半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠抑郁状态及促肾上腺皮质激素释放因子相关通路的影响

目的:观察半夏泻心汤对功能性消化不良(FD)大鼠抑郁样行为、下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其受体CRF-R1、CRF-R2的影响。方法:48只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、半夏泻心汤低、中、高剂量组,共六组,每组各8只。空白组正常饲养,其余五组采用不规则喂养+夹尾激惹刺激法造模,造模成功后半夏泻心汤低、中、高各剂量组分别给予0.62、1.24、2.48 g/ml剂量灌胃,氟西汀组给予2 mg/kg氟西汀,空白组及模型组均给予同等容积的蒸馏水,各组连续灌胃14 d。干预结束后采用糖水偏好实验和旷场实验测试各组抑郁样行为;HE染色观察大鼠胃窦组织基本形态;RT-qPCR和Western blot检测大鼠下丘脑中CRF、CRF-R1和CRF-R2 mRNA和蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠体重、糖水偏好度、旷场实验移动总距离和直立次数均明显下降(P<0.05);下丘脑中CRF、CRF-R1 mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01),CRF-R2 mRNA和蛋白的表达均明显降低(P<0.01)。与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组大鼠的体重、糖水偏好度、旷场实验移动总距离和直立次数均明显增加(P<0.05);半夏泻心汤各剂量组FD大鼠下丘脑中CRF、CRF-R1 mRNA的表达量均明显降低(P<0.01),CRF-R2 mRNA的表达明显升高;半夏泻心汤高剂量组FD大鼠下丘脑中CRF蛋白表达均明显降低(P<0.01),半夏泻心汤各剂量组FD大鼠下丘脑中CRF-R1蛋白表达明显降低(P<0.01),CRF-R2蛋白表达升高(P<0.05)。结论:半夏泻心汤可通过调控CRF通路,恢复CRF-R1和CRF-R2的平衡状态,发挥抗抑郁的作用。

妊娠期小鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素水平变化研究

为了探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在小鼠妊娠期间血浆中的浓度变化及其与小鼠妊娠持续时间的关系,选取自然交配的见栓雌鼠,自见栓当天开始,通过面颊采血分离、收集血浆,采用酶联免疫吸附试验测定CRH含量。通过对孕鼠妊娠期间、分娩当天及分娩后24 h血浆CRH水平的分析,发现正常妊娠孕鼠血浆中CRH水平在妊娠早期即升高,妊娠13.5 d起血浆CRH水平[(21.6±3.90)pg/mL]呈进行性升高,妊娠晚期升高显著,至分娩时达最高水平,分娩后24 h CRH基本恢复至正常值;早产孕鼠13.5 d时血浆含量高于正常妊娠的小鼠,而难产孕鼠的CRH则明显低于正常妊娠小鼠;孕鼠13.5 d血浆中CRH的含量与妊娠持续时间呈负相关。说明小鼠血浆中CRH水平可作为判定妊娠持续时间的一个标志,用于预测孕鼠的分娩时间,为小鼠的剖宫产生物净化提供理论基础。

促肾上腺皮质激素释放激素参与痛觉与痒觉信息调控的机制

促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激的始动因子。以往的观察发现,急性应激可镇痛、抑痒,慢性应激则常常促痛、促痒,而这其中的机制还未被完全阐明。本文将通过文献回顾,分析CRH参与痛觉与痒觉信息调控的机制,为后续的研究提供思路和借鉴。

慢性应激通过增加齿状回的促肾上腺皮质激素释放因子减轻阿尔茨海默病样大鼠空间学习记忆损伤

目的:观察慢性应激(CS)对阿尔茨海默病(AD)样学习记忆损伤模型大鼠海马齿状回(DG)的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其1型受体(CRFR1)的影响,并探讨CRFR1在CS引起的AD样模型大鼠空间学习和记忆能力改变中的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照(CON)组、AD模型(AD)组和AD给予CS(AD+CS)组,每组7只。用侧脑室单次注射链脲佐菌素联合长期腹腔注射D-半乳糖(每天1次,共6周)的方法制备AD样学习记忆损伤模型大鼠;AD+CS组大鼠在D-半乳糖注射的后4周,每天随机给予一种应激原刺激。Morris水迷宫评估大鼠的空间学习和记忆能力;免疫组织化学染色观察海马Aβ_(1-42)的表达;ELISA检测DG区CRF的水平;Western blot法观察DG区CRFR1表达。之后,AD大鼠DG区注射CRFR1阻断剂R121919,观察其对CS条件下的AD样模型大鼠空间学习和记忆能力的影响。结果:与CON组比较,AD样模型大鼠的空间学习和记忆能力显著下降,且海马区Aβ_(1-42)沉积增多;而给予CS可缓解AD样模型大鼠的空间学习记忆障碍,减少海马Aβ_(1-42)沉积。与CON组比较,AD组大鼠DG区CRF水平和CRFR1表达均显著降低(P<0.05),而AD+CS大鼠DG区的CRF水平和CRFR1表达均显著高于AD组(P<0.05)。大鼠DG区微量注射R121919显著损伤CS条件下AD大鼠的空间学习和记忆能力(P<0.05)。结论:CS增加AD样模型大鼠DG区CRF水平,后者通过激活CRFR1减轻AD样模型大鼠的空间学习和记忆功能损伤。

促肾上腺皮质激素释放因子及相关肽对动物采食调控的研究进展

促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)是一种由下丘脑分泌的神经肽。早期,CRF被认为是介导应激反应的标志性脑肽,当其被注入啮齿动物的大脑时会引起应激反应。在急性应激情况下,动物大脑中的CRF信号通路被激活,进而影响其采食行为。由此可见,CRF及相关肽可能具有调控动物采食的作用。CRF及相关肽分布广泛,既存在于中枢,也存在于胃肠道等外周组织器官中。本文主要综述了中枢和外周CRF及相关肽调控动物采食的研究进展,为进一步研究和改善应激动物采食行为提供参考。

慢性失眠障碍与促肾上腺皮质激素释放激素和皮质醇的相关性研究

目的:探讨成年人慢性失眠障碍(CID)与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和皮质醇(CORT)的相关性及其临床意义。方法:选取2021年8月至2022年2月云南省精神病医院收治的慢性失眠障碍患者50例作为观察组,同时期健康人群50例作为对照组,测定并比较2组间CRH、CORT、汉密尔顿抑郁量表-17(HAMD-17)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)的差异,同时对50例观察组进行多导睡眠监测(PSG),比较观察组治疗前后PSG的变化,从而分析慢性失眠障碍与CRH、CORT的相关性。结果:观察组治疗前与对照组CRH、CORT水平及量表评分比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗前与治疗8周末CRH、CORT比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗前与治疗8周末PSG睡眠参数比较,总睡眠时间、睡眠效率、睡眠潜伏期、快速眼动(REM)时间、N1时间、N3时间及觉醒时间比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗前CRH、CORT与PSG睡眠参数中的部分指标有相关性。结论:CID患者CRH、CORT水平高于健康人群,失眠症状改善后,CRH及CORT接近正常水平。CID失眠症状的严重程度与CRH和CORT的增高有明显相关性。因此,下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的外周血CRH和CORT水平或许可以作为反映失眠症状严重程度的生物学指标。

解郁1号对抑郁大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放因子和皮质醇含量的影响

目的探讨以调理脾胃法组成的中药复方解郁1号对抑郁大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放因子、皮质醇含量的影响。方法SD大鼠40只,按随机表随机分为正常组、模型组、阿米替林组、解郁1号12,6 g/(kg.d)剂量组,每组各8只。除正常组外,各组接受21 d长期慢性刺激,在造模同时即开始给药。各组动物末次造模结束后,采用旷场实验进行行为学评分;采用放射免疫法测定促肾上腺皮质激素释放因子、皮质醇含量。结果实验大鼠38只进入结果分析。①各组大鼠血浆皮质醇含量的变化:模型组与正常组比较,血浆皮质醇水平明显升高(P<0.01)。中药高、低剂量组、西药组,与模型组相比,明显降低,具有显著差异性(P<0.01),但三组之间相比较,均没有统计学意义(P(0.05)。②各组大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放因子含量的变化:模型组大鼠血浆的促肾上腺皮质激素释放因子含量高于正常组(P<0.01);与模型组比较,中、西药治疗组促肾上腺皮质激素释放因子含量多明显降低(P<0.01);中、西药治疗组之间促肾上腺皮质激素释放因子含量比较未见显著性变化(P(0.05)。结论解郁1号具有抗抑郁作用,其作用机制可能通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA),来调节血浆内促肾上腺皮质激素释放因子、皮质醇水平,达到抗抑郁目的。

姜黄素对慢性应激大鼠不同脑区促肾上腺皮质激素释放因子表达的影响

目的为探讨姜黄素可能的抗抑郁作用机制,观察姜黄素对慢性应激大鼠不同脑区促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)表达的影响。方法采用不同应激方式交替、持续应激20d,制成大鼠慢性应激损伤模型,用开野实验、逆转录聚合酶链反应测定大鼠给姜黄素(2.5,5和10mg·kg-1,po,每日1次,共21d)前后行为的改变以及下丘脑、海马及额叶皮质中CRFmRNA的表达。结果慢性应激模型组大鼠在开野实验中5min内穿越格数、探究次数均显著减少;给予姜黄素后,应激大鼠穿越格数、探究次数均较应激对照组不同程度的增加。慢性应激模型组大鼠下丘脑、海马和额叶皮质中CRFmRNA表达均较正常对照组明显升高;姜黄素可以明显逆转上述脑区CRFmRNA表达的改变。结论姜黄素对慢性应激大鼠的活动性有明显的改善作用,这一作用很可能与逆转慢性应激大鼠不同脑区的CRFmRNA的异常表达有关。

水杨酸钠致耳鸣大鼠脑海马区促肾上腺皮质激素释放因子的表达

目的观察水杨酸纳致耳鸣大鼠海马区促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin-releasing factor,CRF)的表达,探讨其参与水杨酸钠致耳鸣的可能机制。方法将ABR反应阈<30dB SPL的30只健康Wistar大鼠随机分为A、B、C三组,每组10只。A组注射10%水杨酸钠溶液350mg.kg-1.d-1,共注射21天,B组注射10%水杨酸钠溶液350mg.kg-1.d-1,共注射14天,C组(对照组)腹腔注射等量生理盐水14天。给药前采用改良的饮水抑制法对各组大鼠进行条件反射训练,条件反射消退期开始注射水杨酸钠并检测各组大鼠饮水抑制率(R值);分别于给药前两天、首次给药后2h、给药结束后当天检测各组大鼠ABR反应阈,然后将大鼠处死并断头取脑,剥离海马区,采用Western blot方法检测CRF在各组大鼠海马区的表达。结果条件反射消退期1～3天A、B两组大鼠R值大于C组(P<0.05),证明耳鸣大鼠模型建立成功;首次给药后2h及给药结束后A、B两组ABR反应阈均较给药前提高了约30dB(P<0.05),但A、B两组间ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05);大鼠脑海马区CRF表达量A组>B组>C组(P<0.05)。结论水杨酸钠注射致耳鸣大鼠的海马区情绪应激相关蛋白CRF表达增强,且随注射时间延长其表达量增加,提示CRF表达升高可能是边缘系统参与耳鸣的重要机制之一。

镉的免疫毒性与促肾上腺皮质激素释放因子的关系

对 Cd Cl2 和 Cd Cl2 + α- h CRF(α螺旋促肾上腺皮质激素释放因子 )分别染毒的 SD大鼠 ,用 [3H-Td R]掺入法测定大鼠脾 T、B淋巴细胞增殖转化功能 ,垂体前叶细胞培养法测定中枢下丘脑和外周血浆中的 CRF含量。结果表明单独染镉组有丝分裂原诱导的鼠脾 T、B淋巴细胞增殖转化均受到明显抑制 ,具有剂量 -效应关系 (P<0 .0 5 ) ;动物下丘脑 CRF含量伴随着染镉剂量升高 (P<0 .0 5 ) ;外周血浆 CRF含量各组间差异无显著性 (P>0 .0 5 )。当使用拮抗剂 α- h CRF后 ,在含镉染毒各剂量组间鼠脾 T、B细胞功能抑制差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;下丘脑 CRF含量在各含镉联合染毒组间差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,但均较对照组高 (P<0 .0 5 ) ;外周血浆 CRF水平有升高趋势。结果提示单独染镉可引起下丘脑 CRF含量升高和免疫功能抑制 ,联合使用 α- h CRF后则能部分改善镉对大鼠脾细胞的免疫功能抑制。镉对大鼠脾淋巴细胞免疫毒作用过程中存在中枢

束缚应激对局灶性脑缺血大鼠行为及脑内促肾上腺皮质激素释放因子表达的影响

目的观察束缚应激对局灶性脑缺血大鼠的运动行为及脑内促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)表达的影响。方法雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组和缺血组,每组20只,采用线栓法制作脑缺血再灌注(tMCAO)模型。术后第28天再将每组大鼠随机分为单纯假手术组、假手术+应激组、单纯tMCAO组和tMCAO+应激组。从手术处理后第5周开始行2周束缚应激,应激结束后行抑郁行为测试。用免疫组化方法检测大鼠脑内CRF的表达情况,观察束缚应激对局灶性脑缺血大鼠脑内CRF表达的影响。结果①束缚应激使局灶性脑缺血大鼠的水平运动和垂直运动得分均显著减少,蔗糖水偏好比明显降低,与单纯假手术组、假手术+应激组及单纯tMCAO组相比,差异均有显著性(P<0.01);②tMCAO+应激组大鼠脑内下丘脑室旁核、杏仁核中央亚核、终纹床核中CRF阳性神经元数量与其他组比较明显增多,差异有显著性(P<0.01)。结论施加束缚应激后,局灶性脑缺血大鼠出现明显的抑郁行为,脑内参与调节情感的核团内CRF蛋白含量增加,表达反应性增强,考虑可能是卒中后抑郁的生物学机制之一。

肠易激综合症患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体表达的研究

目的检测肠易激综合症(IBS)患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体(CRFR)1及CRFR2的表达,探讨其与IBS发病的关系,从而为靶向治疗IBS提供依据。方法分别采集15例腹泻型IBS(D-IBS)患者、15例便秘型IBS(C-IBS)患者和10例正常健康人结肠组织标本,采用Elivision(TM)PLUS/HRP免疫组化染色方法和Western blot测定CRFR1、CRFR2在各组结肠组织中的蛋白表达。结果实验结果显示,正常对照组CRFR1和CRFR2免疫组化染色以浅黄色为主,分布范围局限,平均光密度值分别为(0.254±0.099)和(0.201±0.030);D-IBS组中CRFR1以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.384±0.048),显著高于C-IBS组(0.144±0.077)及正常对照组(P<0.01);C-IBS组中CRFR2染色以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.322±0.022),显著高于D-IBS组(0.162±0.023)(P<0.01)及正常对照组(P<0.05)。Western blot结果显示,D-IBS组CRFR1蛋白表达明显高于C-IBS组和正常对照组;C-IBS组CRFR2表达高于D-IBS组和正常对照组。结论不同亚型IBS患者其CRFR表达的亚型亦不同,提示不同亚型IBS的发生可能与患者结肠组织中CRFR1、CRFR2的表达水平有关。

促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体:抗抑郁药物的新靶标

抑郁和焦虑患者常伴随应激激素调节失常,这与下丘脑神经肽促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和精氨酸加压素分泌过多密切相关。CRF主要通过激动促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型(CRF1)受体诱导抑郁或焦虑样症状,众多研究表明CRF1受体是新型抗抑郁药的潜在靶标。目前已研发出很多基于此靶标的非肽类小分子化合物,但只有一部分进入临床试验,包括NBI-30775/R121919和NBI-34041等。值得注意的是,此类化合物显效与动物的应激水平和自身焦虑程度有关,即CRF1受体拮抗剂可在不影响下丘脑-垂体-肾上腺轴基础活性情况下对抗CRF介导的病理性应激反应,从而提示其副作用可能较低。总之,小分子CRF1受体拮抗剂可能成为治疗应激相关精神疾病的新方法。本文重点综述CRF1受体作为新靶标在抑郁症治疗中的潜在应用。

促肾上腺皮质激素释放因子受体2在溃疡性结肠炎中的表达

目的观察促肾上腺皮质激素释放因子受体2(CRFR2)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达情况,及其与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子-κB(NF-κB)p65和白细胞介素-6(IL-6)的关系,探讨其在UC中的作用。方法免疫组织化学法检测UC活动组30例、缓解组30例和30例正常对照组的结肠黏膜中CRFR2、ICAM-1、NF-κB p65的表达情况,ELISA方法检测各组血清中IL-6水平。结果 CRFR2在UC活动组肠黏膜组织中的表达明显高于缓解组和对照组(P<0.05),而在UC缓解组和对照组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。CRFR2在肠黏膜组织中的表达与NF-κB p65、ICAM-1的表达及血清中IL-6水平具有明显相关性(P<0.05)。结论活动期UC患者的CRFR2的表达明显升高,提示其在UC发病中可能起促炎作用。

噪声暴露下大鼠行为学和海马促肾上腺皮质激素释放因子蛋白表达的改变

目的观察噪声暴露下大鼠行为学的改变,探讨噪声对生物体情绪行为和听力的负性影响及其可能的发生机制。方法选取行为学指标和ABR反应阈接近的健康大鼠24只,随机分为3组,每组8只。对照组(A组):正常喂养;噪声组(B组):每天固定时间噪声暴露4 h,持续28 d;氟西汀组(C组):噪声暴露的条件和时间与噪声组相同,每天噪声暴露后即腹腔注射剂量为10 mg/kg的氟西汀,持续28 d,噪声暴露前1 d、第7、14、28 d观察大鼠的旷场行为并检测ABR反应阈,实验前后记录大鼠的糖水偏爱百分比,最后断头取脑,剥离大鼠海马,Western-blot法测定各组大鼠海马CRF表达。结果第7、14、28 d,与对照组比较,其它组大鼠的旷场行为表现显著改变,差异有统计学意义(P<0.01);氟西汀组大鼠与噪声组比较,旷场行为差异均有统计学意义(P<0.01)。噪声暴露28d后,与对照组相较,噪声组和氟西汀组糖水偏爱百分比明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与噪声组比较,氟西汀组大鼠糖水偏爱明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。随着噪声暴露时间的延长,其ABR反应阈升高,差异有明显统计学意义(P<0.01)。氟西汀组海马CRF的表达较正常组增加,但较噪声组表达降低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论长期的噪声暴露可使大鼠产生焦虑抑郁样行为,抗抑郁剂能改善这些行为的改变。海马CRF表达的增加可能参与噪声应激所致的大鼠行为学变化。

促肾上腺皮质激素释放因子功能及其与帕金森病关系的研究进展

帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种常见的慢性神经系统退行性病变。临床上以静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态障碍等运动症状为主要表现[1]。主要病理改变是中脑黑质纹状体神经元退化、黑质致密部的多巴胺能神经元缺失和死亡以及残存的神经元胞质内出现嗜酸性包涵体,即路易小体[2,3]。

细胞角蛋白8在促肾上腺皮质激素释放因子诱导的肠上皮通透性改变中的作用

目的:探讨细胞角蛋白8(CK8)在促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)诱导的肠上皮细胞间通透性改变中的作用及机制。方法:培养人结肠腺癌HT29细胞株建立肠上皮屏障模型,采用免疫荧光法检测HT29细胞表面CRF受体1(CRFR1)及CRFR2的表达情况,并将其分为对照组和CRF组,CRF组以100 nmol/L CRF处理细胞72 h。采用Transwell小室检测2组细胞FITC标记的dextran透过率,透射电镜观察2组细胞紧密连接结构变化,并用Western blot法检测2组细胞CK8及紧密连接相关蛋白(ZO-1和occludin)的表达,免疫荧光检测CK8表达微结构变化,ELISA检测加药5 min、10 min、30 min、1 h及2 h后蛋白激酶C(PKC)活性。采用sh-CK8慢病毒构建CK8低表达HT29细胞,检测给予CRF处理后相应蛋白表达量、FITC标记的dextran透过率及PKC活性的改变。结果:HT29细胞表面存在CRFR1及CRFR2受体,而CRF处理后,FITC标记的dextran透过率高于对照组(P<0.05),透射电镜观察可见对照组细胞紧密连接通道关闭, CRF处理后紧密连接开放。同时,CRF可引起HT29细胞CK8的荧光强度增高,呈颗粒样浓聚,其蛋白表达明显增加(P<0.05),而occludin和ZO-1表达下调(P<0.05)。此外,CRF处理1 h时,PKC的活性下降(P<0.05)。sh-CK8慢病毒转染HT29细胞后成功建立低表达CK8细胞株,与阴性对照组相比,CRF刺激后肠上皮细胞通透性并未明显降低, occludin蛋白表达仍下调(P<0.05),而ZO-1则无明显改变。同时,与阴性对照组相比,CK8低表达后,CRF刺激并未引起PKC活性的下降。结论:CK8可能通过抑制PKC活性参与CRF诱导的肠上皮通透性的增加,同时可能存在其它信号通路共同参与。

促肾上腺皮质激素释放因子与肠易激综合征

肠易激综合征(IBS)是一种个体特异性、多病因的异质性疾病,其发病和患者的精神状态、社会环境、生活应激等多种心理社会因素密切相关。促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)是一种介导下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴对应激反应的关键调节肽,参与脑-肠轴互动,通过影响胃肠道动力、内脏高敏感和肠道感染等参与IBS的发病。

促肾上腺皮质激素释放因子在炎症性肠病中的研究进展

近年来,越来越多的证据表明应激可干扰神经系统,进而通过脑-肠轴的交互作用引起免疫紊乱,在炎症性肠病(IBD)的发病中起重要作用。促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)是一种与应激反应密切相关的神经内分泌肽,其家族成员通过与受体结合,调节机体在应激状态下的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能,在协调应激相关内分泌、自主神经、免疫、行为等反应中起重要作用。在慢性肠道炎症中,脑和肠黏膜中的CRF系统成员被激活以调节肠道局部和中枢免疫反应。本文对CRF在IBD中作用的研究进展作一综述。