稳定表达促血管生成素基因肝癌细胞系的建立及产物的检测

目的 构建携带促血管生成素 (Angiopoietin)基因并稳定表达的肝癌细胞系SMMC772 1,为进一步研究奠定基础。方法 选择本身不表达Angiopoietin的肝癌细胞系SMMC772 1,通过脂质体介导的基因转染方法将Angiopoietin基因导入SMMC772 1肝癌细胞系 ,并用G418筛选稳定表达的细胞克隆 ,构建携带Angiopoietin基因并稳定表达的SMMC772 1肝癌细胞系。用RT -PCR方法从RNA水平以及用免疫荧光法从蛋白水平均检测新构建的肝癌细胞系是否携带了Angiopoietin基因并能稳定表达其蛋白产物。结果 成功构建了携带Angiopoietin基因的肝癌细胞系 ,新的细胞系可以稳定表达外源基因及其蛋白产物。结论 脂质体介导基因转染法是一种高效转染方法 。

Ang-1基因转染至BMSCs后对高氧诱导的新生鼠视神经损伤模型的协同保护作用

目的探讨促血管生成素1(Ang-1)基因转染至骨髓间充质干细胞(BMSCs)后对高氧诱导的新生鼠视神经损伤模型的协同保护作用。方法 30只出生后3 d的健康小鼠,随机分为高氧盐水组、空白对照组、Ang-1+BMSCs高氧组,每组10只。三组小鼠均置于安静、室温和湿度适宜的环境下进行饲养,造模期间可自由摄食和饮水。比较三组小鼠有髓神经纤维数目、直径、轴索直径及髓鞘厚度。结果空白对照组、Ang-1+BMSCs高氧组轴索直径分别为(0.72±0.10)、(0.70±0.12)μm,显著长于高氧盐水组的(0.60±0.10)μm,差异具有统计学意义(P<0.05);三组轴索直径比较差异具有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、Ang-1+BMSCs高氧组有髓神经纤维直径分别为(1.06±0.10)、(0.99±0.13)μm,长于高氧盐水组的(0.90±0.16)μm,差异具有统计学意义(P<0.05);三组有髓神经纤维直径比较差异具有统计学意义(P<0.05)。高氧盐水组、Ang-1+BMSCs高氧组有髓神经纤维数目低于空白对照组, Ang-1+BMSCs高氧组神经纤维数量明显高于高氧盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05);三组有髓神经纤维数量比较差异具有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、 Ang-1+BMSCs高氧组髓鞘厚度大于高氧盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05);三组髓鞘厚度比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论高氧诱导新生鼠视神经损伤后进行Ang-1转染至BMSCs,可显著改善损伤的视神经超微结构。