促红细胞生成素产生肝细胞受体-配体系统在胚胎着床和发育中的作用

促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular receptor,Eph受体)是受体酪氨酸激酶家族成员之一,通过与配体Ephrin结合发挥生物功能。Eph-Ephrin系统有16个受体成员和8个配体成员,均为膜蛋白结构,受体配体结合后发生细胞双向信号传递,调节胚胎对子宫内膜的粘附和侵入,引导胚胎血管重塑,促进胚胎多个系统发育。本文综述了Eph-Ephrin系统在胚胎着床和发育中的作用。

多瘤病毒增强活化子3和红细胞生成素产生肝细胞受体A2在脑胶质母细胞瘤中的作用

目的探讨多瘤病毒增强活化子3(PEA3)、红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EPHA2)在脑胶质母细胞瘤中的作用。方法构建人脑星形胶质母细胞瘤U87细胞基因转染模型,将细胞系分为5组:空白组、PEA3干扰组、PEA3干扰空载组、EPHA2干扰组、EPHA2干扰空载组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果CCK-8检测细胞增殖结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的细胞增殖率均明显低于空白组[(59.7±1.3)%、(59.5±0.7)%比(67.8±1.3)%](P<0.01或P<0.001),PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组的细胞增殖率与空白组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。细胞划痕实验结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的划痕愈合率低于空白组[(31.7±1.1)%、(23.0±2.6)%比(42.8±8.8)%],差异均有统计学意义(均P<0.05),PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组划痕愈合率与空白组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。Transwell检测细胞侵袭能力结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的侵袭细胞数明显少于空白组[(643±20)、(542±165)个比(1225±70)个](均P<0.001),而空白组与PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组侵袭细胞数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论干扰PEA3基因和EPHA2基因能明显降低脑胶质母细胞瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力。

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)SAM结构域对激酶结构域的脂质体结合能力与激酶活性的调控研究

促红细胞生成素产生肝细胞受体(Eph receptor)是受体酪氨酸激酶(RTK)家族中最大的亚家族,其介导的双向信号传导对细胞的形态、黏附、运动、增殖、生存及分化都有重要的调控作用。EphA2是Eph受体家族中一个被广泛研究的重要亚型,在白内障和乳腺癌等病理发生过程中发挥了重要作用。既往研究发现:EphA2受体的激酶结构域可结合细胞膜,其激酶活性受磷脂膜的调控,但是相邻的SAM结构域对激酶结构域与脂膜的相互作用以及激酶活性的影响尚不清楚。在此项研究中,通过与磷酸酶PTP1B1-301活性片段共表达的方式,表达、纯化了EphA2受体的胞内段激酶-SAM串联结构域,通过比较胞内段激酶-SAM串联结构域与单独激酶结构域的脂质体结合能力,以及测定对应的激酶活性,发现:EphA2受体胞内段的SAM结构域使其激酶结构域与脂质体(4 mg/mL)的结合能力增强约6倍(P<0.001);磷酸化后的EphA2胞内段激酶-SAM串联结构域结合脂质体(4 mg/mL)的能力比非磷酸化的胞内段激酶-SAM串联结构域提高2.5倍(P<0.05);而结合脂质体后,激酶结构域的激酶活性也被进一步提高,从而形成正反馈。综上所述,本研究的发现提示:EphA2胞内段的酪氨酸激酶结构域与相邻的SAM结构域可形成一个完整的结构功能单位,其激酶活性和脂质体结合能力与单独的激酶结构域相比都形成了明显的差异,我们的这一发现对进一步理解Eph受体家族其他亚型的激酶结构域的活性调控提供了参考与思路。

促红细胞生成素对慢性肾衰竭患者红细胞免疫功能的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对慢性肾衰竭患者红细胞免疫、红细胞膜流动性等方面的影响。方法69例慢性肾衰竭患者被随机分成3组，每组23例。A组：采用透析和rHuEPO治疗；B组：未行血液透析单纯采用rHuEPO治疗；C组：采用内科保守治疗。采用改良郭氏法测定红细胞免疫功能；用荧光偏振法测定红细胞膜脂分子流动性。同时观察3组患者治疗期间的感染发生率。结果主要免疫学检测指标在药物治疗前A、B和C组间没有统计学差异。A、B两组患者治疗8周后，C3b受体、红细胞免疫促进因子(RFER)％显著升高，与对照组比较有非常显著差异(P<0．01)，而红细胞免疫粘附抑制因子(RFIR)％无明显变化，与C组比较统计学差异不明显。结论rHuEPO可以提高慢性肾衰竭(CRF)患者的红细胞免疫功能，降低患者的感染率。

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2基因沉默对人卵巢癌细胞生物学性状的影响

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)基因沉默对人卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭的影响。方法利用质粒和脂质体介导转染法,经稳定筛选后,采用Western blot检测细胞EphA2蛋白表达情况,应用CCK-8和Transwell小室侵袭实验,观察EphA2基因沉默对卵巢癌HeyA8-MDR细胞生物学性状的影响。采用SPSS21.0软件进行统计分析。结果与HeyA8-MDR(阴性对照组)、HeyA8-MDR+空白对照组进行比较,HeyA8-MDR+实验组EphA2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞增殖能力、迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.05)。结论EphA2基因沉默可抑制卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭,为卵巢癌的治疗提供了新思路。

血管内皮生长因子对静脉分子指纹产生促红细胞生成素的肝癌细胞B4受体表达的调控及其抑制移植静脉内膜增生的机制

目的探讨自体静脉移植后血管内皮生长因子（VEGF）对产生促红细胞生成素的肝癌细胞B4受体（EphB4）表达的调控及其抑制移植静脉内膜增生的机制。方法建立小鼠自体颈静脉移植重建颈总动脉的模型，采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）方法，检测术后不同时间点VEGF和EphB4mRNA水平；利用小干扰RNA（siRNA）阻断内源性VEGF的产生，比较处理组与非处理组内膜增生情况；以VEGF刺激鼠静脉内皮细胞观察EphB4表达；分别用VEGF传导通路的阻断剂预处理细胞，再以VEGF刺激细胞，检测EphB4表达。结果阻断移植静脉VEGF的表达后，EphB4表达显著减少（处理组0．52±0．14比非处理组2．10±0．79，P〈0．05），且内膜增生程度明显高于未处理组[处理组（29．8±2．09）μm比非处理组（14．7±0．05）μm，P〈0．05]。VEGF下调EphlM呈时间及剂量依赖性。VEGF通过VEGF受体2（VEGF-R2）及其下游信号传导通路细胞外调节激酶（ERK）1／2抑制EphB4表达。结论VEGF可能通过负性调控EphB4的表达而抑制移植静脉内膜增生，此调节作用通过VEGF-R2-ERKl／2途径实现。

雄激素依赖性前列腺癌细胞中雄激素受体上调EphA3表达

目的探讨雄激素依赖性前列腺癌细胞中促红细胞生成素产生肝细胞A型受体(EphA)3表达和雄激素受体(AR)信号通路的关联。方法首先通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹实验(Western blot)分别检测前列腺癌细胞LNCa P和22Rv1中EphA3和AR的mRNA及蛋白水平,然后用双氢睾酮(DHT)刺激48 h,测定细胞EphA3、AR和前列腺特异抗原(PSA)表达水平的变化。同时,将成功构建的荧光素酶报告基因重组质粒EphA3-Luc(-789^+146)与AR表达质粒pc DNA3.1(+)-AR或AR特异性小分子干扰RNA(si AR)共转染22Rv1细胞,分析AR对EphA3转录活动的影响。结果 EphA3在前列腺基质细胞WPMY-1中表达水平极低,但在前列腺癌细胞LNCa P和22Rv1中则明显升高,与AR表达模式相似。10 nmol/L DHT不仅明显上调22Rv1细胞中AR、PSA和EphA3表达水平,也显著升高LNCa P细胞中相关基因和蛋白水平。而且细胞内不同AR表达水平会显著影响EphA3启动子活性。结论 AR通过提高EphA3启动子活性上调EphA3表达水平。

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2在儿童脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2（EphA2）在儿童脑胶质瘤中的表达水平及其意义。方法收集2009年1月至2013年3月在郑州大学第五附属医院住院的具有明确病理分级的儿童胶质瘤标本78例为胶质瘤组，其中低级别组36例（Ⅰ-Ⅱ级）、高级别组42例（Ⅲ～Ⅳ级），另收集脑外伤行内减压去除的儿童脑组织标本33例为对照组。分别采用反转录（RT）-PCR、Westernblot和免疫组织化学法测定胶质瘤组和对照组中EphA2mRNA及蛋白表达水平。结果1．RT—PCR和Westernblot显示，EphA2mRNA在对照组脑组织中不表达，而在胶质瘤组中均呈高表达，差异有统计学意义（F=36．271，P〈0．05）；EphA2蛋白在高级别儿童胶质瘤组表达水平显著高于低级别儿童胶质瘤组，差异有统计学意义（F=42．839，P〈0．05）。2．免疫组织化学法显示，EphA2在对照组脑组织中呈阴性表达，在低级别胶质瘤组中的阳性表达为88．57％，在高级别胶质瘤组中的阳性表达为100．00％，且胶质瘤的级别越高，EphA2的阳性表达分布越强，差异有统计学意义（Z=4．962，P〈0．05）。结论EphA2在儿童脑胶质瘤中呈高表达，且与胶质瘤的病理分级相关，可能参与儿童脑胶质瘤的发生和进展。

低氧环境下EphrinB2/EphB4调控MC3T3⁃E1细胞成骨分化的实验研究

目的探讨低氧环境下促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2/促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4(erythropoietin producing hepatocyte kinase receptor ligand B2/erythropoietin producing hepatocyte kinase receptor B4,EphrinB2/EphB4)对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响,为低氧调控成骨细胞分化提供实验依据。方法设置对照组与氯化钴诱导的低氧组,对MC3T3-E1细胞进行分组培养,应用qRT-PCR检测细胞成骨标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、runt相关转录因子2(runt related transcription factor 2,RUNX2)、I型胶原(collogen-1,COL I)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的mRNA表达变化,ALP染色检测细胞成骨诱导7 d后ALP活性。同时通过qRT-PCR与Western blot检测两组MC3T3-E1细胞缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、EphrinB2、EphB4的mRNA和蛋白表达。然后增设氯化钴+EphB4磷酸化抑制剂组(加入EphB4磷酸化抑制剂NVP-BHG712)阻止EphrinB2与EphB4结合,通过qRT-PCR与Western blot检测三组成骨标志物ALP、RUNX2、COL I、OCN的mRNA与蛋白表达,ALP染色、茜素红染色检测细胞成骨诱导后ALP活性及矿化情况。结果与对照组相比,在氯化钴诱导的体外细胞低氧环境下,MC3T3-E1成骨标志物ALP、RUNX2、COL 1、OCN mRNA表达增加,ALP活性增强,矿化增强(P<0.05)。同时,在氯化钴诱导的低氧环境下,HIF-1α、EphrinB2、EphB4的mRNA和蛋白水平表达增加(P<0.05)。使用NVP-BHG712阻止EphrinB2和EphB4的结合后,细胞的成骨标志物表达下降,ALP活性及矿化能力降低(P<0.05)。结论低氧环境可通过EphrinB2/EphB4信号通路促进MC3T3-E1细胞的成骨分化,增加成骨标志物的表达及组织矿化。

非小细胞肺癌患者EphB3高表达促进血管生成拟态结构的形成

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织样本中促红细胞生成素产生肝细胞受体B3(EphB3)的表达以及与血管生成拟态(VM)形成之间的相关性。方法收集TCGA数据库中有关EphB3的基因表达数据,对比分析515例肺腺癌组织和59例正常组织、503例肺鳞癌组织和52例正常组织的基因表达差异。利用GEPIA2网站筛选出前100个与EphB3相关相似的基因。在仙桃数据库中进行基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。收集56例NSCLC患者组织样本,将样本固定在10%多聚甲醛溶液中并用石蜡包埋,按照SP两步法操作,检测其癌组织及癌旁组织中EphB3表达情况。常规CD31免疫组化染色至DAB显色步骤,向组织上滴加PAS染色溶液,镜下观察血管生成拟态结构。结合患者临床特征与EphB3、VM表达情况进行相关性分析。结果EphB3在肺鳞癌和肺腺癌中的表达量均高于对应的癌旁组织,差异均有统计学意义(P均<0.05)。GO/KEGG功能富集分析结果显示KEGG通路富集到Notch信号通路,GO分析结果显示与细胞间连接、细胞黏附分子结合、表皮细胞分化等相关(P<0.05)。免疫组化结果显示,56份样本中癌组织的面积分数为(13.04±1.77)%,癌旁组织为(3.92±0.61)%(P<0.05),其中有41例呈阳性表达,15例呈阴性表达,阳性表达率为73.21%,阴性表达率为26.79%。EphB3在癌组织中的高表达与年龄、吸烟史、T分期有关(P<0.05)。CD31/PAS双染结果显示,在29例样本中,EphB3阳性表达并存在血管生成拟态11例,EphB3阴性表达并出现血管生成拟态1例,EphB3的表达与血管生成拟态形成有关(P<0.05)。结论非小细胞肺癌中EphB3的高表达会促进血管生成拟态的形成,有望成为非小细胞肺癌抗血管生成治疗的潜在治疗靶点。

EphB4、EphrinB2和HIF-1α在脑星形细胞瘤组织中的表达及意义

目的探讨促红细胞生成素肝细胞(Eph)B4、Eph受体相互作用蛋白(Ephrin)B2和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在脑星形细胞瘤组织中的表达水平及意义。方法采用原位杂交法检测120例脑星形细胞瘤组织标本(病例组)和20例脑白质组织标本(对照组)的EphB4、EphrinB2和HIF-1α表达水平。结果病例组EphB4、EphrinB2和HIF-1α表达水平均明显高于对照组(P<0.05),病例组病理分级Ⅲ—Ⅳ级、临床表现有出血及坏死的EphB4、EphrinB2和HIF-1α阳性表达率均显著增加(P<0.05)。EphB4、EphrinB2表达水平与HIF-1α表达水平均呈正相关(r=0.483、0.486,均P<0.05)。结论 EphB4、EphrinB2和HIF-1α在脑星形细胞瘤中的异常表达与肿瘤的恶性程度有关,EphB4与EphrinB2可能存在协同作用。

TNF-α对牙周膜成纤维细胞ephrinB2/EphB4表达量的影响

目的:检测不同浓度TNF-α对牙周膜成纤维细胞ephrinB2/EphB4表达量的影响。方法:收集因正畸需要拔除的健康牙齿,培养原代牙周膜成纤维细胞;用不同浓度TNF-α分别刺激24 h,48 h后检测牙周膜细胞ephrinB2/EphB4 mRNA及蛋白表达量。结果:24 h组ephrinB2与EphB4 mRNA浓度均降低,差异有统计学意义(P<0.05);48 h低浓度组对ephrinB2 mRNA表达量无影响,0.1μg/L使EphB4 mRNA表达量增加,高浓度组使ephrinB2/EphB4 mRNA表达量下降;24 h组,TNF-α浓度为0.1~1μg/L时,ephrinB2/EphB4蛋白表达量无明显变化,TNF-α浓度为10~1000μg/L时ephrinB2/EphB4蛋白表达量下降;48 h组,0.1μg/L TNF-α作用后使EphB4蛋白表达量上升,ephrinB2蛋白表达量无明显变化,1μg/L作用后,ephrinB2/EphB4蛋白表达量均无明显变化,10~1000μg/L刺激后ephrinB2/EphB4蛋白表达量均下降。结论:24 h时TNF-α使ephrinB2/EphB4 mRNA与蛋白表达量均降低,但在48 h时,低浓度作用下EphB4表达量上升,是否可以为低浓度炎症状态下骨改建的研究提供参考。

敲低EphB1基因对过氧化氢诱导的大鼠心肌细胞氧化损伤的影响

目的:探讨敲低EphB1基因对过氧化氢(H 2O 2)诱导的大鼠心肌H9c2细胞氧化损伤的影响,为EphB1基因治疗心血管疾病提供依据。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,分为空白组(不做任何处理)、H 2O 2组(H 2O 2细胞损伤)、阴性对照组(转染siRNA control)和转染si-EphB1组(转染si-EphB1后H 2O 2细胞损伤)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组H9c2细胞中EphB1基因表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组H9c2细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,DCFH-DA探针法检测各组细胞内活性氧(ROS)水平,分光光度计法检测各组细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与空白组比较,H 2O 2组H9c2细胞中EphB1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),阴性对照组H9c2细胞中EphB1 mRNA表达水平无明显变化(P>0.05);与H 2O 2组比较,转染si-EphB1组H9c2细胞中EphB1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。与空白组比较,H 2O 2组细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),ROS和MDA水平升高(P<0.05),SOD水平降低(P<0.05),而阴性对照组细胞存活率、凋亡率、ROS、MDA和SOD水平差异无统计学意义(P>0.05);与H 2O 2组比较,转染si-EphB1组细胞存活率升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),ROS和MDA水平降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05)。结论:敲低EphB1基因能够抑制H 2O 2诱导的大鼠心肌细胞氧化损伤,起到心肌保护作用,其机制与提高心肌细胞存活率、抑制细胞凋亡、改善抗氧化酶活性和提高细胞内氧化应激产物清除能力有关。

EphB3受体在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:研究EphB3受体在乳腺癌组织中的表达及其对预后的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定80例原发性乳腺癌患者癌组织和癌旁正常组织中EphB3受体的表达,分析EphB3受体表达与患者临床病理参数的关系。应用Kaplan-Meier法对患者无进展生存期进行分析,Cox比例风险回归模型研究影响乳腺癌患者无进展生存期的因素。结果:EphB3受体在乳腺癌组织中表达水平高于对应癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.001)。EphB3受体表达与乳腺癌组织学分级(P=0.032)、淋巴结转移(P=0.034)和病理类型(P=0.028)密切相关。与EphB3受体低表达患者相比,高表达患者无进展生存期较短,差异有统计学意义(P=0.019)。EphB3受体高表达、HER-2阳性、分子分型三阴性、淋巴结转移是影响乳腺癌无进展生存期的独立危险因素。结论:EphB3受体在乳腺癌组织中表达水平明显增高,EphB3受体高表达是影响乳腺癌患者预后的独立危险因素。

过表达ephrinB2调控犬牙周膜干细胞的成骨能力

目的观察促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4/促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2(EphB4/ephrinB2)信号通路中过表达ephrinB2在比格犬来源的牙周膜干细胞(cPDLSCs)中成骨分化的能力。方法采用Beagle犬前磨牙及磨牙中分离PDLSCs,用EfnB2-GFP-Bsd载体和空载体(GFP-Bsd)转染细胞后进行成骨诱导分化,Western blot检测转染后ephrinB2蛋白表达水平,行CCK-8实验、茜素红S染色实验、碱性磷酸酶染色实验(ALP)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测EfnB2-cPDLSCs组、空载体对照组(Vector-cPDLSCs)的成骨分化效果。结果CCK-8显示:EfnB2-cPDLSCs组和Vector-cPDLSCs组在细胞增殖上没有差异。茜素红染色实验和ALP染色实验证实:EfnB2-cPDLSCs组较Vector-cPDLSCs显示更高的ALP活性和矿化能力。RT-PCR显示:EfnB2-cPDLSCs组成牙本质/成骨标志物的表达高于Vector-cPDLSCs组。结论通过过表达犬牙周膜细胞中的ephrinB2可提高其成骨分化的能力。

EphA2基因沉默对人食管癌EC9706细胞迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)基因沉默对人食管癌EC9706细胞迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法取对数生长期人食管癌EC9706细胞随机分为对照组、空载组及沉默组,分别转染Lipofectamine;2000、含无义随机序列(siRNA-NC-PGCsi3.0)和EphA2干扰序列(EphA2-siRNA-PGCsi3.0)质粒和脂质体的复合物。稳定转染后,Brd U法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR和Western blotting分别检测细胞中EphA2、Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA及蛋白相对表达量。结果对照组、空载组、沉默组BrdU阳性率分别为(26.48±2.79)%、(23.52±2.57)%、(13.29±2.06)%,Brd U阳性率组间比较,差异有统计学意义(F=38.560,P=0.000)。与对照组、空载组比较,沉默组Brd U阳性率降低(P <0.05);对照组与空载组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组、空载组、沉默组细胞划痕愈合率分别为(83.16±8.31)%、(82.35±7.24)%、(34.24±5.27)%,细胞划痕愈合率组间比较,差异有统计学意义(F=78.869,P=0.000)。与对照组、空载组比较,沉默组细胞划痕愈合率降低(P <0.05);对照组与空载组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组、空载组、沉默组穿膜细胞数分别为(326.74±33.15)个、(331.27±34.59)个、(126.23±26.18)个,穿膜细胞数组间比较,差异有统计学意义(F=68.997,P=0.000),与对照组、空载组比较,沉默组穿膜细胞数减少(P <0.05);对照组与空载组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞中EphA2、Wnt1、β-catenin、Ecadherin、Vimentin mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P <0.05),与对照组、空载组比较,沉默组Wnt1、β-catenin、Vimentin mRNA相对表达量降低(P <0.05),E-cadherin mRNA相对表达量升高(P <0.05)。对照组、空载组、沉默组细胞中EphA2、Wnt1、β-catenin、E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P <0.05),与对照组、空载组比较,沉默组EphA2、Wnt1、β-catenin、Vimentin蛋白相对表达量降低(P <0.05),E-cadherin蛋白相对表达量升高(P <0.05)。对照组和空载组上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EphA2基因沉默对人食管癌EC9706细胞迁移和侵袭有一定的抑制作用,其机制可能与阻止Wnt/β-catenin信号通路相关。

ncRNA介导的EphB4上调与低级别胶质瘤不良预后及肿瘤免疫浸润的相关性

目的探讨促红细胞生成素生成人肝细胞受体B4(erythropoietin-producing human hepatocellular receptors B4,EphB4)在低级别胶质瘤(lower-grade glioma,LGG)组织中的表达、其上游靶点以及与患者预后及肿瘤免疫浸润的相关性,分析其作为治疗靶点的潜在作用。方法首先应用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库胶质瘤数据分析EphB4在胶质瘤与正常脑组织中的表达差异,并用基因表达谱交互分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库分析EphB4对不同癌症生存期的影响。用R语言和starBase数据库分析EphB4可能上游调节非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)。用肿瘤免疫评估资源(Tumor Immune Estimation Resource,TIMER)数据库进行EphB4表达与肿瘤免疫细胞浸润、免疫细胞生物学标志物和免疫检查点相关性分析。结果UBA6-AS1/hsa-miR-346轴是最有潜力影响LGG中EphB4表达的上游ncRNA相关通路。同时,EphB4水平与LGG肿瘤免疫细胞浸润、免疫细胞生物学标志物、免疫检查点表达均呈显著正相关。结论ncRNA介导的EphB4上调与LGG的不良预后和肿瘤免疫浸润相关。

EphA2与B7-H3在结直肠癌组织中表达及其与临床病理和预后的相关性

目的探讨促红细胞生成素肝细胞A2(Erythropoietin-producing hepatocellular A2,EphA2)与免疫调节分子B7-H3在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达及其临床预后价值。方法收集行手术治疗的110例CRC患者的石蜡包埋组织,通过免疫组织化学染色检测CRC组织中EphA2与B7-H3的表达,分析两者与CRC临床病理参数的关系。此外,通过Kaplan-Meier生存曲线和Cox风险比例模型评估EphA2与B7-H3表达在CRC患者中的预后意义。结果在所分析的110例CRC样本中,65.5%(72/110)呈现EphA2高表达,而61.8%(68/110)有B7-H3高表达。EphA2高表达者肿瘤直径更大(P=0.043)、淋巴结转移(P=0.034)和淋巴血管侵犯较低表达者更为频繁(P=0.026)。此外,与低表达组相比,B7-H3高表达者具有更为进展的T分期(P=0.024)和更高的淋巴结转移率(P=0.045)。生存分析显示,EphA2高表达与低表达患者的5年总体生存(overall survival,OS)率分别为43.9%和66.1%(P=0.014)。B7-H3高表达组的5年OS率显著低于低表达组,分别为33.2%和66.7%(P=0.028)。单、多变量Cox回归分析表明EphA2高表达(HR=2.576,95%CI:1.040-6.384,P=0.041)、B7-H3高表达(HR=2.305,95%CI:1.051~5.057,P=0.037)是CRC患者的独立预后因素。结论EphA2和B7-H3高表达与侵袭性生物学特征及不良预后显著相关,二者或许是结直肠癌患者可靠的预后分子标志。

酪氨酸激酶受体家族EphA5在前置胎盘患者血清和胎盘组织中的表达及其临床诊断意义

目的探讨酪氨酸激酶受体家族中促红细胞生成素产生肝细胞受体(Eph)A5在前置胎盘患者血清和胎盘组织中的表达及其临床诊断意义。方法前置胎盘患者32例(前置胎盘组),其中完全型前置胎盘12例,不完全型11例,边缘型6例,低置胎盘3例;健康初产妇32例(对照组)。分别利用酶联免疫吸附试验和免疫印迹法测定两组产妇血清和胎盘组织中EphA5表达水平。结果前置胎盘组患者的血清EphA5含量及胎盘组织EphA5蛋白表达水平均明显低于正常对照组(P<0.05);而不同类型前置胎盘组患者血清EphA5含量、胎盘组织EphA5蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。前置胎盘组产妇胎盘组织EphA5蛋白表达水平与外周血EphA5含量呈正相关(P<0.05)。结论前置胎盘患者外周血EphA5含量水平降低,有可能成为前置胎盘早期诊断的重要指标。