木麻黄(Casuarina equisetifolia)内生真菌的分离与促生菌株的筛选

采用组织分离法从福建省大鹤林场不同年龄木麻黄各组织器官中分离与纯化得到65株内生真菌.研究木麻黄内生真菌在其器官构件内的分布规律,同时按水培和盆栽两种方式侵染无性系苗,测定接菌苗木的新梢长度,筛选出促生长的菌株.结果表明:木麻黄内生真菌主要分布于植株的鳞状叶小枝和根中,分别占筛选出菌株数量的40.0%和41.5%,且随着树龄的增大,内生真菌的数量减少;在水培苗浸泡菌液方式下的接菌处理能显著增加苗木的平均抽梢量,促进水培苗生长.其中,菌株18处理下苗木的平均抽梢量为54.85 cm,是对照苗木的7.62倍.

ACC脱氨酶耐盐促生菌株的筛选及产酶条件研究

以ACC（1-氨基环丙烷-1-羧酸）为唯一氮源，采用PAF、DF 和ADF培养基定向富集的方法筛选具有ACC脱氨酶耐盐活性的促生菌株，并确定其产酶条件。结果表明：筛选出53株活性菌株，其中jz1和jz5的活性较高，分别为0.2802U·mg^-1和0.2415U·mg^-1；其产酶条件的最适pH 值为7.5，最佳培养时间为24-42h，最适温度为25-30益，随着底物浓度的增加酶活性上升。筛选出的活性菌株对黄瓜种子均有不同程度的促生作用，其中jz1 和jz6 处理较为明显，处理后黄瓜根长103.19mm，下胚轴长52.89mm。

潜在促生菌株的筛选及其在小麦上的应用效果

为了筛选潜在促生菌株并研究该菌株在小麦上的应用效果,采用土壤平板稀释法,从玉米植株的根围土壤中筛选出1株解磷作用较强的芽孢杆菌CY18,并成功扩增出植酸酶基因的部分编码区。通过革兰氏染色、芽孢染色初步鉴定该菌株为芽孢杆菌,并将其应用于促进小麦生长的研究。结果表明:CY18在温室和田间试验中均能促进小麦生长;在室内试验中,CY18菌剂促生效果最好的B_(500)处理(1.0×10~8CFU/mL)与对照相比,分别可使小麦鲜质量、株高、根长增长6.94%、22.87%、52.25%,除鲜质量外差异达到极显著水平。

土壤高耐砷促生菌株的筛选及其对砷去除性能的研究

由于近年来工业的发展,环境重金属污染已成为亟待解决的问题,而生物法治理土壤砷污染目前已是该领域的研究热点.本研究旨在筛选出高耐砷促生菌株,并初步探究菌株对砷的去除能力.从实验室保藏及分离自铁尾矿土壤的菌株中筛选出对As^(3+)和As^(5+)均有高耐受活性的两株菌.其中LSM1可分别耐受3200 mg·L^(-1)的As^(3+)和5500 mg·L^(-1)的As^(5+),LYT1可分别耐受3200 mg·L^(-1)的As^(3+)和6000 mg·L^(-1)的As^(5+),两株菌分别被鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)和鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumannii).进一步探究筛得菌株的促生作用,结果表明,LSM1具有产IAA能力,LYT1兼具解磷、固氮和产IAA能力.菌株的最适生长条件及复合菌剂的As^(5+)去除能力研究结果表明,LSM1和LYT1的最适生长pH和温度均为pH=7,30℃,LSM1在As^(5+)50 mg·L^(-1)、LYT1在As^(5+)100 mg·L^(-1)下的生长情况最好.两株菌在培养48 h时对砷的去除率均大于24 h,两株菌在培养液As^(5+)为50 mg·L^(-1)条件下对砷的去除率均大于100 mg·L^(-1),研究表明,复合菌剂的砷去除率均大于单个菌株,复合菌剂在48 h、培养液As^(5+)浓度为50 mg·L^(-1)时的砷去除率达到最大值,为67.40%.研究结果表明,两株菌对As^(3+)和As^(5+)均有高耐受性和去除能力,并具有促生作用,为后续开展植物-微生物联合修复砷污染土壤研究提供菌种资源和技术支撑.

发酵料中促平菇生长菌株的分离与鉴定

平菇发酵培养料含有吲哚乙酸(IAA),IAA促进平菇生长发育。为了找到产生IAA能力强的微生物菌株,首先,采集不同时期的平菇发酵料样品,采取稀释涂布平板法分离细菌菌株。其次,挑选120株菌利用显色反应进行产IAA能力的定性分析及定量测定,并对高产IAA菌株进行平菇促生试验研究。最后,利用GUTC法提取产IAA能力强的菌株的基因组DNA并进行16S rRNA基因扩增及测序分析,基于构建的16S rRNA基因进化树进行系统发育分析,确定菌株的分类学地位。结果表明,120株菌中有116株菌产生显色反应,即证明这116株菌有产IAA的能力。相对于对照组显色程度,有88株菌的IAA显色程度较低,28株菌的IAA显色程度相对较高。挑取这28株菌进行定量测定,其中,AFX-13-3、XWW-4-3、LTX-11-3、AMB-8-2、AMB-10-2、AMB-14-3、ST-1-2、ST-3-2、ST-4-2等9株菌所产IAA的质量浓度达到20 mg/L以上。AFX-13-3产IAA的能力最强,其IAA平均质量浓度达到85.18 mg/L;其次为AMB-10-2、ST-3-2、AMB-8-2、XWW-4-3,其IAA平均质量浓度分别为39.35、34.12、30.94、30.71 mg/L;ST-1-2、ST-4-2、LTX-11-3、AMB-14-3产IAA的能力相对较弱,其IAA平均质量浓度分别为24.41、24.09、22.26、21.94 mg/L。平菇促生试验结果表明,AFX-13-3、XWW-4-3、LTX-11-3均有较好的促生作用。通过16S rRNA基因测序和系统发育分析,确定AFX-13-3属于巨大芽孢杆菌属,XWW-4-3、LTX-11-3属于谷氨酸杆菌属。

七株耐重金属菌株的促生特性研究

随着矿产资源的不断开采与选冶,我国面临着耕地面积减少和重金属危害人体健康两大难题,因此,重金属污染土壤修复的问题亟需解决.植物修复技术因其生态友好且成本较低而受到众多学者广泛研究.但迫于高浓度重金属产生的毒性压力,植物很难在高浓度重金属污染土壤中正常生长,因而其修复效率也很低,而耐重金属的促生菌株能够很好地弥补此缺陷.为此探究了实验室前期筛选保存的7株耐重金属菌株对植物的促生特性,包括解无机磷、固氮、产吲哚-3-乙酸(IAA)及产铁载体能力.研究结果表明,7株耐重金属菌株均有解无机磷及产IAA的能力,溶磷量为1.47~2.0 mg·L-1,其中菌株HM-12的溶磷活性最高,HD/CD为2.13.IAA产量为35.18~161.15 mg·L-1,其中菌株W-STS-8的IAA分泌量最大.此外,C1-Z、HM-12和LSM3具有固氮能力,而具有产铁载体能力的菌株只有W-STS-8.此研究成果为后续构建促生菌群及其联合植物修复重金属污染土壤提供菌种资源.

含复合菌群生物育苗基质的研制及其育苗效果

[目的]开发含复合菌群生物制品或农业投入品,对于促进作物增产具有重要意义,本文旨在利用分别具有拮抗病原菌、解磷、产生长素能力的菌株,研制含根际促生菌菌群的生物育苗基质,以期为育苗基质产业的发展提供技术支撑。[方法]以本实验室经过广泛田间试验验证,且具有促生及抗土传病害功能的解淀粉芽胞杆菌SQR9为核心菌株,筛选出与之无拮抗效应的产生长素和具解磷能力的菌株;采用Biolog全自动微生物鉴定系统测定菌株对不同碳源利用能力,通过碳源重合关系确定菌种组合;通过育苗和盆栽试验评估含复合菌群生物育苗基质的育苗效果。[结果]经过筛选,与菌株SQR9对峙无拮抗圈的溶磷菌株分别为Y40、Y2和NJAU-3;产吲哚乙酸(IAA)菌株分别为NJAU-5、L-60、NJAU-69和NJAU-84。利用碳源重合关系,构建4种菌株组合2个、3种菌株组合6个和2种菌株组合4个。2季苗盘试验及2季盆栽试验结果均表明,微生物碳源利用重合数与植物促生效果呈显著负相关关系,含菌株SQR9、Y2和L-60与含菌株SQR9、Y2和NJAU-84这2个含复合菌群功能型生物育苗基质,在黄瓜前期育苗效果和后期盆栽效果均优于单菌处理及不添加功能菌普通育苗基质(对照)。[结论]结合拮抗效应测定和碳源利用重合关系,能够有效筛选出高效菌群组合,最终确立含3种菌株的2组复合菌群SQR9+Y2+L-60和SQR9+Y2+NJAU-84为研制生物育苗基质的最佳组合。