促肾上腺皮质激素释放因子受体2在溃疡性结肠炎中的表达

目的观察促肾上腺皮质激素释放因子受体2(CRFR2)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达情况,及其与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子-κB(NF-κB)p65和白细胞介素-6(IL-6)的关系,探讨其在UC中的作用。方法免疫组织化学法检测UC活动组30例、缓解组30例和30例正常对照组的结肠黏膜中CRFR2、ICAM-1、NF-κB p65的表达情况,ELISA方法检测各组血清中IL-6水平。结果 CRFR2在UC活动组肠黏膜组织中的表达明显高于缓解组和对照组(P<0.05),而在UC缓解组和对照组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。CRFR2在肠黏膜组织中的表达与NF-κB p65、ICAM-1的表达及血清中IL-6水平具有明显相关性(P<0.05)。结论活动期UC患者的CRFR2的表达明显升高,提示其在UC发病中可能起促炎作用。

促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体:抗抑郁药物的新靶标

抑郁和焦虑患者常伴随应激激素调节失常,这与下丘脑神经肽促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和精氨酸加压素分泌过多密切相关。CRF主要通过激动促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型(CRF1)受体诱导抑郁或焦虑样症状,众多研究表明CRF1受体是新型抗抑郁药的潜在靶标。目前已研发出很多基于此靶标的非肽类小分子化合物,但只有一部分进入临床试验,包括NBI-30775/R121919和NBI-34041等。值得注意的是,此类化合物显效与动物的应激水平和自身焦虑程度有关,即CRF1受体拮抗剂可在不影响下丘脑-垂体-肾上腺轴基础活性情况下对抗CRF介导的病理性应激反应,从而提示其副作用可能较低。总之,小分子CRF1受体拮抗剂可能成为治疗应激相关精神疾病的新方法。本文重点综述CRF1受体作为新靶标在抑郁症治疗中的潜在应用。

促肾上腺皮质激素释放因子受体2在结肠癌中的表达

促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropinreleasingfactor),其本质是促激素释放因子(RF)的一种。它的主要分泌途径是通过下丘脑-垂体神经分泌系统分泌,从而进入垂体门静脉系统,这种激素的直接作用对象是ACTH分泌细胞,促进ACTH细胞的分泌。这种释放因子类似多肽,主要有α1-、α2-和β-CRF三种。本文将主要通过检测CRFR2在结肠癌临床标本及不同侵袭潜能结肠癌细胞系中表达并分析及其临床病理学意义,主要依靠收集早期结肠癌、进展期结肠癌、癌旁组织及正常结肠组织标本各50例,构建不同侵袭潜能的SW620及SW480结肠癌细胞系,通过免疫组化、Western等检测CRFR2的表达分布等手段,分析CRFR2表达与结肠癌病理分级、临床分期与预后的关系;敲低结肠癌细胞系CRFR2表达后对结肠癌细胞系增殖、迁移、侵袭等恶性表型的影响,在试验中转染CRFR2基因干扰载体,利用MTT、软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖的变化,FCM、TUNEL法检测细胞周期及凋亡,划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力的变化,以及裸鼠成瘤实验检测细胞增殖、侵袭能力的变化,并检测CRFR2表达降低后结肠癌细胞系中E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白及黏着斑激酶(FAK)等的表达。从而达到明确CRFR2表达与结肠癌病理分级、临床分期与预后的关系以及CRFR2表达降低对结肠癌增殖、侵袭的影响及分子机制。

人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体EC1片段在原核系统中的可溶性表达

目的:研究人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体(hCRFR1)EC1区蛋白片段在原核表达系统中可溶性表达的影响因素。方法:以pcDNA3.1-hCRFR1全长质粒为模板,PCR扩增EC1区分别编码118和88个氨基酸残基(分别对应融合蛋白GST-EC1118和GST-EC188)的片段,将其插入pGEX-4T2载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导目标蛋白表达;采用GSTrap FF亲和纯化柱对目标蛋白进行纯化,并用Western印迹证实。结果:与GST-EC1118相比,GST-EC188可溶性表达增加,为下一步hCRFR1相关研究的开展奠定了基础。结论:hCRFR1的EC1区M1～N19及N108～V118两个片段影响该区域在原核系统中表达的可溶性,推测可能与富含疏水性氨基酸有关。

肠易激综合症患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体表达的研究

目的检测肠易激综合症(IBS)患者结肠组织中促肾上腺皮质激素释放因子受体(CRFR)1及CRFR2的表达,探讨其与IBS发病的关系,从而为靶向治疗IBS提供依据。方法分别采集15例腹泻型IBS(D-IBS)患者、15例便秘型IBS(C-IBS)患者和10例正常健康人结肠组织标本,采用Elivision(TM)PLUS/HRP免疫组化染色方法和Western blot测定CRFR1、CRFR2在各组结肠组织中的蛋白表达。结果实验结果显示,正常对照组CRFR1和CRFR2免疫组化染色以浅黄色为主,分布范围局限,平均光密度值分别为(0.254±0.099)和(0.201±0.030);D-IBS组中CRFR1以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.384±0.048),显著高于C-IBS组(0.144±0.077)及正常对照组(P<0.01);C-IBS组中CRFR2染色以深或棕黄色为主,分布范围较为广泛,平均光密度值为(0.322±0.022),显著高于D-IBS组(0.162±0.023)(P<0.01)及正常对照组(P<0.05)。Western blot结果显示,D-IBS组CRFR1蛋白表达明显高于C-IBS组和正常对照组;C-IBS组CRFR2表达高于D-IBS组和正常对照组。结论不同亚型IBS患者其CRFR表达的亚型亦不同,提示不同亚型IBS的发生可能与患者结肠组织中CRFR1、CRFR2的表达水平有关。

促肾上腺皮质激素释放因子及其受体的研究

促肾上腺皮质激素释放因子(corticotrop in-releasing factor,CRF)是一种与应激密切相关的神经内分泌肽,通过与G蛋白偶联的2种受体结合发挥整合、协调内分泌、自主神经系统、免疫系统及行为学各方面对应激的反应。

应激大鼠下丘脑5一羟色胺1A受体活性与促肾上腺皮质激素释放因子表达的关系

目的：观察连续单一应激（SPS）前阻断大鼠5-羟色胺1A（5-HTlA）受体下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）表达的改变，初步探讨5-HTlA受体活性与CRF表达的关系。方法：将健康雄性Wistar大鼠分为对照组、模型组和阻断组，模型组和阻断组给予SPS。阻断组在给予SPS应激前使用5-HTlA受体阻断剂WAYl00635进行干预。采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应（Rrr_PcR）方法检测下丘脑CRF蛋白和mRNA的表达。结果：对照组、模型组和阻断组免疫阳性细胞吸光度分别为6．94±0．61、22．36±1．55和16．86±1．65，mRNA相对表达分别为0．72±0．07、2．08±0．06和1．16±0．1t，模型组高于对照组，阻断组低于模型组。结论：5-HTlA受体活性与下丘脑CRF表达有关。

促肾上腺糖皮质激素释放因子及其受体在痛和痛相关负性情绪中的作用研究进展

痛可以引起一系列负性情绪如焦虑、抑郁、惊恐,这些负性情绪又可以加重疼痛。研究表明,痛和痛相关负性情绪的产生与促糖皮质激素释放因子及其受体有关。本文综述了促糖皮质激素释放因子及其受体在痛和痛相关负性情绪中的作用的最新研究进展,为克服慢性痛及其由此产生的心理疾病提供理论依据。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1在人脑胶质瘤中表达及其临床意义

目的探讨促肾上腺皮质激素释放因子受体1(CRFR1)在人脑胶质瘤中表达及其临床意义。方法随机收集35例临床手术切除胶质瘤组织标本及培养人类胶质母细胞瘤株U87,进行CRFR1免疫组化染色,以5例泌乳素垂体腺瘤组织标本作为阳性对照。检测胶质瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达。同时,分析CRFR1表达与临床病理因素之间的相关性。结果 CRFR1着色于肿瘤细胞膜,在不同类型、级别的脑胶质瘤中均有着色,且随肿瘤病理级别增高而表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);胶质母细胞瘤中存在U87、CRFR1和PCNA高表达;CRFR1表达与患者KPS评分及PCNA表达有关。结论 CRFR1在胶质瘤细胞发生、增殖及侵袭性生长过程中可能扮演了重要角色,对胶质瘤恶性生物学特性的作用机制需要进一步探讨。

促肾上腺皮质激素释放因子受体Ⅰ型拮抗剂研究进展

促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）主要通过CRF1受体参与调节下丘脑-垂体-肾上腺轴应激反应。研究表明CRF过度分泌可能是抑郁症等情感障碍的病因机制之一。CRF1受体作为新一代潜在抑郁药物靶点正逐渐成为一个充满希望的研究热点。

下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达及信号通路的研究进展

本文就下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达的影响因素、相关的信号通路作一综述。在生理状态下 ,大鼠促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体在下丘脑室旁核区的表达非常低 ,急、慢性应激、促肾上腺皮质激素释放激素、脂多糖促进下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达 ,而大剂量糖皮质激素抑制下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达。促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体是与G蛋白相耦联的跨膜结构的受体 ,第二信使为环腺苷一磷酸 ,后者激活蛋白激酶A信号途径 ,促肾上腺皮质激素释放激素的诸多作用都是通过此信号途径实现的。

促肾上腺皮质激素释放因子受体在内脏高敏感大鼠脑肠轴的表达

目的:研究内脏高敏感大鼠脑和结肠中促肾上腺皮质激素释放因子受体(CRF-R) 1和CRF-R2的表达,探讨CRF-R在肠易激综合征(IBS)内脏高敏感信号传导通路中的作用。方法:将18只SD大鼠随机分为3组:空白组、模型一组(腹腔注射鸡卵清蛋白致敏)、模型二组(樟脑丸条件刺激和肢体束缚直肠刺激非条件刺激轮替致敏),每组6只。造模成功后,给予生理盐水灌胃4周,处死,取脑和结肠进行免疫组化检测,观察CRF-R1和CRF-R2的分布和表达情况。结果:免疫组化显示大鼠CRF-R1和CRF-R2在脑和结肠中的表达部位一致,海马结构和结肠肌间神经丛可见CRF-R的明显表达,在内脏高敏感模型中表达部位与空白组比较差异无统计学意义。与空白组大鼠相比,模型组大鼠CRF-R1表达增高、CRF-R2表达降低(P<0.05)。结论:CRF-R在内脏高敏感发病机制中起重要作用,可能与伤害性记忆有关。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1对阿尔茨海默病的影响（英文）

越来越多的证据表明,应激后导致的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)以及促肾上腺皮质激素释放因子受体-1(CRFR1)与阿尔茨海默病(AD)的发病和病情发展有着密切的联系。CRFR1主要功能为下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)应激后变化的重要调节因子,并且CRFR1广泛分布于与情绪和认知相关的大脑区域,鉴于此CRF/CRFR1信号通路的其他功能被提出,其中包括对AD神经病理调控。尤其新近发现CRFR1拮抗剂可阻断CRFR1下游信号对β淀粉样蛋白堆积和tau蛋白磷酸化的促进作用。因此,CRFR1拮抗剂对AD可能具有潜在的预防和治疗作用。本综述主要基于当前文献和我们的研究对CRF/CRFR1信号与AD之间的关系进行讨论。

促肾上腺皮质激素释放因子功能及其与帕金森病关系的研究进展

帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种常见的慢性神经系统退行性病变。临床上以静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态障碍等运动症状为主要表现[1]。主要病理改变是中脑黑质纹状体神经元退化、黑质致密部的多巴胺能神经元缺失和死亡以及残存的神经元胞质内出现嗜酸性包涵体,即路易小体[2,3]。

促肾上腺皮质激素释放因子对海马神经元树突生长发育的影响

应激对于认知和情感有重要影响,促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)作为应激反应的主要调节器,通过调控下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能,协调机体对应激的反应。近年研究表明,应激可导致小鼠海马神经元树突分支异常,树突棘缺失,而促肾上腺皮质激素释放因子受体-1(CRFR1)缺失小鼠或在CRFR1拮抗剂存在下则表现出正常的树突分支。另外,CRFR1作为G蛋白偶联受体(GPCR),可通过不同的信号通路影响海马神经元结构及相关因子的表达。目前,CRF对海马神经元损伤的分子机制仍不明确,本文就应激下CRF及其受体信号通路对海马神经元生长发育影响的研究进展做一综述。

促肾上腺皮质素释放因子1在阿尔茨海默病发生和治疗中的作用

至今尚无较好的治疗方法能够减缓或阻止阿尔茨海默病(AD)发生发展。目前AD的治疗药物,如乙酰胆碱酯酶抑制剂和N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂美金刚,只能控制患者的部分行为学症状,对阻止疾病的发展并无多大帮助。多种因素(包括生物和社会心理因素)都被认为与AD发病有关[1,2]。越来越多的证据表明.

严重烧伤大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2对烧伤高代谢的影响

目的观察下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2（CRFR2）在严重烧伤大鼠高代谢中的作用。方法选取24只sD大鼠采用立体定位仪定位第3脑室并置管，按照随机数字表法分为假伤对照组、烧伤对照组、CRFR2正义寡核苷酸（ODN）组、CRFR2反义寡核苷酸（ASO）组，每组6只。后3组大鼠背部脱毛后用凝固汽油燃烧18s，造成30％TBSAIII度烧伤，随即腹腔注射40mL／kg乳酸林格液抗休克；假伤对照组大鼠仅于37℃温水浴中模拟致伤过程。伤后5、6d在清醒状态下，向2个对照组大鼠脑室内注入生理盐水3μL，另外2组大鼠于脑室内分别注入CRFR2ODN10μg、CRFR，ASO1μg。伤后第7天处死大鼠，采用免疫组织化学染色法、免疫荧光染色法观察各组大鼠下丘脑腹内侧核（VMH）中CRFR2表达量，结果以积分吸光度值表示。对数据行单因素方差分析、LSD检验。弓I用笔者以往研究中对应4组大鼠的静息能量消耗（REE）值，对CRFR2表达量与REE值行相关分析。结果免疫组织化学染色、免疫荧光染色显示，4组大鼠VMH中CRFR2表达量比较差异有统计学意义（F值分别为3．11、4．66，P值均小于0．01）。烧伤对照组、CRFR2ODN组、CRFR2ASO组大鼠VMH中CRFR2表达量明显高于假伤对照组（P值均小于0．01）。与CRFR2ODN组大鼠VMH中CRFR2表达量（分别为29．2±3．2、18．5±2．6）比较，CRFR2ASO组均明显降低（分别为19．4±2．3、10．1±2．2，P值均小于0．01）。相关分析显示，4组大鼠2种方法测定的VMH中CRFR2表达量与REE值均呈显著正相关（r值分别为0．9236、0．8921，P值均小于0．01）。结论中枢应用CRFR2ASO可下调大鼠YMH中CRFR2表达，降低烧伤高代谢反应。

下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2反义寡核苷酸在严重烧伤大鼠高代谢反应中的作用

目的了解下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2（CRFR2）反义寡核苷酸（ASO）在严重烧伤大鼠高代谢反应中的作用。方法将36只SD大鼠大脑立体定位、第三脑室置管。其中30只烧伤后，根据脑室注入物的不同，分为烧伤对照组（注入等渗盐水3μL）、CRFR1正义寡核苷酸（ODN）组（注入CRFR1ODN 10μg）、CRFR1ASO组（注入CRFR1ASO 10μg）、CRFR20DN组（注入CRFR20DN 10μg）、CRFR2ASO组（注入CRFR2ASO 10μg）。每组6只大鼠。另取6只大鼠作为正常对照组，不致伤，仅在脑室内注入等渗盐水3μL。分别于伤后5、6d在大鼠清醒状态下经脑室置管注射药物。伤后7d经该管注人20g／L甲紫3μL，当日检测大鼠静息能量消耗（REE），并取大鼠脑组织检测CRFR2 mRNA表达及CRFR2蛋白含量。结果烧伤对照组、CRFR1ODN组、CRFR1ASO组、CRFR20DN组、CRFR2ASO组REE值分别为（11840±987）、（11133±1100）、（10733±1338）、（11123±1321）、（7563±890）kJ·（m^2）^-1·d^-1，均高于正常对照组[（6641±526）kJ·（m^2）^-1·d^-1，P〈0．05]，而CRFR2ASO组却明显低于CRFR20DN组（P〈0．01）。烧伤对照组伤后脑组织CRFR2 mRNA的表达和CRFR2蛋白含量明显增加，而CRFR2ASO组CRFR2 mRNA表达及CRFR2蛋白含量却低于正常对照组（P〈0．01）。结论中枢应用CRFR2ASO可下调下丘脑CRFR2 mRNA表达和蛋白含量，降低烧伤高代谢反应，下丘脑CRFR2受体可介导大鼠烧伤后高代谢反应。

促肾上腺皮质激素释放激素1型受体拮抗剂CP154,526潜在靶点预测研究

目的虚拟筛选促肾上腺皮质激素释放激素1型受体拮抗剂(CP154,526)的潜在作用靶点。方法本研究以CP154,526为研究对象,以PharmMapper服务器为工具,采用反向分子对接法筛选它的潜在靶点,并采用PyRx 0.8软件中Autodock vina进行正向分子对接验证。结果靶蛋白转甲状腺素蛋白(TTR)与CP154,526的打分排前,它们的药效团分子特征一致。CP154,526与TTR的核心氨基酸有相互作用。结论 TTR可能是CP154,526的作用靶蛋白之一。