应激大鼠下丘脑5一羟色胺1A受体活性与促肾上腺皮质激素释放因子表达的关系

目的：观察连续单一应激（SPS）前阻断大鼠5-羟色胺1A（5-HTlA）受体下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）表达的改变，初步探讨5-HTlA受体活性与CRF表达的关系。方法：将健康雄性Wistar大鼠分为对照组、模型组和阻断组，模型组和阻断组给予SPS。阻断组在给予SPS应激前使用5-HTlA受体阻断剂WAYl00635进行干预。采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应（Rrr_PcR）方法检测下丘脑CRF蛋白和mRNA的表达。结果：对照组、模型组和阻断组免疫阳性细胞吸光度分别为6．94±0．61、22．36±1．55和16．86±1．65，mRNA相对表达分别为0．72±0．07、2．08±0．06和1．16±0．1t，模型组高于对照组，阻断组低于模型组。结论：5-HTlA受体活性与下丘脑CRF表达有关。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1在人脑胶质瘤中表达及其临床意义

目的探讨促肾上腺皮质激素释放因子受体1(CRFR1)在人脑胶质瘤中表达及其临床意义。方法随机收集35例临床手术切除胶质瘤组织标本及培养人类胶质母细胞瘤株U87,进行CRFR1免疫组化染色,以5例泌乳素垂体腺瘤组织标本作为阳性对照。检测胶质瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达。同时,分析CRFR1表达与临床病理因素之间的相关性。结果 CRFR1着色于肿瘤细胞膜,在不同类型、级别的脑胶质瘤中均有着色,且随肿瘤病理级别增高而表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);胶质母细胞瘤中存在U87、CRFR1和PCNA高表达;CRFR1表达与患者KPS评分及PCNA表达有关。结论 CRFR1在胶质瘤细胞发生、增殖及侵袭性生长过程中可能扮演了重要角色,对胶质瘤恶性生物学特性的作用机制需要进一步探讨。

人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体EC1片段在原核系统中的可溶性表达

目的:研究人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体(hCRFR1)EC1区蛋白片段在原核表达系统中可溶性表达的影响因素。方法:以pcDNA3.1-hCRFR1全长质粒为模板,PCR扩增EC1区分别编码118和88个氨基酸残基(分别对应融合蛋白GST-EC1118和GST-EC188)的片段,将其插入pGEX-4T2载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导目标蛋白表达;采用GSTrap FF亲和纯化柱对目标蛋白进行纯化,并用Western印迹证实。结果:与GST-EC1118相比,GST-EC188可溶性表达增加,为下一步hCRFR1相关研究的开展奠定了基础。结论:hCRFR1的EC1区M1～N19及N108～V118两个片段影响该区域在原核系统中表达的可溶性,推测可能与富含疏水性氨基酸有关。

肠易激综合症患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体表达的研究

目的检测肠易激综合症(IBS)患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体(CRFR)1及CRFR2的表达,探讨其与IBS发病的关系,从而为靶向治疗IBS提供依据。方法分别采集15例腹泻型IBS(D-IBS)患者、15例便秘型IBS(C-IBS)患者和10例正常健康人结肠组织标本,采用Elivision(TM)PLUS/HRP免疫组化染色方法和Western blot测定CRFR1、CRFR2在各组结肠组织中的蛋白表达。结果实验结果显示,正常对照组CRFR1和CRFR2免疫组化染色以浅黄色为主,分布范围局限,平均光密度值分别为(0.254±0.099)和(0.201±0.030);D-IBS组中CRFR1以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.384±0.048),显著高于C-IBS组(0.144±0.077)及正常对照组(P<0.01);C-IBS组中CRFR2染色以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.322±0.022),显著高于D-IBS组(0.162±0.023)(P<0.01)及正常对照组(P<0.05)。Western blot结果显示,D-IBS组CRFR1蛋白表达明显高于C-IBS组和正常对照组;C-IBS组CRFR2表达高于D-IBS组和正常对照组。结论不同亚型IBS患者其CRFR表达的亚型亦不同,提示不同亚型IBS的发生可能与患者结肠组织中CRFR1、CRFR2的表达水平有关。

促肾上腺皮质激素释放因子受体2在溃疡性结肠炎中的表达

目的观察促肾上腺皮质激素释放因子受体2(CRFR2)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达情况,及其与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子-κB(NF-κB)p65和白细胞介素-6(IL-6)的关系,探讨其在UC中的作用。方法免疫组织化学法检测UC活动组30例、缓解组30例和30例正常对照组的结肠黏膜中CRFR2、ICAM-1、NF-κB p65的表达情况,ELISA方法检测各组血清中IL-6水平。结果 CRFR2在UC活动组肠黏膜组织中的表达明显高于缓解组和对照组(P<0.05),而在UC缓解组和对照组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。CRFR2在肠黏膜组织中的表达与NF-κB p65、ICAM-1的表达及血清中IL-6水平具有明显相关性(P<0.05)。结论活动期UC患者的CRFR2的表达明显升高,提示其在UC发病中可能起促炎作用。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1对阿尔茨海默病的影响（英文）

越来越多的证据表明,应激后导致的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)以及促肾上腺皮质激素释放因子受体-1(CRFR1)与阿尔茨海默病(AD)的发病和病情发展有着密切的联系。CRFR1主要功能为下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)应激后变化的重要调节因子,并且CRFR1广泛分布于与情绪和认知相关的大脑区域,鉴于此CRF/CRFR1信号通路的其他功能被提出,其中包括对AD神经病理调控。尤其新近发现CRFR1拮抗剂可阻断CRFR1下游信号对β淀粉样蛋白堆积和tau蛋白磷酸化的促进作用。因此,CRFR1拮抗剂对AD可能具有潜在的预防和治疗作用。本综述主要基于当前文献和我们的研究对CRF/CRFR1信号与AD之间的关系进行讨论。

促肾上腺皮质激素释放因子及其受体的研究

促肾上腺皮质激素释放因子(corticotrop in-releasing factor,CRF)是一种与应激密切相关的神经内分泌肽,通过与G蛋白偶联的2种受体结合发挥整合、协调内分泌、自主神经系统、免疫系统及行为学各方面对应激的反应。

促肾上腺皮质激素释放因子受体Ⅰ型拮抗剂研究进展

促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）主要通过CRF1受体参与调节下丘脑-垂体-肾上腺轴应激反应。研究表明CRF过度分泌可能是抑郁症等情感障碍的病因机制之一。CRF1受体作为新一代潜在抑郁药物靶点正逐渐成为一个充满希望的研究热点。

促肾上腺皮质素释放因子1在阿尔茨海默病发生和治疗中的作用

至今尚无较好的治疗方法能够减缓或阻止阿尔茨海默病(AD)发生发展。目前AD的治疗药物,如乙酰胆碱酯酶抑制剂和N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂美金刚,只能控制患者的部分行为学症状,对阻止疾病的发展并无多大帮助。多种因素(包括生物和社会心理因素)都被认为与AD发病有关[1,2]。越来越多的证据表明.

促肾上腺激素释放因子信号在肠易激综合征中的作用

肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)的主要病理生理学机制为胃肠动力学异常和内脏高敏感性,它的主要症状是长期反复上腹痛和肠道功能失调,且症状在焦虑或紧张状态下易加重或激发。越来越多的临床前和临床研究表明外周和中枢的促肾上腺激素释放因子(corticotropin-releasing factor,CRF)信号通过自主神经系统、肠道神经系统和免疫系统的活动可能促进IBS症状的发生及发展,现就紧张状态下肠道运动功能及内脏敏感性改变与CRF之间的关系作一概述。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1基因(rs4458044)多态性与新生儿持续性肺动脉高压的相关性研究

目的探讨促肾上腺皮质激素释放因子受体1(CRHR1)基因rs4458044位点多态性与新生儿持续性肺动脉高压(PPHN)的相关性.方法采用引物入侵分析技术检测2012年3月至2018年3月济宁医学院附属医院收治的临床确诊为PPHN的85例患儿和50例健康照组的血液样本的基因多态性,对2组研究对象的一般临床资料、临床指标和CRHR1基因(rs4458044)多态性采用t检验和x2检验进行统计分析.结果PPHN组和健康对照组在性别、胎龄、出生体质量和1 min Apgar评分上差异均无统计学意义(均P>0.05),而在辅助通气时间和最高氧合指数上差异均有统计学意义(均P<0.05).CRHR1基因(rs4458044)GG、CG和CC基因型在PPHN组和健康对照组的频率分别为2.35%、43.53%、54.12%和50.00%、38.00%、12.00%,CG/CC基因型在PPHN组的频率显著高于健康对照组(P<0.05),CG/CC基因型患儿出现PPHN的风险度高于GG基因型,以GG基因型为参照(CG基因型,OR=24.34,95%CI:5.20~113.87,P=0.00;CC基因型,OR=95.83,95%CI:17.99~510.49,P=0.00),携带C等位基因的新生儿辅助通气时间和最高氧合指数显著高于未携带C等位基因的新生儿(P<0.05).结论CRHR1基因(rs4458044)多态性与PPHN相关.

促肾上腺皮质激素释放因子1型受体拮抗剂:21-羟化酶缺陷症治疗新曙光

21-羟化酶缺陷症(21-OHD)是以皮质醇缺乏,伴或不伴醛固酮缺乏和高雄激素血症为主要特征的一类疾病,需终生补充外源性糖/盐皮质激素治疗。为控制高雄激素血症常需超常规剂量的外源性糖皮质激素,但效果仍不理想。促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)1型受体拮抗剂可直接阻断促肾上腺皮质激素生成,抑制肾上腺源性雄激素产生,减少糖皮质激素治疗剂量,从而降低不良反应发生率。现就21-OHD治疗及CRF1型受体拮抗剂研究现状作一综述。

CRF1受体调节及其信号通路与情感障碍的关系

情感障碍表现为焦虑，抑郁，双向情感障碍等。严重影响了人们的日常生活和工作^[1]。情感障碍疾病的发生与应激有着密切的关系，一般人为过度应激后产生焦虑，抑郁等行为，而促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）作为应激反应中的关键调节因子，在情感障碍疾病中起到重要作用^[2]。CRFl受体特异拈抗剂在鼠类和恒河猴模型上表现出抗焦虑、抗抑郁样行为的作用^[3]。小鼠脑室内注射CRF会使小鼠活动行为下降，产生焦虑，抑郁行为^[4]。本研究旨在对CRFl受体调节及其信号通路与情感障碍的机制做一综述。

CRF2受体拮抗剂Astressin2B减轻葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠实验性结肠炎

炎性肠病的研究多集中在遗传、免疫及微生物等方面,近年发现神经肽也参与该病发生,其中促肾上腺皮质激素释放因子（corticotrophin-releasing factor,CRF）不仅在脑组织中存在,周围组织也有表达,后者与炎性反应发生有关[1],溃疡性结肠炎肠道炎性组织中CRF的表达增高,CRF基因敲除小鼠或CRF2受体缺陷小鼠肠道炎性反应减轻[2],提示周围型CRF信号系统活化与肠道炎性的发生有关,Astressin2B是一选择性的CRF2受体拮抗剂，因其不通过血一脑脊液屏障，可以保证其对肠黏膜的局部作用，而不影响中枢组织的CRF2受体，本实验观察Astressin2B对肠道炎性反应改善作用及其可能机制。

CRF、UCN1和CRFR1在肠易激综合征大鼠结肠中变化的研究

目的探讨CRF、UCN1、CRFR1在IBS大鼠结肠中的表达变化及其在肠易激综合征发病机制中的作用。方法选用健康雄性成年Wistar大鼠,分为对照组、急性应激组(急性束缚1h)、慢性应激组(21d不可预知轻度应激)、慢急性联合应激组(在慢性应激的基础上给予急性束缚应激)。观测不同应激状态下大鼠的体重变化、排便颗粒、糖水消耗、敞箱实验的表现,对模型进行再评价。采用RT-PCR方法检测各组大鼠结肠中CRF、UCN1、CRFR1的表达水平的变化。结果各指标显示该造模的大鼠符合IBS的内脏敏感机制,可用于IBS发病机制的研究,经RT-PCR方法检测,CRF、UCN1、CRFR1在各应激组中的表达较对照组均升高(P<0.01)。结论 CRF、UCN1、CRFR1与应激引起的功能性肠道疾病中的结肠功能改变相关。

健脾化湿颗粒对D-IBS模型大鼠脑-肠轴中CRF和CRFR1的影响

目的:从结肠、海马及下丘脑中促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin releasing factor,CRF)和CRF受体1(CRF receptor 1,CRFR1)角度探讨健脾化湿颗粒改善腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)模型大鼠结肠运动和内脏敏感性的作用机制.方法:采用番泻叶灌胃结合束缚应激法建立D-I B S大鼠模型,应用健脾化湿颗粒进行干预,采用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠结肠中CRF含量,采用免疫组织化学法检测结肠中CRFR1及海马、下丘脑中CRF,CRFR1阳性表达,采用RT-PCR法检测结肠、海马中CRF m RNA和CRFR1 m RNA的表达水平.结果:与正常组相比,模型组结肠中CRF含量(67.1±3.8 vs 36.0±3.0),海马、下丘脑中CRF阳性表达(0.23±0.02 vs 0.09±0.01,0.17±0.02 v s 0.09±0.01)明显升高(P<0.01);结肠、海马、下丘脑中C R F R1阳性表达(0.17±0.01 vs 0.03±0.01,0.20±0.02 vs 0.09±0.01,0.19±0.02 vs 0.07±0.01)明显升高(P<0.01);结肠、海马中C R F m RNA和CRFR1 m RNA的表达(结肠:0.89±0.04 vs 0.09±0.01,1.09±0.09 vs 0.21±0.04;海马:0.56±0.01 vs 0.15±0.05,1.26±0.14 vs 0.23±0.06)显著升高(P<0.01).与模型组相比,各治疗组结肠、海马中C R F(51.0±3.4,54.6±4.1,45.1±4.7,43.3±3.9 vs 67.1±3.8;0.18±0.02,0.19±0.02,0.15±0.02,0.11±0.01 vs 0.23±0.02)显著下降(P<0.01),阳性对照组、中、高剂量组下丘脑中CRF(0.15±0.02,0.13±0.01,0.12±0.01 vs 0.17±0.02)下降显著(P<0.05,P<0.0 1);阳性对照组、中、高剂量组结肠、海马、下丘脑中C R F R1表达(结肠:0.10±0.01,0.08±0.01,0.05±0.01 vs 0.17±0.01;海马:0.16±0.01,0.14±0.02,0.13±0.01 vs 0.20±0.02;下丘脑:0.15±0.02,0.13±0.01,0.11±0.01 vs 0.19±0.02)下降显著(P<0.05,P<0.01);结肠中CRF m RNA表达(0.63±0.04,0.76±0.06,0.32±0.06,0.13±0.03 v s 0.89±0.04)及中、高剂量组海马中CRF m RNA表达(0.76±0.11,0.67±0.10 v s 1.09±0.09)显著降低(P<0.01);阳性对照组、中、高剂量组结肠中C R F R1m RNA表达(0.47±0.03,0.40±0.06,0.24±0.06 vs 0.56±0.01)及中、高剂量组海马中CRFR1 m RNA表达(0.62±0.06,0.60±0.07vs 1.26±0.14)显著降低(P<0.05,P<0.01).结论:健脾化湿颗粒可能通过下调结肠、海马及下丘脑中CRF、CRFR1表达来改善D-IBS模型大鼠结肠运动和内脏敏感性.

CRF及其受体在DSS诱导的实验性结肠炎中的表达

目的研究CRF及其受体在实验性DSS结肠炎中的表达,探讨其在肠道炎症形成中的可能作用。方法将6~8周的雌性BALB/c小鼠分为正常对照组和实验组,建立DSS诱导的实验性结肠炎小鼠模型,小鼠进行DAI和组织病理学评分。免疫荧光检测小鼠肠黏膜组织中CRF1受体和CRF2受体的表达。Western blot法检测小鼠肠黏膜组织中CRF、CRF1和CRF2受体的表达。结果根据肠黏膜DAI评分和组织学评分提示DSS组肠黏膜组织炎症明显,造模成功。免疫荧光检测显示CRF1受体在DSS组和正常肠黏膜组织中表达差异无统计学意义(P>0.05),而DSS组小鼠肠黏膜组织中CRF2受体表达明显高于对照组(P<0.05)且主要分布在肠上皮细胞和固有层单个核细胞中。Western blot法检测显示CRF1受体在DSS组和正常肠黏膜组织中表达差异无统计学意义(P>0.05),而DSS组小鼠肠黏膜组织中CRF和CRF2受体表达明显高于对照组(P<0.05)。结论DSS结肠炎模型周围肠黏膜炎症组织中存在着CRF和CRF2受体的表达增高,而这种增高可能与肠道炎症发生有关。

稳定表达CRFR1的HEK293细胞株建立与功能鉴定

目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术、RT-PCR法、免疫荧光法证实稳定表达CRFR1细胞株构建成功。并用CRF刺激稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,绘制CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的量效曲线。结果 Western blot、RT-PCR、免疫荧光结果表明,CRFR1受体在HEK293细胞系中成功表达。cAMP释放量效实验显示,CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的EC50为(5.64±0.05)×10-10mol·L-1。结论成功建立了稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并且cAMP含量评价体系构建成功,为研究CRFR1的生物学功能及筛选CRFR1受体靶向药物奠定了基础。

CRF及其受体与焦虑样行为的关系

应激是机体对伤害性环境改变作出的反应,常引起动物产生焦虑样行为.研究表明,应激、焦虑与促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其受体有关.本文综述了CRF及其受体在应激和焦虑样行为反应中的作用的最新研究进展,为克服焦虑情绪及其由此产生的心理疾病提供理论依据.