促血管生成素-2在脓毒症合并ARDS患者中的作用

目的观察脓毒症合并急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者血清促血管生成素-2（Ang-2）的水平，探讨其在脓毒症合并ARDS患者中的诊断价值。方法选取贵州省人民医院急诊重症加强治疗病房（EICU）及呼吸科重症加强治疗病房（RICU）2015年10月至2017年3月收治的120例脓毒症患者，根据柏林新标准将患者分为单纯脓毒症组（97例）和脓毒症合并ARDS组（23例）。收集两组患者性别、年龄、生命体征、基础疾病、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分、氧合指数（PaO2／FiO2）及血清Ang一2水平等指标。采用脉搏指示连续心排血量（PiCCO）技术监测患者血管外肺水（EvLw），并计算EVLW指数（EVLWI）、肺血管通透性指数（PVPI）；分析Ang-2与EVLWI、PVPI、Pa02／FiO2、APACHEⅡ评分的相关性；绘制受试者工作特征曲线（ROC），评估Ang-2、EvLwI、PVPI、APACHEII评分对ARDS的预测价值。结果脓毒症合并ARDS组患者APACHEII评分（分：21．53±2．03比14．60±1．64）、EVLWI（mL／kg：15．89±2．79比7．59±2．20）、PVPI（4．99±0．47比2．66±0．29）和入组后2h血清Ang-2水平（mg／L：6．13±1．91比3．44±1．34）均明显高于单纯脓毒症组（均P〈0．05）；而PaOJFiO，则明显低于单纯脓毒症组[mmHg（1mmHg=0．133kPa）：255±24比314±26]。相关性分析显示：Ang-2与EVLWI（r=0．804，P=0．001）、PVPI（r=O．710，P=0．004）、APACHEⅡ评分（r=0．826，P=0．000）呈显著正相关，与PaOJFiO，呈显著负相关（r=-0．790，P=0．001）。ROC曲线分析显示：Ang-2、EvLwI、PVPI、APACHEⅡ评分预测ARDS的ROC曲线下面积（AUC）均在0．750以上，均具有较高的诊断能力；AUC分别为0．795、0．806、0．882、0．832，敏感度分别为88．91％、86．36％、92．32％、76．91％，特异度分别为66．82％、66．34％、66．23％、77．84％，95％可信区间（95％C1）分别为0．661—0．922、0．757～0．856、0．793～0．961、0．725～0．933，其中以PVPI对ARDS的预测价值最准确（其AUC在0．85以上，敏感度也最高）。结论脓毒症合并ARDS患者Ang-2的变化与PaO2／FiO2、APACHEⅡ评分、EVLWI、PVPI密切相关，Ang-2浓度越高，患者肺损伤越严重，发生ARDS的可能性越大，进一步推测Ang-2可作为ARDS早期诊断的分子生物学指标。

上皮性卵巢癌中促血管生成素-2的表达及其与微血管密度的关系

目的:研究促血管生成素-2(Ang-2)在上皮性卵巢癌血管生成及肿瘤生长中的作用。方法:应用免疫组化法检测46例上皮性卵巢癌和25例正常卵巢组织石蜡标本Ang-2和CD34表达,并以CD34标记的微血管计算组织的微血管密度(MVD)。结果:上皮性卵巢癌组织中Ang-2表达率高于正常卵巢组织(P<0.05),Ⅲ期和Ⅳ期合并组Ang-2表达率高于Ⅰ期和Ⅱ期合并组(P<0.05);上皮性卵巢癌中Ang-2表达与其病理类型及组织学分级无关,而与MVD呈正相关(r=0.733,P<0.01)。结论:Ang-2与上皮性卵巢癌的血管生成及其发展密切相关,可能通过促进上皮性卵巢癌中的血管生成而促进其发展。

口腔鳞癌中促血管生成素-2的表达与血管生成的关系

目的:研究口腔鳞癌组织中促血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)的表达及其与微血管密度(microvesseldensity,MVD)的关系,探讨Ang2在口腔鳞癌血管生成中的作用及意义。方法:用免疫组织化SABC法检测41例口腔鳞癌标本(有淋巴结转移者13例)及10例正常口腔黏膜组织中的Ang2和CD34表达并计数微血管密度。结果:Ang2在口腔鳞癌组织中阳性表达率为68.29%(28/41),显著高于Ang2在正常组织中的表达(P<0.05);Ang2表达主要集中于癌灶边缘的血管重建区。口腔鳞癌组织中MVD显著高于正常组织(P<0.01);中分化型的肿瘤MVD值显著高于高分化型的肿瘤(P<0.05);有淋巴结转移的肿瘤MVD值显著高于无淋巴结转移的肿瘤(P<0.05)。Ang2表达阳性组中MVD明显高于Ang2表达阴性组(P<0.01),Ang2的表达与MVD呈正相关(P<0.01)。结论:Ang2在口腔鳞癌组织中的高表达可能在口腔鳞癌的发生发展中起重要作用,并与肿瘤血管生成有关。

促血管生成素-2与胎儿生长受限发病的关系

目的:探讨促血管生成素-2(Ang-2)在母血、脐血血清中的水平和在胎盘组织上的表达与胎儿生长受限(FGR)发病的关系。方法:选取剖宫产分娩足月FGR患儿的孕妇30例作为实验组,同期剖宫产分娩正常足月婴儿的孕妇30例作为对照组。采用酶联免疫法(ELISA)测定母血和脐血血清中Ang-2的水平;采用免疫组织化学方法(SP法)检测孕妇胎盘组织中Ang-2的表达。结果:(1)实验组和对照组母血血清中Ang-2的水平分别为(8.86±0.43)ng/mL、(19.31±0.25)ng/mL。实验组和对照组脐血血清中Ang-2的水平分别为(10.92±0.41)ng/mL、(22.28±0.23)ng/mL;实验组和对照组胎盘组织中Ang-2的表达分别为118.17±1.59、151.64±1.64。实验组母血和脐血血清中Ang-2的水平和胎盘组织中Ang-2的表达均显著低于对照组(P<0.01)。(2)实验组胎盘组织中Ang-2的表达与母血血清Ang-2水平呈正相关(r=0.93,P<0.01);实验组胎盘组织中Ang-2的表达与脐血血清Ang-2水平呈正相关(r=0.93,P<0.01);母血血清中Ang-2水平与脐血血清中Ang-2水平呈正相关(r=0.99,P<0.01)。结论:母血和脐血血清中Ang-2水平均降低和胎盘组织中Ang-2表达降低可能参与了FGR的发病过程。

促血管生成素-2在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达及其临床意义

目的探讨促血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)在宫颈癌进展中的作用。方法采集50例宫颈鳞癌(Ⅰa～Ⅱa期)(SCC)及50例宫颈上皮内瘤变(CIN)标本,并以45例正常宫颈组织作为对照组;应用免疫组化法检测Ang-2在上述三组中的表达;检测CD34的表达,计数各组微血管密度(MVD)。结果 (1)Ang-2在SCC中的阳性表达率79.6%,在CIN组织中的阳性表达率26.7%,对照组的表达率7.5%。SCC组Ang-2的阳性率显著高于CIN组及对照组,CIN组阳性率显著高于对照组(P<0.05)。(2)SCC组MVD值显著高于CIN组及对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)SCC组织中,随分化程度的降低,Ang-2表达的阳性率显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)SCC及CIN组织中,MVD值与Ang-2的表达强度呈显著正相关(r分别为0.61、0.52)。结论 Ang-2与的血管生成密切相关,参与了肿瘤的恶性生物学行为。

奥沙利铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长及促血管生成素-2的影响

目的:观察小剂量奥沙利铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中促血管生成素-2(Ang-2)的影响。方法:体外进行Ishikawa细胞的培养扩增后种植于裸鼠皮下,建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型。将20只成瘤裸鼠随机分为两组:奥沙利铂组和阴性对照组,分别应用奥沙利铂2.0 mg.kg-1和5%葡萄糖20 ml.kg-1进行治疗。治疗27 d后测量肿瘤体积,计算抑瘤率。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测各组肿瘤组织中Ang-2的mRNA和蛋白的表达。结果:奥沙利铂组移植瘤体积(458.20±77.56)mm3,阴性对照组移植瘤体积(771.87±89.80)mm3,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。奥沙利铂组Ang-2在mRNA及蛋白水平的表达低于阴性对照组,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:奥沙利铂具有抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的作用;能抑制肿瘤组织中Ang-2的表达,可能与其抗肿瘤血管形成有关。

口腔鳞癌中促血管生成素-2及受体Tie-2的表达与肿瘤临床病理学参数和微血管特征的关系

目的:探讨口腔鳞癌中促血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)和受体Tie-2的表达及其与肿瘤血管生成、成熟及口腔鳞癌进展的关系。方法:采用免疫组织化学的方法检测62例口腔鳞癌及30例癌旁正常组织和10例正常口腔黏膜中Ang-2、Tie-2、CD34及α-SMA的表达;研究Ang-2及Tie-2的表达与肿瘤微血管密度及血管成熟指数和临床病理学参数间的关系。应用BioMias图像处理系统处理图像。结果:口腔鳞癌中Ang-2及Tie-2的表达显著高于癌旁正常组织和正常口腔黏膜(P均<0.05);Ang-2的表达和肿瘤微血管密度在有淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组(P<0.05);口腔鳞癌间质微血管与癌旁和正常口腔黏膜微血管相比具有血管密度高、不成熟、形态不规则、周长较小的特点(P均<0.01);Ang-2及Tie-2的表达与微血管密度显著相关(P<0.05);Ang-2的表达还与血管成熟指数显著相关(P<0.05)。结论:口腔鳞癌组织中Ang-2及Tie-2表达的上调与肿瘤进展和血管生成密切相关。

着床期小鼠子宫内膜促血管生成素-2的表达

目的 检查促血管生成素- 2(Ang- 2)蛋白在小鼠着床期子宫内膜的分布及mRNA的表达,以探究Ang- 2基因表达在着床过程中的作用和生物学意义(OD)。 方法 取妊娠2、4、6和8 d的小鼠子宫内膜(蜕膜),运用免疫组织化学S P法和原位杂交技术,检测着床期子宫内膜中Ang- 2蛋白的表达及mRNA的转录水平。结合图像分析技术检测不同时期子宫内膜中Ang -2表达的平均光密度(OD)。 结果 结果显示,Ang 2特异性免疫反应产物在基质细胞及腔上皮细胞胞浆中表达,随着妊娠天数的增加,表达逐渐增强(P<0.01)。原位杂交显示,Ang- 2 mRNA自妊娠第2天起即表达于基质细胞和腺上皮;第4天血管壁胞浆中也出现阳性表达,且其表达强度在妊娠第 6、8 天时逐渐增加。平均 OD值具有显著性差异(P<0.01)。 结论 在小鼠妊娠过程中Ang- 2和Ang 2 mRNA在着床前小鼠子宫内膜中即开始表达,并随妊娠进程而表达增强,提示Ang 2基因在“胎 母”对话的信号传导过程中起调节作用。

促血管生成素-2抑制裸鼠种植瘤生长的研究

目的探讨促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)转染入人宫颈癌Hela细胞后对裸鼠种植性肿瘤生长的抑制作用。方法建立Ang-2转染的Hela细胞株,实验动物随机分为:Ang-2组(A组,n=9)、Hela空白对照组(B组,n=9)、pcDNA3空白质粒对照组(C组,n=9)、Hank′s平衡盐溶液组(D组,n=8)4组,比较各组裸鼠成瘤时间和肿瘤体积。结果A组平均成瘤时间为(9.57±1.05)天,较B组〔(3.85±0.83)天〕和C组〔(4.14±0.90〕天〕明显推迟(P<0.01);A组肿瘤体积为(296.72±84.56)mm3,明显小于B组〔(2 100.36±404.52 mm3〕和C组〔(1 887.31±355.03)mm3〕(P<0.01)。D组无皮下肿瘤形成。结论转染Ang-2的人宫颈癌Hela细胞在裸鼠体内的致瘤力明显降低,肿瘤生长成瘤时间延迟,肿瘤的体积显著减小,表明Ang-2可显著抑制肿瘤生长。

O-N-乙酰葡萄糖胺糖基化水平正调控促血管生成素-2表达从而促进小鼠肝癌中肿瘤新生血管形成

目的探索在肝癌的发生发展过程中,O-N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化水平与促血管生成素-2(Ang-2)表达的关系.方法采用二乙基硝胺(DEN)诱导C57BL/6小鼠肝癌模型,检测O-GlcNAc糖基化、Ang-2及内皮细胞黏附分子(CD31)在肝癌中表达;采用N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(OGT)抑制剂及N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(OGA)抑制剂干预HepG2细胞,检测Ang-2的表达是否随O-GlcNAc糖基化水平的变化而改变;采用MTr检测O-GlcNAc糖基化的水平与肝癌细胞增殖的关系;采用Transwell法检测HUVEC细胞中O-GlcNAc糖基化水平与细胞迁移侵袭能力的关系.结果在DEN诱导的肝癌模型中,小鼠肝脏体积明显增大,肝脏上可见大小不一的肿瘤.免疫组织化学结果显示,与对照组相比,O-GlcNAc糖基化水平与Ang-2的表达在模型组小鼠肝脏中均明显上升(P<0.05),且肝癌组织中CD31染色的微血管密度明显上升(P<0.01);qRT-PCR检测结果显示,通过检测OGT、OGA、Ang-2 mRNA水平,得出O-GlcNAc糖基化水平影响Ang-2的表达水平;Western blotting结果显示,采用OGT抑制剂干预HepG2细胞后,Ang-2的表达随着O-GlcNAc糖基化水平的降低而下调;采用OGA抑制剂干预HepG2细胞后,Ang-2的表达随着O-GlcNAc糖基化水平的上升而升高.MTT结果显示,O-GlcNAc糖基化水平与肝癌细胞的增殖有密切关系,当O-GlcNAc糖基化水平高时,肝癌细胞增殖能力较强,当O-GlcNAc糖基化水平较低时,肝癌细胞的增殖能力明显受到抑制.Transwell结果显示,HUVEC细胞迁移侵袭能力与O-GlcNAc糖基化水平呈正相关.结论在肝癌的发生发展过程中,O-GlcNAc糖基化水平逐渐上升,且Ang-2的表达水平受到O-GlcNAc糖基化的正调控,从而促进肿瘤新生血管的生成.

促血管生成素-2在胃肠道恶性肿瘤检测中的应用

目的:探讨血清中促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)在胃肠道恶性肿瘤检测中的意义。方法:应用ELISA法检测56例临床已诊断为胃肠道恶性肿瘤的实验组和12例健康对照血清中Ang-2的含量。SPSS 11.0统计软件行数据统计分析。结果:胃肠道恶性肿瘤患者血清中Ang-2表达水平显著高于正常对照组(P<0.05),胃癌与肠道恶性肿瘤患者血清中Ang-2表达水平无显著差异(P>0.05)。结论:血清Ang-2含量在胃肠道恶性肿瘤检测中具有一定应用价值。

血清血管生成因子及促血管生成素-2与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究

目的 探讨血清VEGF及Ang-2与COPD的相关性,为COPD的临床诊断及治疗提供依据.方法 选择COPD患者160例,稳定期120例（轻度、中度、重度各40例）、急性加重期40例,同时选择同期健康体检者40例作对照.比较各组血清VEGF、Ang-2水平.结果 COPD稳定期中度、重度患者血清VEGF明显低于健康对照组,随着严重度的增加而逐渐降低,急性加重期患者则明显高于对照组（P＜ 0.05）;COPD稳定期不同严重度的患者血清Ang-2水平均高于对照组,但各严重度间差异无统计学意义（P＞0.05）,急性加重期患者则明显高于稳定期各严重度患者及对照组（P＜0.05）;急性加重期患者肺功能低于稳定期轻度、中度组患者及健康对照组（P＜0.05）,但高于重度组患者.结论 VEGF、Ang-2水平在COPD急性加重患者血清中明显增加,有可能作为COPD急性发作的早期诊断及监测的生物标志物.

促血管生成素-2在肿瘤早期筛查中的应用初探

目的:研究Ang-2在肿瘤患者与正常人血清中的表达水平,并探讨其在肿瘤诊断中的应用价值。方法:采用免疫比浊法检测74例肿瘤患者和30例正常人血清中Ang-2的表达水平。结果:肿瘤患者血清中Ang-2表达水平显著高于正常对照组(P<0.05),肝癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、前列腺癌和胃肠肿瘤中阳性检出率分别为89.5%、66.0%、100.0%、100.0%、94.1%。结论:Ang-2可作为肿瘤早期筛查和诊断的指标。

促血管生成素-2在口腔鳞癌中表达的初步研究

目的:研究口腔鳞癌组织中促血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)的表达及其与临床病理学特征间的关系,初步探讨Ang-2在口腔鳞癌中的作用及意义。方法:免疫组织化学SABC法检测口腔鳞癌标本41例(有淋巴结转移者13例)及30例癌旁正常组织和10例正常口腔黏膜组织中的Ang-2表达。应用BioMias图像处理系统处理图像。SPSS11.0统计软件行数据处理。结果:Ang-2表达主要集中于肿瘤细胞胞浆,尤其是癌灶边缘的血管重塑区。Ang-2在口腔鳞癌组织中表达显著高于癌旁正常组织(P<0.01)及正常口腔黏膜组织中Ang-2的表达(P<0.01);Ang-2表达与肿瘤的淋巴结转移(P<0.01)密切相关,而与病人的性别、年龄和临床分期及肿瘤的分化程度无关(P>0.05)。结论:Ang-2在口腔鳞癌组织中的过度表达可能在口腔鳞癌的发生、发展中起重要作用。

促血管生成素-2与妊娠期高血压疾病的相关性

目的检测妊娠期高血压疾病患者及其胎儿脐血血清中促血管生成素-2(Ang-2)的水平,以探讨Ang-2在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附技术(ELISA)测定150例妊娠期高血压疾病患者,50例正常妊娠妇女及其胎儿脐血血清中Ang-2水平,并对数据进行分析。结果妊娠期高血压疾病患者中,血清Ang-2水平在妊娠期高血压组为(19.57±1.51)μg/L,轻度子痫前期组为(14.93±2.87)μg/L,重度子痫前期组为(10.85±1.45)μg/L,均明显低于对照组(22.79±2.93)μg/L,经比较有极显著性差异(t值分别为2.013、2.246、2.861,均P<0.05)。妊娠期高血压疾病新生儿中,脐血血清Ang-2水平在妊娠期高血压组为(21.43±1.21)μg/L,轻度子痫前期组为(17.55±1.67)μg/L,重度子痫前期组为(13.84±1.29)μg/L,均显著低于对照组(25.76±2.83)μg/L,经比较有极显著性差异(t值分别为2.253、2.391、2.682,均P<0.05)。结论孕妇血清中Ang-2水平与妊娠期高血压疾病的发病及病情轻重有关,而脐血血清中Ang-2与孕妇血清Ang-2水平一致。

促血管生成素-2在子宫内膜异位性疾病中的表达及其意义

目的检测促血管生成素-2(Ang-2)在子宫内膜异位性疾病患者在位及异位内膜中的表达,并探讨其在子宫内膜异位性疾病发病的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Ang-2 mRNA在65例子宫内膜异位症患者(内异症组)、40例子宫腺肌病患者(腺肌病组)的异位及在位内膜中的表达及在30例正常子宫内膜组织(对照组)中的表达。结果内异症组及腺肌病组的异位及在位内膜中Ang-2的表达率均高于对照组,但其表达强度与子宫内膜异位症的临床分期无明显相关性。结论子宫内膜异位症及子宫腺肌病患者的异位及在位内膜组织中Ang-2的表达增强,Ang-2在子宫内膜异位性疾病的发病过程中起到一定的促进作用。

人食管鳞癌组织中促血管生成素-2的表达

目的探讨食管鳞癌及癌旁组织中促血管生成素-2(Ang-2)的表达。方法采用免疫组织化学SP法检测56例食管鳞癌、13例原位癌、11例重度不典型增生和47例食管断端正常鳞状上皮组织中Ang-2的表达。结果Ang-2的表达主要定位于肿瘤细胞的胞浆和胞膜。食管鳞癌、原位癌组织中Ang-2的表达高于食管正常鳞状上皮组织(P<0.01)和癌旁重度不典型增生上皮组织(P<0.05);重度不典型增生上皮组织中Ang-2的表达也高于食管正常鳞状上皮(P<0.01),但食管鳞癌组织和原位癌组织中Ang-2的表达差异无统计学意义(P>0.05)。Ang-2的表达与食管鳞癌的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移无关(P均>0.05)。结论Ang-2的阳性表达是食管癌鳞癌发生的早期事件。

促血管生成素-2在肺癌、食管癌早期诊断中的应用

目的分别选用促血管生成素(Ang-2)、CEA、CA125、NSE和SCC检测肺癌、食管癌患者及健康人,以评估Ang-2的应用价值。方法对156例肺癌患者(鳞癌67例、腺癌47例、小细胞肺癌42例)、89例食管癌患者(鳞癌41例、腺癌30例、小细胞肺癌18例)和119例健康人分别以增强化学发光法检测Ang-2,微粒子酶免疫测定法检测SCC,电化学发光法检测CEA、CA125、NSE。结果Ang-2、CEA、CA125、NSE和SCC在肺癌中的阳性率分别为69.2%、39.1%、30.1%、38.5%和28.8%;在食管癌中的阳性率分别为69.7%、34.8%、34.8%、20.2%和39.3%;在健康人组中的阳性率分别为3.4%、12.6%、14.2%、11.8%和7.6%。Ang-2在肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌中的阳性率分别为69.2%、69.4%、69.0%、;在食管鳞癌、食管腺癌、食管小细胞癌中的阳性率分别为68.3%、73.3%、66.7%,均优于另4种标志物。CEA、CA125、NSE和SCC检测为阴性的肺癌、食管癌患者再进行Ang-2检测,发现Ang-2对其他4种检测指标有很好的互补性,最低补检率也有44.8%。结论Ang-2作为一种实体肿瘤的广谱标志物,相对于其他标志物在肺癌、食管癌的筛选临床辅助诊断方面都有显著的优势。

促血管生成素-2和血管内皮生长因子在结直肠癌组织中的表达

目的探讨促血管生成素-2(Ang-2)及血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌组织及血液中的表达,研究其与肿瘤疾病分期的关系。方法采用实时荧光定量PCR检测结直肠癌患者正常组织、癌旁组织及腺癌中Ang-2、Tie-2mRNA的表达,采用酶联免疫竞争法检测Ang-2及VEGF在正常组织、癌旁组织及腺癌和外周血中的表达。结果癌组织Ang-2mRNA和Tie-2mRNA表达与正常组织有明显差异(P<0.05),相关分析表明,2者表达存在着明显的相关(r=0.879,P=0.000)。癌组织Ang-2和VEGF含量与正常组织有明显差异(P<0.05),与癌旁组织有明显差异(P<0.05)。癌外周血液Ang-2含量与正常对照外周血有明显差异(P<0.05),与癌肠系膜血无明显差异(P>0.05)。肿瘤组织中Ang-2和VEGF含量与疾病分期明显相关,肿瘤患者显著高于正常对照组(P<0.05),Dukes'C期和D期显著高于A期和B期(P<0.05)。结论在大肠腺癌组织中,Ang-2、Tie-2及VEGF的过度表达对肿瘤的血管生成和发展过程起着重要作用。

缺氧对人视网膜色素上皮细胞促血管生成素-1和促血管生成素-2表达的影响

目的探讨缺氧环境下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞中促血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)和促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)表达变化及其可能的机制。方法将人RPE细胞培养在厌氧箱中,以建立缺氧模型。按缺氧时间0h、1h、4h、12h和24h分为5组,观察Ang-1、Ang-2与缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的变化;另取4h作为观察点,按处理因素分为缺氧对照组和HIF-1α抑制剂3-(5’-hydroxymethyl-2’-furyl)-1-benzyl indazole(YC-1)处理组,YC-1浓度分别为1μmol·L-1、10μmol·L-1和100μmol·L-1,观察抑制HIF-1α后对Ang-1和Ang-2表达的影响。应用免疫荧光染色法和Westernblot分别检测Ang-1、Ang-2与HIF-1α蛋白的表达。结果常氧条件下人RPE细胞内可见Ang-2蛋白表达,未见Ang-1及HIF-1α蛋白表达;缺氧条件下Ang-1和Ang-2分别与HIF-1α共表达于RPE细胞胞质中。HIF-1α与Ang-1在缺氧早期呈上升趋势,其中HIF-1α于缺氧后4h表达最高(0.451±0.022,与0h相比t=5.401,P<0.05),24h后有所下降;Ang-1于缺氧后24h表达最高(1.342±0.059,与0h相比t=20.100,P<0.01);Ang-2表达几乎不变(1.542±0.129、1.621±0.131、1.574±0.146、1.624±0.027,与0h相比t=0.044、0.673、0.244、0.700,均为P>0.05)。浓度为1μmol·L-1、10μmol·L-1和100μmol·L-1的YC-1均可有效抑制HIF-1α蛋白的表达(t=21.583、27.154、27.431,均为P<0.01)。HIF-1α蛋白表达下调后,Ang-1蛋白表达也随之受到抑制(t=9.492、15.487、17.942,均为P<0.05),而Ang-2蛋白表达无明显变化(t=0.859、0.178、1.565,均为P>0.05)。结论缺氧条件下人RPE细胞表达Ang-1上调,并与HIF-1α表达具有时相关系,Ang-2无明显变化;抑制HIF-1α表达后,Ang-1表达随之降低。提示在脉络膜新生血管生成过程中Ang-1的表达可能受HIF-1α选择性调控。