大鼠下颌下腺卵泡刺激素、黄体生成素的分布及与促性腺激素释放激素受体的共定位研究

目的 研究卵泡刺激素 (FSH)和黄体生成素 (LH)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体 (GnRHR)共定位的关系。 方法 采用邻片免疫组织化学共定位方法。 结果 大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管及颗粒曲管上皮细胞均呈FSH和LH免疫反应阳性 ,阳性颗粒分布在细胞质内 ,细胞核阴性。邻片共定位结果显示颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞同样呈FSH免疫反应阳性 ,大部分的GnRHR免疫反应阳性细胞呈LH免疫反应阳性 ,小部分呈免疫反应阴性。两种免疫反应阳性物质均分布在细胞质内 ,细胞核阴性。 结论 大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管和颗粒曲管上皮细胞可能以自分泌或旁分泌的GnRH调节自身合成与分泌FSH和LH。

补肾促排方对大鼠卵巢颗粒细胞黄体生成素受体和卵泡刺激素受体的影响

目的通过体外实验阐述补肾促排方治疗多囊卵巢综合征的药理学作用机制。方法提取与鉴定大鼠卵巢颗粒细胞,提取补肾促排方水溶液。实验分为补肾促排方低、中、高剂量组和空白对照组,分别相应处理分离与鉴定的大鼠卵巢颗粒细胞24 h后提取mRNA,48 h后提取蛋白。通过RT-PCR和Wester-blot法分别检测各组黄体生成素受体(LHR)和卵泡刺激素受体(FSHR)mRNA和蛋白表达水平。结果补肾促排方水溶液能够显著上调大鼠卵巢颗粒细胞LHR和FSHR mRNA和蛋白表达水平(P均<0.05),且呈现显著的浓度梯度依赖效应。结论补肾促排方通过上调卵巢颗粒细胞LHR和FSHR的表达,促进卵泡的发育与排出,从而起到治疗多囊卵巢综合征的作用。

促黄体生成素受体在雌性山羊背根神经节中的表达分析

采用免疫组织化学SP法检测雌性山羊颈-4、胸-6、腰-2节段背根神经节(DRG)中促黄体生成素受体(LHR)的表达水平及分布特征,研究DRG中是否有促黄体生成素(LH)作用的靶细胞以及LHR在DRG中的分布特点。结果显示:在颈-4、胸-6DRG中,LHR免疫反应阳性物质主要分布在中小型神经元胞体中,LHR为强阳性或中等阳性;而大型神经元胞体不着色,LHR为阴性反应。在腰-2DRG中,LHR免疫反应阳性物质在中小型神经元胞体中的分布特征与在颈-4、胸-6DRG中的分布特征相似;但LHR在大型神经元胞体上为弱阳性反应。图像分析结果显示:颈-4、胸-6、腰-2DRG内神经元胞体上LHR的相对表达量极显著高于节内其它阳性结构(P<0.01)。另外,在颈-4、胸-6、腰-2DRG三节段之间,节内阳性神经元胞体上LHR的相对表达量也存在显著性差异(P<0.01或0.05)。研究表明,雌性山羊DRG中存在LHR,且中小型神经元胞体是LH发挥作用的主要靶细胞,揭示LH可能会通过作用于躯体-内脏感觉DRG内中小型神经元胞体上的LHR来参与调节动物机体各器官的温度觉、痛觉和触觉的传递以及与伤害性刺激等有关的感觉神经活动。

胰岛素对卵巢颗粒细胞黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体表达的影响

目的 :研究胰岛素 ( INS)对猪卵巢颗粒细胞黄体生成素 /绒毛膜促性腺激素( L H/ CG)受体表达的影响 ,探讨高胰岛素血症可能在多囊卵巢综合征 ( PCOS)卵泡发育停滞中的作用。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 ( RT-PCR)及其蛋白免疫印迹 ( Westernblot)法分别对加药处理的 4组猪卵巢颗粒细胞检测 LH/ CG受体的 m RNA及其蛋白表达。结果 :RT-PCR结果表明卵泡刺激素 ( FSH) +INS组 ( 0 .2 47± 0 .0 44)与 FSH组( 0 .1 61± 0 .0 2 3 )相比 L H/ CG受体 m RNA表达明显增强 ( P<0 .0 5) ;FSH+L H+INS组( 0 .2 40± 0 .0 3 0 )与 FSH+L H组 ( 0 .1 2 1± 0 .0 1 3 )相比 ,L H/ CG受体 m RNA表达明显增强 ( P <0 .0 1 )。 Western blot结果表明 FSH +INS组 ( 570 2 .3± 81 5.9)、与 FSH组( 3 81 3 .0± 3 48.5)相比 L H/ CG受体蛋白表达明显增强 ( P<0 .0 5) ;FSH+L H+INS组( 5898.8± 93 3 .8)与 FSH+L H组 ( 2 42 1 .0± 3 41 .5)相比 L H/ CG受体蛋白表达明显增强 ( P<0 .0 1 )。结论 :INS可以协同 FSH及 L H增强卵巢颗粒细胞 L H/ CG受体的表达 ,推测高胰岛素可能通过增强 L H+CG受体表达使 PCOS患者发育至窦状卵泡阶段的卵泡颗粒细胞过早黄素化 ,导致卵泡发育停滞。

抗苗勒管激素Ⅱ型受体、促卵泡激素受体、促黄体生成素受体与卵巢储备关系

目的:探讨不同卵巢储备女性卵泡液及颗粒细胞中抗苗勒管激素Ⅱ型受体(AMHRⅡ)、促卵泡激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)表达及其相关性。方法:选取2016年12月30日—2019年5月30日在天津爱维医院行体外受精-胚胎移植女性110例,根据患者卵巢功能分为卵巢功能正常组43例、卵巢功能减退(DOS)组37例、卵巢早衰(POF)组30例。获取各组卵泡液及颗粒细胞,qRT-PCR法检测AMHRⅡ、FSHR、LHR m RNA的相对表达量。结果:POF组年龄、体质指数、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)高于正常组和DOS组,窦卵泡个数、获卵个数、AMH、雌二醇(E2)、孕酮(P)低于正常组和DOS组(P<0.05)。AMHRⅡ、FSHR、LHR相对表达量POF组最低、DOS组次之、功能正常组最高(P<0.05)。相关性分析显示,正常组FSHR与LHR、AMHRⅡ表达量呈正相关,LHR与AMHRⅡ表达量呈正相关(均P<0.05);DOS组FSHR与LHR、AMHRⅡ表达量呈正相关,POFFSHR与AMHRⅡ表达量呈正相关(P<0.05)。结论:不同卵巢储备女性AMHRⅡ、FSHR、LHR表达量存在差异,提示其可能参与了卵巢储备异常的发生。

促黄体生成素受体在雌性山羊颈动脉体的分布

检测促黄体生成素受体(LHR)在雌性山羊颈动脉体(CB)中存在及其分布特点,为促黄体生成素(LH)是否对CB起调节作用提供形态学基础。取雌性山羊的CB进行LHR免疫组织化学(SP)法染色观察与分析。结果表明:LHR免疫阳性物质在颈动脉体中分布广泛;镜下可见,在CB的小球结构内,Ⅰ型、Ⅱ型细胞的细胞膜LHR免疫阳性物质呈棕黄色,为强阳性,在其细胞质和细胞核中LHR免疫阳性物质呈黄色,为中等阳性;CB的间质组织中,血管内皮细胞LHR免疫阳性物质呈棕黄色,为强阳性;此外间质还可见许多点状或线状的非细胞阳性结构,呈淡黄色,为弱阳性。对实质细胞群和间质组织平均光密度的分析结果表明,CB的实质细胞是LH作用的主要靶细胞之一,提示LH可能通过CB实质细胞上的LHR来介导生物学效应,影响CB的实质细胞对血液内化学刺激的感知,间接的影响动物机体心血管的功能。

补肾中药对雌性大鼠下丘脑胞浆雌二醇受体及去势后血清促黄体生成素随龄变化的影响

16月龄大鼠下丘颜胞浆E_2—R数量明显低于3月龄组(P<0.05),去势后血清LH水平未见明显升高。16月龄补肾组(熟地、首乌、枸杞、菟丝子、淫羊藿、鸡血藤,给药4个月)下丘脑胞浆E_2—R数量明显高于同龄对照组(P<0.05),接近3月龄对照组水平,且去势后血清LH与3月龄组同样显示有意义的升高(P<0.05)。结果表明,补肾中药对雌性大鼠下丘脑胞浆E_2—R数量及下丘脑—垂体对外周性激素反馈应答能力的随龄变化有一定的纠正作用。

黄体生成素/人绒毛膜促性腺激素受体在卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探讨黄体生成素/人绒毛膜促性腺激素受体(luteinizing hormone/human chorionic gonadotropin receptor,LH/hCGR)与卵巢癌临床病理因素间的关系。方法 :采用免疫组化法检测从南通大学附属医院获得的卵巢组织芯片(含癌上皮性卵巢癌石蜡标本139例,交界性卵巢肿瘤石蜡标本43例,良性卵巢肿瘤组织石蜡标本12例,正常卵巢石蜡标本48例)中LH/hCGR的表达,并分析其与卵巢肿瘤临床病理特征之间的关系。结果 :LH/hCGR在卵巢癌中的表达水平显著低于正常卵巢或良性病变卵巢组织(均P<0.05);LH/hCGR的表达与卵巢癌的国际妇产科联合会(International Federation of Gynecology and Obstetrics, FIGO)分期和转移相关(P<0.05); Kaplan-Meier分析显示低表达LH/hCGR的卵巢癌患者总体生存率明显降低(P<0.05); Cox回归多因素分析显示,LH/hCGR低表达是卵巢癌的独立预后因素。结论:LH/hCGR的表达与卵巢癌的发生和发展有关,有望成为评估卵巢癌转移及预后的生物学标志之一。

黄体生成素和绒毛膜促性腺激素受体的结构和功能

本文介绍黄体生成素和绒毛膜促性腺激素 (hCG)

免疫组化法检测促黄体素受体在多浪羊和卡拉库尔羊卵巢上的分布

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,试验采用免疫组织化学SP方法研究促黄体生成素受体(luteotropic hormone receptors,LHR)在多浪羊和卡拉库尔羊卵巢组织中的分布与表达,分别选取相邻的5张连续切片,光镜观察、图像分析。结果显示,多浪羊与卡拉库尔羊的LHR阳性物质主要见于膜细胞、卵母细胞、颗粒细胞和血管周围间质,尤其在膜细胞和卵泡颗粒细胞的胞质中分布最多。原始卵泡卵母细胞中便有LHR受体阳性物质分布,在各级卵泡中LHR阳性细胞数量和染色强度随卵泡发育呈正向增加趋势。

注射ACTH对断奶母猪卵泡促黄体素受体表达及卵泡液中类固醇激素合成的影响

[目的]为了探讨应激对断奶母猪繁殖障碍的影响机制,本试验以促肾上腺皮质激素(ACTH)注射所致的应激模型来研究应激对断奶母猪卵泡液中类固醇激素合成及卵泡促黄体素受体表达的影响。[方法]对10头苏淮断奶母猪进行颈静脉插管手术,随机均分为对照组与ACTH处理组(n=5)。手术第3天开始以每次间隔8 h给ACTH处理组母猪注射ACTH(1 IU·kg-1),对照组母猪注射生理盐水,连续注射7 d。利用ELISA方法检测受试母猪卵泡液中类固醇激素及血浆中皮质醇的含量变化;利用荧光定量PCR测定胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、17α-羟化酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、类固醇激素合成急性期调节蛋白(St AR)、3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、促黄体素受体(LHR)等基因的表达;利用免疫组化法检测CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD蛋白的表达。[结果]人工注射ACTH后40%的受试母猪出现排卵障碍;其血浆中皮质醇的含量极显著升高(P<0.01);母猪卵泡液中雌二醇、雄烯二酮含量均显著下降(P<0.05);CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD基因表达量降低,其编码的蛋白CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD表达量也明显下降。[结论]ACTH注射所致应激过程中,受试母猪的皮质醇含量升高可导致类固醇合成酶的基因、蛋白表达量明显下降,从而影响类固醇激素的合成及卵泡的发育。类固醇激素合成降低及LHR的低表达影响断奶母猪的正常排卵。

促性腺激素及其受体的研究进展

优化和提高动物繁殖性能是动物生产的主题，在品种改良、地方品种的保护以及优良品种的推广等方面都具有重要意义。而调控动物繁殖性能的根本出发点，在于对生殖内分泌机理的掌握与运用。众所周知，垂体是影响动物繁殖的重要内分泌器官，其所合成分泌的促性腺激素（Gonadotropin，GTH），包括卵泡刺激素（Follicle stimulating hormone，FSH）和黄体生成素（Luteinizing hormone，LH）对动物的性发育、性成熟、性周期和妊娠分娩过程具有重要的调节作用。因此，其合成分泌规律、生理调节机理及其特异性受体的分布和分子表达规律的研究，一直为国内外学者所关注。

金钱鱼促性腺激素受体基因克隆及其在性腺发育不同时期mRNA表达水平的分析

为了解金钱鱼促性腺激素受体基因(GtHRs)在金钱鱼性腺发育中的作用,采用反转录PCR(Rt-PCR)与cDNA末端快速克隆(RACE)首次克隆了金钱鱼卵泡刺激素受体(FSHR)和促黄体生成素受体(LHR)的cDNA序列全长。FSHR的cDNA全长2538 bp,编码702个氨基酸,LHR的cDNA全长3315 bp,编码722个氨基酸,它们都含有属于糖蛋白激素受体(GHR)家族的典型跨膜螺旋结构区域(TM helix)。同源性分析显示金钱鱼GtHRs与欧洲鲈的相似性最高,且GtHRs在进化中具有一定的保守性。性腺不同时期表达分析表明,在卵巢Ⅰ期时,FSHR高水平表达,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期时在较低水平表达。在精巢中,FSHR的表达水平在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期逐渐升高并在Ⅲ期达到最高,Ⅳ期开始下降。LHR在金钱鱼卵巢和精巢的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期低水平表达,在Ⅳ期表达水平达到最高。研究表明,FSHR在金钱鱼性腺发育早期扮演重要作用,LHR与卵子和精子的成熟有关。

疏肝法对围绝经期综合征肝郁证模型大鼠卵巢黄体生成素受体及促卵泡生成素受体的影响

目的 探讨疏肝法对围绝经期综合征（perimenopausal syndrome, PMS）肝郁证模型大鼠卵巢黄体生成素受体（luteotropic hormone receptor, LHR）及促卵泡生成素受体（follicle stimulating hormone receptor, FSHR）基因的作用机制。方法 以随机数字表法将SPF级围绝经期SD大鼠分为肝郁证模型组、柴胡疏肝散组及丹栀逍遥散组，每组8只。采用慢性束缚结合孤养的方法，建立PMS肝郁证大鼠模型，另有3月龄育龄期大鼠作为青年对照组。柴胡疏肝散组大鼠灌胃柴胡疏肝散水煎剂4.0 g（生药量）/（kg？d），丹栀逍遥散组灌胃丹栀逍遥散水煎剂4.9 g（生药量）/（kg·d），肝郁证模型组及青年对照组灌胃等体积生理盐水，1次/d，连续灌胃3周。放射性免疫技术检测大鼠血清雌二醇（estrodiol, E2）、促卵泡生成素（follicle stimulating hormone, FSH）及黄体生成素（luteotropic hormone, LH）水平；qRT-PCR法检测大鼠卵巢LHR、FSHR mRNA表达水平。结果 与肝郁证模型组相比，柴胡疏肝散组血清FSH[（4.32±0.33）mIU/ml比（5.24±0.45）mIU/ml]、丹栀逍遥散组血清 LH[（6.76±0.52）mIU/ml比（8.08±0.59）mIU/ml]水平显着下降（P＜0.01）；丹栀逍遥散组卵巢FSHR[（4.17±1.04）比（6.14±1.04）]、LHR mRNA[（8.17±2.21比15.38±6.00）]表达水平降低（P＜0.01）。结论 疏肝法治疗PMS肝郁证大鼠的机制可能与调节性激素水平及降低卵巢LHR、FSHR表达水平相关。

补肾化瘀方对不孕大鼠促排卵及卵巢促黄体生成素受体表达的影响

目的:探讨补肾化瘀方对肾虚血瘀型不孕促进卵泡发育及排卵的可能机制。方法:建立雄激素致大鼠不孕模型,通过阴道图片筛选各组大鼠,采用光镜、原位杂交、免疫组织化学等方法,对补肾化瘀方治疗前后的雄激素致不孕大鼠的卵巢的形态学及其卵巢促黄体生成素受体(LHR)mRNA的表达进行观察。结果:中药组、西药组与模型组在卵巢重量及各级卵泡数目上比较差异有统计学意义(P<0.05);中药组与西药组在各级卵泡数目上比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型组LHRmRNA的表达无论在表达面积和表达强度上都不及正常组、中药组和西药组(P<0.05);中药组与正常组在表达面积和表达强度上比较无差异。结论:补肾化瘀方可以显著增加大鼠卵巢重量及各级卵泡总数;且通过影响大鼠卵巢局部LHRmRNA的表达,促进卵泡发育,从而达到促排卵的目的。

IGF-I对卵泡内膜细胞增殖及其LH受体表达的影响

目的 :通过研究胰岛素样生长因子 (IGF- I)对猪卵巢卵泡内膜细胞增殖及促黄体生成素受体(LH受体 )表达的影响 ,提出 IGF- I可能在卵泡发育中的作用。方法 :采用细胞免疫组化、Westernblot及 MTT法进行研究。结果 :1 .细胞免疫组化结果显示 LH+IGF- I组及 IGF- I组与 LH组相比 ,LH受体表达明显增强 ,有统计学差异 ,分别为 P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 ;而 LH+IGF- I组与 IGF- I组相比无统计学差异。Western blot结果发现 LH、IGF- I及 LH+IGF- I三组之间 LH受体蛋白强度的比较与细胞免疫组化结果相一致 ,此外还发现 LH受体蛋白为三个不同分子量的蛋白 ,它们分别为 6 0 k Da,5 0 k Da,3 5 k Da。 2 .IGF- I使卵泡内膜细胞增殖 ,LH的促增殖作用不明显 ,IGF- I及LH+IGF- I组与 LH组相比差异显著 ,P<0 .0 1 ;LH+IGF- I组与 IGF- I组相比无统计学差异。结论 :本实验发现 IGF- I及它与 LH协同作用 ,可以增强卵泡内膜细胞 LH受体的表达 ,同时又可以促进卵泡内膜细胞增殖 ,为进一步阐明多囊卵巢综合征 (PCOS)

莱芜黑山羊卵巢FSHr、LHr的免疫组化定位研究

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促性腺激素(GTH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,对处于非繁殖季节的莱芜黑山羊卵巢中FSHr、LHr分布进行免疫组化SABC方法定位.分别选取相邻的6张连续阳性切片,光镜观察、图像分析.结果显示:FSHr、LHr阳性细胞主要分布于卵泡颗粒细胞、膜细胞、卵母细胞、血管周围间质,尤其以在卵泡颗粒细胞、膜细胞的胞质中分布最多.原始卵泡卵母细胞中便有两种受体阳性物质分布,在各级卵泡中两种受体阳性细胞数量、染色强度随卵泡发育水平呈正向增加趋势.

LHR在雌性山羊颈前神经节中的分布

采用免疫组织化学SP法检测促黄体生成素受体(LHR)在雌性山羊颈前神经节(SCG)中的分布特点及表达情况。结果显示,在雌性山羊SCG中,LHR免疫反应阳性物质主要分布在神经元胞体的胞膜和胞质中,为LHR强阳性或中等阳性。部分神经元胞体可见其突起,为LHR中等阳性。图像分析表明,LHR在神经元和非神经元中的表达量呈极显著差异(P<0.01)。研究表明,SCG具备接受LH作用的条件,提示LH可能会影响SCG交感节后神经元胞体对其支配的头面部腺体、血管以及眼睛、咽喉等器官的调控作用。

FSHR,LHR基因单核苷酸多态性与多囊卵巢综合征的关系

目的:探讨促卵泡生成素受体基因(FSHR)、黄体生成素受体基因(LHR)的单核苷酸多态性与PCOS发病及临床特征的关系。方法:对比204例PCOS患者及215例健康女性FSHR680,LHR312等位基因及基因型分布情况;并对比FSHR680 Asn/Asn、Asn/Ser、Ser/Ser三种基因型,LHR312 Ser/Ser、Asn/Ser、Asn/Asn三种基因型临床特征的差异;分析PCOS患者FSHR680,LHR312等位基因突变数目与FSH,LH及T的关系。结果:1FSHR680位及LHR312位点等位基因及基因型分布频率在PCOS患者及健康女性中均无明显差异(P>0.05)。2FSHR680位点的Ser/Ser组FSH,LH值显著高于Asn/Ser,Asn/Asn组,差异具有统计学意义(P<0.05);而三种基因型间年龄,BMI,E2,T,DHEA-S,FPG,Fins,PCO%及高雄激素%均无显著差异(P>0.05)。而在LHR312 Ser/Ser,Asn/Ser及Asn/Asn三种基因型中,年龄,BMI,FSH,LH,E2,T,DHEA-S,FPG,Fins,PCO%及高雄激素%均无显著差异(P>0.05)。3随着FSHR680及LHR312等位基因突变数目的增加,FSH、LH值显著增加;而T无明显改变。结论:FSHR680、LHR312多态性与PCOS的发病无关,但FSHR680多态性与FSH、LH分泌相关,而与高雄激素血症无关。