌鳎促滤泡激素（FSH）基因全长cDNA序列。半滑舌鳎FSHcDNA全长为541bp，开放阅读框为393bp，编码130个氨基酸（GenBank序列登录号：JQ277933）。发现一个N-糖基化位点：24～27NTT。与其他脊椎动物的FSH成熟肽氨基酸序列同源性比较表明，半滑舌鳎FSH与鲽形目和鲈形目鱼类FSH同源性为42％～49％，与鲤形目和高等脊椎动物FSH同源性为27％～319/5。用MEGA4．0软件构建了NJ树，获得的进化树表明，半滑舌鳎FSH与其他鱼类FSH聚类，亲缘关系较近。实时荧光定量组织表达分析表明，FSHmRNA除在垂体中大量表达外，其他组织也有表达，尤以脑、性腺表达量较高。半滑舌鳎FSHmRNA在垂体以外组织中的广泛表达，暗示FSH可能具有广泛的生理功能。

一种单克隆抗体酶免疫测定法的建立及其在检测家畜促滤泡激素中的应用

以牛促滤泡激素(bFSH)为抗原,制备出对bFSH特异的单克隆抗体(McAb)并进行了抗体的纯化和特性分析。以方阵交叉匹配试验挑选出最佳抗体配对,建立了一种可测定微量促滤泡激素的双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)。用IBM-PC微机对DAS-ELISA测出的数据进行了分析。本DAS-ELISA法已成功地应用于家畜血清促滤泡激素水平的检测。

恒河猴促滤泡激素生物测定法的建立和应用

目的建立恒河猴促滤泡激素(FSH)生物测定法。方法利用FSH体外生物测定法,测定了恒河猴血清中FSH含量。结果测定方法的灵敏度为0.02 ng/管,批内和批间误差分别为(2.53±1.25)%和(4.02±2.17)%,证明该方法准确性高;恒河猴血清中FSH含量反应曲线和hFSH标准曲线平行良好,说明该方法可以用来检测恒河猴血清中的具有生物活性的FSH变化,反映了动物正常的生理状态;回收实验表明,在该测定方法中加入5 ng、10 ng、20 ng hFSH时的回收率分别为(101.28±5.66)%、(99.78±4.51)%、(100.61±5.42)%,说明测定结果的可靠性。结论本实验所建立的FSH体外生物测定法灵敏度高,稳定性强。

家兔失血性休克时促滤泡激素含量的变化

据报道,休克可能对生殖功能有影响。本文用失血休克兔模型证明:失血性休克能抑制促滤泡激素(FSH)的分泌;抢救休克的某些措施能部分恢复该激素的分泌功能。

健身锻炼对老年男子性激素水平的影响

目的:探讨健身运动对老年男子性激素水平的影响。方法:13名老年男子采用功率自行车进行14周递增负荷有氧运动,实验前、第8周、结束时采血测定睾酮、雌二醇、促滤泡成熟激素(folliclestimulatinghormone,FSH)、促黄体生成激素(luteinizinghormone,LH)。结果:老年男子血浆睾酮处于正常值低限水平,实验结束时差异性不显著(t=1.556,P>0.05)。血浆雌二醇处于正常值中等水平,实验结束时较实验前下降了44.36%(t=2.599,P<0.05)。实验结束时雌二醇/睾酮比值较实验前下降明显,差异性显著(t=2.486,P<0.05)。血浆FSH大于正常值水平,实验结束时下降8.52%(t=2.320,P<0.05)。血浆LH处于正常值下限水平,实验中呈逐渐上升变化(t=4.213,P<0.01)。结论:递增负荷有氧运动可显著降低血浆雌二醇水平和雌二醇/睾酮比值,降低血浆FSH水平,提高血浆LH水平,有利于老年男子性能力向着良性方向发展。

激素和活性多肽

922498 生物活性生长激素单体的纯化[专,英]/Monsanto/EP-445-099:28.02.90-US-486476(04.09.91)07.02.91 as 870033.91-261823/36(16页)[译自DBA,1991,10(25),91-14656] 方法包括:i.获得生长激素单体和寡聚体蛋白混合液,pH大于7(最好大于10);ii.降低pH小于6(4～5.5),沉淀寡聚体而保留单体;iii.去沉淀,获得溶解的生长激素蛋白。该生长激素是从N-蛋氨酰牛生长激素,N-丙氨酰牛生长激素和N-丙氨酰猪生长激素中筛选的。

百合知母汤治疗围绝经期综合征的实验研究

目的观察百合知母汤对未成熟小鼠雌激素样活性的作用及其对围绝经期综合征大鼠的影响。方法 :采用幼龄雌性小鼠,连续灌胃4、8、16g/kg3个剂量的百合知母汤10d后,测定各组小鼠子宫、卵巢质量,并计算脏器系数。选用老龄雌性大鼠,连续灌胃2、4、8g/kg3个不同剂量的百合知母汤30～34d后,测定各组大鼠卵巢、子宫、垂体、肾上腺质量,计算脏器系数,进行卵巢、子宫组织学检查,并检测血清中雌二醇(E2),促滤泡生成激素(FSH)及促黄体生成激素(LH)的水平。结果与其他组比,百合知母汤能明显增加未成熟小鼠子宫、卵巢系数(P<0.05～0.01);显著增加大鼠卵巢、子宫、肾上腺系数(P<0.05～0.01);组织学检测显示,百合知母汤具有改善大鼠卵巢内卵泡发育状况,减轻子宫萎缩性病变的作用(P<0.05～0.01);百合知母汤3个剂量组均能明显增加自然衰老型围绝经期综合征大鼠血清E2水平(P<0.01),并降低血清FSH、LH水平(P<0.05～0.01)。结论百合知母汤对未成熟小鼠具有雌激素样活性,并且对自然衰老型围绝经期综合征大鼠的内分泌水平与围绝经期综合征症状具有明显改善作用。

鹿角胶抗乳腺增生的作用研究

目的:探讨鹿角胶对乳腺增生模型大鼠的治疗效果。方法:采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮腹腔注射制备乳腺增生模型大鼠,观察鹿角胶对乳腺增生大鼠乳房直径和乳头高度变化,血清中孕酮(P)、黄体生成激素(LH)、促滤泡生成激素(FSH)、雌二醇(E2)含量变化及血液流变学指标的影响。结果:与模型对照组比较,鹿角胶能够明显调节血清中P、LH、FSH、E2的含量,改善血液流变学指标,降低乳腺增生大鼠乳房直径及乳头高度。结论:鹿角胶对乳腺增生模型大鼠具有一定的治疗作用。

青春发育期儿童晨尿及血FSH、LH测定:附100例报告

促滤泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)为临床对青春期延迟、性早熟、下丘脑—垂体—性腺轴功能检测的重要指标。一般测定血中浓度,亦可自尿中检测。本文参照Morel的报道,建立以晨尿检测FSH、LH的方法,并对方法学进行了鉴定亦与血清中的FSH、LH作了相关性比较,证实本法灵敏、精确。晨尿和血中的FSH、LH浓度有相关性,适合于儿科临床和科研工作中推广应用。

瘤型和界线类偏瘤型麻风睾丸损害的比较研究

麻风可引起睾丸的解剖改变,进而引起雄性素不足和不孕。其病因可能是由於麻风菌血原播散到睾丸内皮细胞,继之引起间质炎症、细精管萎缩和纤维化,也可能为免疫性损害。成人男性中血清促滤泡激素(FSH)浓度增高提示有细精管损伤,Sertoli细胞产生的抑制素减少可反馈性地抑制FSH产生。向性腺激素(LH)浓度增高,提示睾丸间质细胞有损伤;睾丸酮产生减少,可反馈性地抑制LH的产生。

提高母猪受胎率关键技术(下)

四、催情排卵要使母猪多胎高产并促使不发情母猪及屡配不孕的母猪正常发情、排卵,可在实现上述各项措施的基础上进行人工催情。方法如下:1.公猪诱导用试情公猪追赶不发情的母猪,或每天把公猪关在母猪栏内2~3小时,由于公母猪接触,通过公猪爬跨等刺激,使母猪脑下垂体产生促滤泡激素,促使其发情排卵。

斑马鱼卵母细胞第一次减数分裂过程中MAPK的表达及定位

用不同浓度的促滤泡激素(FSH)和17α,20β-双羟孕酮分别作用于斑马鱼卵母细胞。结果表明,1 IU/mL的FSH和5 ng/mL的17α,20β-双羟孕酮对斑马鱼卵母细胞生发泡破裂都具有明显促进作用。其中17α,20β-双羟孕酮的作用效果较好,经过SDS-PDGE电泳和WesternBlot检测发现,5 ng/mL 17α,20β-双羟孕酮对斑马鱼卵母细胞诱导后,分裂原蛋白激酶被激活,生发泡破裂的卵母细胞数目增多。免疫组化检测证实,第Ⅰ期的卵母细胞中分裂原蛋白激酶没有激活,第Ⅱ期、第Ⅲ期细胞质中分裂原蛋白激酶开始激活,第Ⅴ期卵母细胞的胞质与核区同时存在活性的分裂原蛋白激酶,并伴有生发泡破裂。以上结果说明分裂原蛋白激酶在斑马鱼卵母细胞第一次减数分裂恢复过程中发挥重要作用,并且随着分裂原蛋白激酶激活,其活性部位从细胞质转移到细胞核。

腹腔镜和显微镜下精索静脉高位结扎术的疗效比较

目的:比较腹腔镜和显微镜下治疗精索静脉曲张的疗效。方法:将82例精索静脉曲张患者分成两组,44例行腹腔镜精索静脉高位结扎术(腹腔镜组),38例显微镜下行精索静脉高位结扎术(显微镜组)。对比两组患者术后间精液质量、并发症、手术所用时间、术后恢复时间及住院费用。结果:两组术后精液质量、促滤泡成熟激素(FSH)、睾酮及抑制素B比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组术后阴囊水肿、保留精索内动脉、手术平均时间、平均住院时间、平均住院费用比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:从安全性及经济性方面考虑,显微镜下行精索静脉高位结扎术明显优于腹腔镜精索静脉高位结扎术,值得临床推广。

血清抑制素B与睾丸生精功能

目的 探讨血清抑制素B与睾丸生精功能的关系。方法 将男性不育症病人分为原发性无精子症、严重少精子症和梗阻性无精子症 3组 ,另设正常对照组 ,分别测定其抑制素B、FSH及精子密度。结果 上述 4组的抑制素B浓度分别为 4 7.36± 32 .85 ,2 0 0 .92± 86 .4 4 ,2 82 .4 0± 98.2 1,2 36 .79± 10 7.70。结论 血清抑制素B可直接反映睾丸的生精功能状态 。

隐睾或去垂体大鼠血清中抑制素与FSH的关系

本研究观察了实验性隐睾与去垂体大鼠的血清、睾丸与间质液中抑制素水平与血清中FSH的水平。发现隐睾大鼠术后1～2周末,血清中抑制素水平下降到对照组的20～40％左右,FSH水平可增加到对照组水平的200％,二者之间有一个明显的负相关(r=-0.38,P=0.013)。去垂体大鼠的FSH水平下降到不能探测水平时,抑制素水平也明显下降。本实验认为抑制素调节着FSH的分泌,而FSH也部分地控制了抑制素的产生。