半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠抑郁状态及促肾上腺皮质激素释放因子相关通路的影响

目的:观察半夏泻心汤对功能性消化不良(FD)大鼠抑郁样行为、下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其受体CRF-R1、CRF-R2的影响。方法:48只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、半夏泻心汤低、中、高剂量组,共六组,每组各8只。空白组正常饲养,其余五组采用不规则喂养+夹尾激惹刺激法造模,造模成功后半夏泻心汤低、中、高各剂量组分别给予0.62、1.24、2.48 g/ml剂量灌胃,氟西汀组给予2 mg/kg氟西汀,空白组及模型组均给予同等容积的蒸馏水,各组连续灌胃14 d。干预结束后采用糖水偏好实验和旷场实验测试各组抑郁样行为;HE染色观察大鼠胃窦组织基本形态;RT-qPCR和Western blot检测大鼠下丘脑中CRF、CRF-R1和CRF-R2 mRNA和蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠体重、糖水偏好度、旷场实验移动总距离和直立次数均明显下降(P<0.05);下丘脑中CRF、CRF-R1 mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01),CRF-R2 mRNA和蛋白的表达均明显降低(P<0.01)。与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组大鼠的体重、糖水偏好度、旷场实验移动总距离和直立次数均明显增加(P<0.05);半夏泻心汤各剂量组FD大鼠下丘脑中CRF、CRF-R1 mRNA的表达量均明显降低(P<0.01),CRF-R2 mRNA的表达明显升高;半夏泻心汤高剂量组FD大鼠下丘脑中CRF蛋白表达均明显降低(P<0.01),半夏泻心汤各剂量组FD大鼠下丘脑中CRF-R1蛋白表达明显降低(P<0.01),CRF-R2蛋白表达升高(P<0.05)。结论:半夏泻心汤可通过调控CRF通路,恢复CRF-R1和CRF-R2的平衡状态,发挥抗抑郁的作用。

慢性应激通过增加齿状回的促肾上腺皮质激素释放因子减轻阿尔茨海默病样大鼠空间学习记忆损伤

目的:观察慢性应激(CS)对阿尔茨海默病(AD)样学习记忆损伤模型大鼠海马齿状回(DG)的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其1型受体(CRFR1)的影响,并探讨CRFR1在CS引起的AD样模型大鼠空间学习和记忆能力改变中的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照(CON)组、AD模型(AD)组和AD给予CS(AD+CS)组,每组7只。用侧脑室单次注射链脲佐菌素联合长期腹腔注射D-半乳糖(每天1次,共6周)的方法制备AD样学习记忆损伤模型大鼠;AD+CS组大鼠在D-半乳糖注射的后4周,每天随机给予一种应激原刺激。Morris水迷宫评估大鼠的空间学习和记忆能力;免疫组织化学染色观察海马Aβ_(1-42)的表达;ELISA检测DG区CRF的水平;Western blot法观察DG区CRFR1表达。之后,AD大鼠DG区注射CRFR1阻断剂R121919,观察其对CS条件下的AD样模型大鼠空间学习和记忆能力的影响。结果:与CON组比较,AD样模型大鼠的空间学习和记忆能力显著下降,且海马区Aβ_(1-42)沉积增多;而给予CS可缓解AD样模型大鼠的空间学习记忆障碍,减少海马Aβ_(1-42)沉积。与CON组比较,AD组大鼠DG区CRF水平和CRFR1表达均显著降低(P<0.05),而AD+CS大鼠DG区的CRF水平和CRFR1表达均显著高于AD组(P<0.05)。大鼠DG区微量注射R121919显著损伤CS条件下AD大鼠的空间学习和记忆能力(P<0.05)。结论:CS增加AD样模型大鼠DG区CRF水平,后者通过激活CRFR1减轻AD样模型大鼠的空间学习和记忆功能损伤。

肠易激综合症患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体表达的研究

目的检测肠易激综合症(IBS)患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体(CRFR)1及CRFR2的表达,探讨其与IBS发病的关系,从而为靶向治疗IBS提供依据。方法分别采集15例腹泻型IBS(D-IBS)患者、15例便秘型IBS(C-IBS)患者和10例正常健康人结肠组织标本,采用Elivision(TM)PLUS/HRP免疫组化染色方法和Western blot测定CRFR1、CRFR2在各组结肠组织中的蛋白表达。结果实验结果显示,正常对照组CRFR1和CRFR2免疫组化染色以浅黄色为主,分布范围局限,平均光密度值分别为(0.254±0.099)和(0.201±0.030);D-IBS组中CRFR1以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.384±0.048),显著高于C-IBS组(0.144±0.077)及正常对照组(P<0.01);C-IBS组中CRFR2染色以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.322±0.022),显著高于D-IBS组(0.162±0.023)(P<0.01)及正常对照组(P<0.05)。Western blot结果显示,D-IBS组CRFR1蛋白表达明显高于C-IBS组和正常对照组;C-IBS组CRFR2表达高于D-IBS组和正常对照组。结论不同亚型IBS患者其CRFR表达的亚型亦不同,提示不同亚型IBS的发生可能与患者结肠组织中CRFR1、CRFR2的表达水平有关。

促肾上腺皮质激素释放因子受体2在溃疡性结肠炎中的表达

目的观察促肾上腺皮质激素释放因子受体2(CRFR2)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达情况,及其与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子-κB(NF-κB)p65和白细胞介素-6(IL-6)的关系,探讨其在UC中的作用。方法免疫组织化学法检测UC活动组30例、缓解组30例和30例正常对照组的结肠黏膜中CRFR2、ICAM-1、NF-κB p65的表达情况,ELISA方法检测各组血清中IL-6水平。结果 CRFR2在UC活动组肠黏膜组织中的表达明显高于缓解组和对照组(P<0.05),而在UC缓解组和对照组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。CRFR2在肠黏膜组织中的表达与NF-κB p65、ICAM-1的表达及血清中IL-6水平具有明显相关性(P<0.05)。结论活动期UC患者的CRFR2的表达明显升高,提示其在UC发病中可能起促炎作用。

促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体:抗抑郁药物的新靶标

抑郁和焦虑患者常伴随应激激素调节失常,这与下丘脑神经肽促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和精氨酸加压素分泌过多密切相关。CRF主要通过激动促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型(CRF1)受体诱导抑郁或焦虑样症状,众多研究表明CRF1受体是新型抗抑郁药的潜在靶标。目前已研发出很多基于此靶标的非肽类小分子化合物,但只有一部分进入临床试验,包括NBI-30775/R121919和NBI-34041等。值得注意的是,此类化合物显效与动物的应激水平和自身焦虑程度有关,即CRF1受体拮抗剂可在不影响下丘脑-垂体-肾上腺轴基础活性情况下对抗CRF介导的病理性应激反应,从而提示其副作用可能较低。总之,小分子CRF1受体拮抗剂可能成为治疗应激相关精神疾病的新方法。本文重点综述CRF1受体作为新靶标在抑郁症治疗中的潜在应用。

促肾上腺皮质激素释放因子及其受体的研究

促肾上腺皮质激素释放因子(corticotrop in-releasing factor,CRF)是一种与应激密切相关的神经内分泌肽,通过与G蛋白偶联的2种受体结合发挥整合、协调内分泌、自主神经系统、免疫系统及行为学各方面对应激的反应。

应激大鼠下丘脑5一羟色胺1A受体活性与促肾上腺皮质激素释放因子表达的关系

目的：观察连续单一应激（SPS）前阻断大鼠5-羟色胺1A（5-HTlA）受体下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）表达的改变，初步探讨5-HTlA受体活性与CRF表达的关系。方法：将健康雄性Wistar大鼠分为对照组、模型组和阻断组，模型组和阻断组给予SPS。阻断组在给予SPS应激前使用5-HTlA受体阻断剂WAYl00635进行干预。采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应（Rrr_PcR）方法检测下丘脑CRF蛋白和mRNA的表达。结果：对照组、模型组和阻断组免疫阳性细胞吸光度分别为6．94±0．61、22．36±1．55和16．86±1．65，mRNA相对表达分别为0．72±0．07、2．08±0．06和1．16±0．1t，模型组高于对照组，阻断组低于模型组。结论：5-HTlA受体活性与下丘脑CRF表达有关。

促肾上腺糖皮质激素释放因子及其受体在痛和痛相关负性情绪中的作用研究进展

痛可以引起一系列负性情绪如焦虑、抑郁、惊恐,这些负性情绪又可以加重疼痛。研究表明,痛和痛相关负性情绪的产生与促糖皮质激素释放因子及其受体有关。本文综述了促糖皮质激素释放因子及其受体在痛和痛相关负性情绪中的作用的最新研究进展,为克服慢性痛及其由此产生的心理疾病提供理论依据。

促肾上腺皮质激素释放因子受体Ⅰ型拮抗剂研究进展

促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）主要通过CRF1受体参与调节下丘脑-垂体-肾上腺轴应激反应。研究表明CRF过度分泌可能是抑郁症等情感障碍的病因机制之一。CRF1受体作为新一代潜在抑郁药物靶点正逐渐成为一个充满希望的研究热点。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1在人脑胶质瘤中表达及其临床意义

目的探讨促肾上腺皮质激素释放因子受体1(CRFR1)在人脑胶质瘤中表达及其临床意义。方法随机收集35例临床手术切除胶质瘤组织标本及培养人类胶质母细胞瘤株U87,进行CRFR1免疫组化染色,以5例泌乳素垂体腺瘤组织标本作为阳性对照。检测胶质瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达。同时,分析CRFR1表达与临床病理因素之间的相关性。结果 CRFR1着色于肿瘤细胞膜,在不同类型、级别的脑胶质瘤中均有着色,且随肿瘤病理级别增高而表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);胶质母细胞瘤中存在U87、CRFR1和PCNA高表达;CRFR1表达与患者KPS评分及PCNA表达有关。结论 CRFR1在胶质瘤细胞发生、增殖及侵袭性生长过程中可能扮演了重要角色,对胶质瘤恶性生物学特性的作用机制需要进一步探讨。

促肾上腺皮质激素释放因子受体2在结肠癌中的表达

促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropinreleasingfactor),其本质是促激素释放因子(RF)的一种。它的主要分泌途径是通过下丘脑-垂体神经分泌系统分泌,从而进入垂体门静脉系统,这种激素的直接作用对象是ACTH分泌细胞,促进ACTH细胞的分泌。这种释放因子类似多肽,主要有α1-、α2-和β-CRF三种。本文将主要通过检测CRFR2在结肠癌临床标本及不同侵袭潜能结肠癌细胞系中表达并分析及其临床病理学意义,主要依靠收集早期结肠癌、进展期结肠癌、癌旁组织及正常结肠组织标本各50例,构建不同侵袭潜能的SW620及SW480结肠癌细胞系,通过免疫组化、Western等检测CRFR2的表达分布等手段,分析CRFR2表达与结肠癌病理分级、临床分期与预后的关系;敲低结肠癌细胞系CRFR2表达后对结肠癌细胞系增殖、迁移、侵袭等恶性表型的影响,在试验中转染CRFR2基因干扰载体,利用MTT、软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖的变化,FCM、TUNEL法检测细胞周期及凋亡,划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力的变化,以及裸鼠成瘤实验检测细胞增殖、侵袭能力的变化,并检测CRFR2表达降低后结肠癌细胞系中E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白及黏着斑激酶(FAK)等的表达。从而达到明确CRFR2表达与结肠癌病理分级、临床分期与预后的关系以及CRFR2表达降低对结肠癌增殖、侵袭的影响及分子机制。

促肾上腺皮质激素释放因子受体在内脏高敏感大鼠脑肠轴的表达

目的:研究内脏高敏感大鼠脑和结肠中促肾上腺皮质激素释放因子受体(CRF-R) 1和CRF-R2的表达,探讨CRF-R在肠易激综合征(IBS)内脏高敏感信号传导通路中的作用。方法:将18只SD大鼠随机分为3组:空白组、模型一组(腹腔注射鸡卵清蛋白致敏)、模型二组(樟脑丸条件刺激和肢体束缚直肠刺激非条件刺激轮替致敏),每组6只。造模成功后,给予生理盐水灌胃4周,处死,取脑和结肠进行免疫组化检测,观察CRF-R1和CRF-R2的分布和表达情况。结果:免疫组化显示大鼠CRF-R1和CRF-R2在脑和结肠中的表达部位一致,海马结构和结肠肌间神经丛可见CRF-R的明显表达,在内脏高敏感模型中表达部位与空白组比较差异无统计学意义。与空白组大鼠相比,模型组大鼠CRF-R1表达增高、CRF-R2表达降低(P<0.05)。结论:CRF-R在内脏高敏感发病机制中起重要作用,可能与伤害性记忆有关。

人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体EC1片段在原核系统中的可溶性表达

目的:研究人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体(hCRFR1)EC1区蛋白片段在原核表达系统中可溶性表达的影响因素。方法:以pcDNA3.1-hCRFR1全长质粒为模板,PCR扩增EC1区分别编码118和88个氨基酸残基(分别对应融合蛋白GST-EC1118和GST-EC188)的片段,将其插入pGEX-4T2载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导目标蛋白表达;采用GSTrap FF亲和纯化柱对目标蛋白进行纯化,并用Western印迹证实。结果:与GST-EC1118相比,GST-EC188可溶性表达增加,为下一步hCRFR1相关研究的开展奠定了基础。结论:hCRFR1的EC1区M1～N19及N108～V118两个片段影响该区域在原核系统中表达的可溶性,推测可能与富含疏水性氨基酸有关。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1对阿尔茨海默病的影响（英文）

越来越多的证据表明,应激后导致的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)以及促肾上腺皮质激素释放因子受体-1(CRFR1)与阿尔茨海默病(AD)的发病和病情发展有着密切的联系。CRFR1主要功能为下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)应激后变化的重要调节因子,并且CRFR1广泛分布于与情绪和认知相关的大脑区域,鉴于此CRF/CRFR1信号通路的其他功能被提出,其中包括对AD神经病理调控。尤其新近发现CRFR1拮抗剂可阻断CRFR1下游信号对β淀粉样蛋白堆积和tau蛋白磷酸化的促进作用。因此,CRFR1拮抗剂对AD可能具有潜在的预防和治疗作用。本综述主要基于当前文献和我们的研究对CRF/CRFR1信号与AD之间的关系进行讨论。

促肾上腺皮质激素释放激素受体在应激反应中的作用研究

促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激反应中的关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。CRH的作用是由其受体所介导的。目前已知的CRH受体有CRH-R1、CRH-R2、CRH-R3 3种。应激时,CRH主要通过CRH-R1、CRH-R2产生一系列生理、病理效应。近年来通过对转基因动物、选择性CRH受体拮抗剂和特异性CRH受体激动剂等的应用,对CRH受体在应激中作用有了更深的了解,也进一步揭示了应激机制。

解郁1号对抑郁大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放因子和皮质醇含量的影响

目的探讨以调理脾胃法组成的中药复方解郁1号对抑郁大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放因子、皮质醇含量的影响。方法SD大鼠40只,按随机表随机分为正常组、模型组、阿米替林组、解郁1号12,6 g/(kg.d)剂量组,每组各8只。除正常组外,各组接受21 d长期慢性刺激,在造模同时即开始给药。各组动物末次造模结束后,采用旷场实验进行行为学评分;采用放射免疫法测定促肾上腺皮质激素释放因子、皮质醇含量。结果实验大鼠38只进入结果分析。①各组大鼠血浆皮质醇含量的变化:模型组与正常组比较,血浆皮质醇水平明显升高(P<0.01)。中药高、低剂量组、西药组,与模型组相比,明显降低,具有显著差异性(P<0.01),但三组之间相比较,均没有统计学意义(P(0.05)。②各组大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放因子含量的变化:模型组大鼠血浆的促肾上腺皮质激素释放因子含量高于正常组(P<0.01);与模型组比较,中、西药治疗组促肾上腺皮质激素释放因子含量多明显降低(P<0.01);中、西药治疗组之间促肾上腺皮质激素释放因子含量比较未见显著性变化(P(0.05)。结论解郁1号具有抗抑郁作用,其作用机制可能通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA),来调节血浆内促肾上腺皮质激素释放因子、皮质醇水平,达到抗抑郁目的。

水杨酸钠致耳鸣大鼠脑海马区促肾上腺皮质激素释放因子的表达

目的观察水杨酸纳致耳鸣大鼠海马区促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin-releasing factor,CRF)的表达,探讨其参与水杨酸钠致耳鸣的可能机制。方法将ABR反应阈<30dB SPL的30只健康Wistar大鼠随机分为A、B、C三组,每组10只。A组注射10%水杨酸钠溶液350mg.kg-1.d-1,共注射21天,B组注射10%水杨酸钠溶液350mg.kg-1.d-1,共注射14天,C组(对照组)腹腔注射等量生理盐水14天。给药前采用改良的饮水抑制法对各组大鼠进行条件反射训练,条件反射消退期开始注射水杨酸钠并检测各组大鼠饮水抑制率(R值);分别于给药前两天、首次给药后2h、给药结束后当天检测各组大鼠ABR反应阈,然后将大鼠处死并断头取脑,剥离海马区,采用Western blot方法检测CRF在各组大鼠海马区的表达。结果条件反射消退期1～3天A、B两组大鼠R值大于C组(P<0.05),证明耳鸣大鼠模型建立成功;首次给药后2h及给药结束后A、B两组ABR反应阈均较给药前提高了约30dB(P<0.05),但A、B两组间ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05);大鼠脑海马区CRF表达量A组>B组>C组(P<0.05)。结论水杨酸钠注射致耳鸣大鼠的海马区情绪应激相关蛋白CRF表达增强,且随注射时间延长其表达量增加,提示CRF表达升高可能是边缘系统参与耳鸣的重要机制之一。

人胎盘促肾上腺皮质激素释放激素自身受体激活效应

目的了解剖宫产应激过程中人胎盘促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及其受体CRH-R 1的差异表达。方法分别采用免疫组织化学技术L sAB法和原位杂交技术,观察先兆临产前人足月妊娠剖宫产正常胎盘CRH及其受体CRH-R 1的表达。结果8例正常妊娠胎盘组织切片4种靶目标CRH、CRH mRNA、CRH-R 1、CRH-R 1 mRNA表现为阳性或强阳性表达,而CRH-R 1、CRH-R 1 mRNA表达强度又分别强于CRH、CRH mRNA(P<0.01),CRH-R 1阳性表达的灰度值高于CRH(P<0.05)。结论人正常足月妊娠胎盘组织细胞在剖宫产应激过程中升高的CRH可能会刺激自身受体CRH-R 1表达,人正常足月妊娠胎盘组织细胞可能存在CRH自身受体激活效应。

镉的免疫毒性与促肾上腺皮质激素释放因子的关系

对 Cd Cl2 和 Cd Cl2 + α- h CRF(α螺旋促肾上腺皮质激素释放因子 )分别染毒的 SD大鼠 ,用 [3H-Td R]掺入法测定大鼠脾 T、B淋巴细胞增殖转化功能 ,垂体前叶细胞培养法测定中枢下丘脑和外周血浆中的 CRF含量。结果表明单独染镉组有丝分裂原诱导的鼠脾 T、B淋巴细胞增殖转化均受到明显抑制 ,具有剂量 -效应关系 (P<0 .0 5 ) ;动物下丘脑 CRF含量伴随着染镉剂量升高 (P<0 .0 5 ) ;外周血浆 CRF含量各组间差异无显著性 (P>0 .0 5 )。当使用拮抗剂 α- h CRF后 ,在含镉染毒各剂量组间鼠脾 T、B细胞功能抑制差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;下丘脑 CRF含量在各含镉联合染毒组间差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,但均较对照组高 (P<0 .0 5 ) ;外周血浆 CRF水平有升高趋势。结果提示单独染镉可引起下丘脑 CRF含量升高和免疫功能抑制 ,联合使用 α- h CRF后则能部分改善镉对大鼠脾细胞的免疫功能抑制。镉对大鼠脾淋巴细胞免疫毒作用过程中存在中枢