湖羊促黄体素受体基因(LHR)外显子11多态性与繁殖性能相关性研究

通过聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法检测湖羊促黄体素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)基因外显子11核酸序列的单核苷酸多态性。结果表明,在6对引物扩增产物中,只有引物P2和P6的扩增片段具有多态性,引物P2扩增区存在AA和AB两种基因型,在1147位发生G→A的突变;引物P6扩增区存在3种基因型,CC、CD和EE型,经序列检测,CC型与CD型间存在T→A的突变,CC型与EE型间存在C→A的突变。将各基因型湖羊的产羔性状进行统计分析,结果表明,P2位点AB型湖羊产羔数较AA型高,平均为2.05±0.76,P6位点CD基因型湖羊产羔数较CC和EE型高,为2.50±0.55,经SPSS分析,不同基因型个体产羔数间差异不显著(P>0.05)。

促黄体素受体研究进展

促黄体素 (L uteinizing hormone re-cepter,L HR)是哺乳动物生殖调控的重要激素 ,生理作用是通过其受体介导的。近几年来 ,L HR的研究已取得了重大的进展。文章对 L HR结构、受体的配体结合域、激素 -受体相互作用、信号转导与 G蛋白偶联、受体糖基化及脱敏、受体基因结构与调节、受体表达及受体突变对生殖机能的影响等方面进行了综述 ,以促进 L

3个品种绵羊超数排卵处理后卵巢上促黄体素受体表达差异的研究

本研究旨在探讨在具有不同超数排卵效果的绵羊品种中,在进行超排处理后其卵巢上的促黄体素受体(LH receptor,LHR)分布情况,为进一步研究二者的相关性以及据此为改进超排效果奠定基础。根据超数排卵效果的优劣依次选择3个我国地方绵羊品种:小尾寒羊、白滩羊和乌珠穆沁羊。在常规超排最后一次注射FSH后的8、16和24h分别各取3只绵羊的卵巢,采用免疫组织化学法观察3个品种绵羊卵巢上LHR的分布情况。结果表明:LHR存在于3个地方品种绵羊卵巢有腔卵泡的颗粒细胞和膜细胞上,但在早期卵泡上不表达;各品种绵羊的近成熟卵泡上LHR阳性细胞率都显著高于相应的次级卵泡(P<0.05);3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率存在显著差异,从高到低依次为小尾寒羊>白滩羊>乌珠穆沁羊(P<0.05)。籍此可以得出以下结论:LH对绵羊早期卵泡发育的诱导可能不需要通过其特异性受体起作用;3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率与超排效果是一致的,表明超数排卵的效果可能与绵羊卵巢上的LH受体分布存在一定的联系。

雌性哺乳动物促卵泡素受体与促黄体素受体的结构与表达

本文从雌性哺乳动物促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)的结构及在卵泡发育过程中的表达和功能加以综述,指出FSHR及LHR在卵泡的生长发育、优势化及排卵等方面具有重要的功能。

成年公猪睾丸及附睾中促黄体素受体mRNA表达的研究

试验采用FQ—PCR技术进行了成年公猪睾丸及附睾中促黄体素受体mRNA表达的研究，结果表明：促黄体素受体mRNA不仅在睾丸内表达，在附睾中也有表达；睾丸、附睾中促黄体素受体mRNA的表达量分别为（1．42±0．08）×10^9 copies／mL和（6．54±0.21）×10^9 copies／mL，睾丸两组织间促黄体素受体mRNA表达量无明显差异（P〉0．05）。

促卵泡素受体和促黄体素受体在乏情期和怀孕期牦牛卵巢中的表达

应用免疫组织化学技术和图象分析方法对乏情期、怀孕期牦牛卵巢的促卵泡素受体(FSHR)、促黄体素受体(LHR)的表达特点进行了研究。结果表明,牦牛卵巢的皮质、髓质、颗粒层和膜内层、黄体中都分布有FSHR和LHR。且牦牛卵巢皮质、髓质中的FSHR光密度值在乏情期显著大于怀孕期(P<0.05);怀孕期无黄体侧卵巢颗粒层和膜内层中FSHR光密度值均大于乏情期和怀孕期有黄体侧(P<0.05)。怀孕期有黄体侧卵巢皮质处LHR光密度值最大,乏情期次之,怀孕期无黄体侧最小,各组间差异显著(P<0.05);在怀孕期无黄体侧卵巢髓质处LHR光密度值显著小于怀孕期有黄体侧和乏情期(P<0.05);在乏情期、怀孕期无黄体侧和怀孕期有黄体卵巢颗粒层和膜内层处LHR光密度值之间差异均不显著(P>0.05)。表明牦牛卵巢中FSHR和LHR随着生殖阶段的不同而变化。

注射ACTH对断奶母猪卵泡促黄体素受体表达及卵泡液中类固醇激素合成的影响

[目的]为了探讨应激对断奶母猪繁殖障碍的影响机制,本试验以促肾上腺皮质激素(ACTH)注射所致的应激模型来研究应激对断奶母猪卵泡液中类固醇激素合成及卵泡促黄体素受体表达的影响。[方法]对10头苏淮断奶母猪进行颈静脉插管手术,随机均分为对照组与ACTH处理组(n=5)。手术第3天开始以每次间隔8 h给ACTH处理组母猪注射ACTH(1 IU·kg-1),对照组母猪注射生理盐水,连续注射7 d。利用ELISA方法检测受试母猪卵泡液中类固醇激素及血浆中皮质醇的含量变化;利用荧光定量PCR测定胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、17α-羟化酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、类固醇激素合成急性期调节蛋白(St AR)、3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、促黄体素受体(LHR)等基因的表达;利用免疫组化法检测CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD蛋白的表达。[结果]人工注射ACTH后40%的受试母猪出现排卵障碍;其血浆中皮质醇的含量极显著升高(P<0.01);母猪卵泡液中雌二醇、雄烯二酮含量均显著下降(P<0.05);CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD基因表达量降低,其编码的蛋白CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD表达量也明显下降。[结论]ACTH注射所致应激过程中,受试母猪的皮质醇含量升高可导致类固醇合成酶的基因、蛋白表达量明显下降,从而影响类固醇激素的合成及卵泡的发育。类固醇激素合成降低及LHR的低表达影响断奶母猪的正常排卵。

促黄体素释放激素和多巴胺拮抗物对鲇促性腺激素释放的作用

以珠江流域站为研究对象，分别在性腺发育早期、性腺发育晚期、性腺发育成熟与产卵前期、性腺退化期注射促黄体素释放激素类似物和多巴胺Ｄ２受体拮抗物，处理后６ｈ、１２ｈ、２４ｈ测定血液中的促性腺激素水平变化。结果表明，在性腺发育的各个时期，促黄体素释放激素类似物和多巴胺Ｄ２受体拮抗物联合注射能显著刺激站促性腺激素分泌；站脑垂体促性腺激素的分泌受下丘脑释放的促性腺素释放激素和多巴胺的双重调节，多巴胺只能抑制促性腺素释放激素诱导的促性腺激素分泌。在建立站人工繁殖技术时，可采用促黄体素释放激素类似物和多巴胺Ｄ２受体拮抗物联合注射方法。

抑制素A对牦牛颗粒细胞FSH、LH及其受体表达的影响

为了探明抑制素A(INHA)对牦牛卵泡颗粒细胞中促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)与其受体结合发挥的作用,通过体外培养牦牛卵泡颗粒细胞,采用免疫荧光技术(IF)检测促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)在颗粒细胞中的分布情况,用不同浓度外源性INHA(0、1.25、2.5、5、10、20 ng·mL^(-1))作用12 h后,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测颗粒细胞中FSHβ、LHβ、FSHR、LHR基因的表达情况,采用酶联免疫分析试验(ELISA)检测细胞内外FSH、LH的含量。结果显示,FSHR和LHR在颗粒细胞质与细胞核中均有表达。FSHβ和LHβ基因在颗粒细胞中的表达随INHA浓度的增大呈先降后升的趋势;INHA浓度接近5 ng·mL^(-1)时,FSHβ表达最低;INHA浓度接近10 ng·mL^(-1)时,LHβ表达最低;FSHR和LHR基因的表达与INHA浓度呈负相关。INHA浓度接近5 ng·mL^(-1)时,颗粒细胞内外FSH含量最低;INHA浓度接近10 ng·mL^(-1)时,颗粒细胞内外LH含量最低;其他INHA浓度下,当颗粒细胞内容物中FSH和LH含量降低时,细胞上清中含量升高。综上所述,INHA对FSHR和LHR基因在颗粒细胞中的表达存在明显的抑制作用,并且影响FSHβ和LHβ基因在颗粒细胞中的表达。研究表明INHA可以抑制牦牛卵泡颗粒细胞中FSH、LH与其受体的结合;同时,INHA对颗粒细胞内外FSH和LH的含量具有重要调节作用。本研究为进一步探索抑制素对雌性牦牛生殖调控的影响提供了理论依据。

LHRH受体:治疗三阴性乳腺癌的潜在靶点

近年来三阴性乳腺癌(TNBC)的发病率持续增长,手术、化疗及放疗仍是其常规治疗方式。TNBC有较高的化疗耐药性及易生复发转移的特性,且缺少治疗的内分泌及靶向药物,恶性程度较高。针对促黄体素释放激素(LHRH)受体研制的AEZS-108等靶向药物不仅对人TNBC细胞的增殖有抑制作用,而且毒性反应较轻。2013年开展的该药物治疗TNBC的Ⅱ期临床试验结果虽未公布,但以LHRH受体为靶点治疗TNBC的临床疗效值得期待。

日粮能量对育成柴鸡卵巢促卵泡素受体、促黄体素受体表达的影响

本研究旨在探究日粮能量对育成柴鸡卵巢促性腺激素受体的影响及其机理。选用育成柴鸡14周龄36只采用单因素方差随机试验,随机分成3个处理,每个处理3个重复,每个重复4只鸡,分别饲喂低能、高能、对照的日粮,试验时间为28d,采用荧光定量反转录-聚合酶链反应,研究日粮能量水平对柴鸡性成熟过程中卵巢促卵泡受体和促黄体受体mRNA表达的影响。结果显示:育成柴鸡FSHR、LHR的表达低能组与对照组差异不显著,但是与高能组差异极显著。结果说明,日粮能量通过下丘脑-垂体-性腺轴影响育成柴鸡生殖机能。

性腺外FSH受体和LH受体表达研究进展

雌性动物的性腺是卵巢,性腺外的生殖组织器官主要包括:输卵管、子宫颈、子宫肌层等,其中子宫是内分泌器官,除有局部内分泌功能外,还可能对下丘脑-垂体-卵巢轴有调节作用。促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的生理功能是通过其FSHR、LHR来介导的,其受体在性腺和性腺外均有表达。本文主要对雌性性腺外生殖组织器官上两种受体的表达加以综述。

不同培养时间对鸡卵泡颗粒细胞孕酮、雌激素分泌水平及FSHR、LHR基因表达的影响

目的:研究培养不同时间鸡卵泡颗粒细胞孕酮和雌激素的分泌水平,促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)的基因表达水平,推断体外培养时间对颗粒细胞激素分泌及相关受体基因表达的影响。方法:通过细胞体外培养的方法,分别于0 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集鸡卵泡颗粒细胞上清液,采用ELISA法测定细胞上清液内的孕酮及雌激素分泌水平,并采用荧光定量PCR技术检测颗粒细胞内FSHR和LHR基因表达情况。结果:在培养初期0 h^48 h孕酮和雌激素分泌量显著降低(P<0.05),随着培养时间增加到72 h两种激素的分泌量又开始增加,并达到培养初期水平,培养至96 h细胞内孕酮和雌激素分泌量再次降低;颗粒细胞FSHR和LHR m RNA的表达水平则随着培养时间的增加而降低(P<0.05)。结论:体外培养的卵泡颗粒细胞内孕酮和雌激素的分泌量随体外培养时间的延长呈先降低后升高的趋势,可能与体外培养细胞的生长状态相关,从整体上看随着培养时间的延长,细胞内孕酮和雌激素的分泌量均降低,可能与两种促性腺激素受体FSHR和LHR基因表达量下降相关。

日粮赖氨酸水平对绿壳蛋种鸡生产性能和血清激素及卵巢FSH和LH受体mRNA表达的影响

本试验旨在研究日粮赖氨酸水平对绿壳蛋种鸡生产性能、血清激素及卵巢FSH受体(FSHR)、LH受体(LHR)mRNA表达的影响。试验选用30周龄的新杨父母代绿壳蛋鸡720只,随机分成6组,每组5个重复,每个重复24只鸡,分别饲喂赖氨酸水平为0.60%、0.65%、0.70%、0.75%、0.80%和0.85%的日粮。结果表明:0.65%赖氨酸水平组产蛋率显著高于0.85%水平组(P<0.05),0.70%赖氨酸水平组料蛋比显著低于0.60%水平组(P<0.05);血清FSH和LH含量均以0.70%赖氨酸水平组最高(P<0.05);与0.75%和0.85%赖氨酸水平组相比,0.65%水平组卵巢FSHR mRNA的表达量显著提高(P<0.05);血清FSH含量与卵巢FSHR、LHR mRNA表达量呈现较强相关性(r^2>0.85)。二次曲线分析表明,以产蛋率和料蛋比为主要评价指标,绿壳蛋种鸡赖氨酸需要量分别为0.70%和0.73%。综上所述,日粮赖氨酸水平为0.70%~0.73%时能够提高新杨绿壳蛋种鸡(31~43周龄)生产性能、血清促性腺激素含量及卵巢FSHR基因的表达。

鱼类促性腺激素受体研究进展

促性腺激素FSH/LH在脊椎动物的生殖调控中占据中心地位,其生理功能主要通过其特异性受体FSH-R/LH-R所介导.研究表明,鱼类FSH-R和LH-R主要在性腺表达,也在脑、肝脏、肾脏、脾脏等部位表达,主要调控生殖细胞的成熟和最后的排卵及排精.

莱芜黑山羊卵巢FSHr、LHr的免疫组化定位研究

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促性腺激素(GTH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,对处于非繁殖季节的莱芜黑山羊卵巢中FSHr、LHr分布进行免疫组化SABC方法定位.分别选取相邻的6张连续阳性切片,光镜观察、图像分析.结果显示:FSHr、LHr阳性细胞主要分布于卵泡颗粒细胞、膜细胞、卵母细胞、血管周围间质,尤其以在卵泡颗粒细胞、膜细胞的胞质中分布最多.原始卵泡卵母细胞中便有两种受体阳性物质分布,在各级卵泡中两种受体阳性细胞数量、染色强度随卵泡发育水平呈正向增加趋势.

绵羊LHR基因PCR-SSCP多态性与繁殖性状的关联分析

通过聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法检测绵羊品种(湖羊、晋中绵羊和陵川半细毛羊)促黄体素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)基因外显子11核酸序列的单核苷酸多态性,并研究该基因多态性对湖羊性早熟和产羔数的影响。结果表明:在6对引物扩增产物中,只有引物P2和P6的扩增片段具有多态性,引物P2扩增区存在2种基因型,分别为LL和LM型,在3个绵羊品种中均未检测到MM型;引物P6扩增区存在6种不同的SSCP带型,经序列比对分析存在T2053A、A2044T和G2003A的错义突变。湖羊和晋中绵羊P2扩增区基因型分布差异不显著(P>0.05),而与陵川半细毛羊均存在极显著差异(P<0.01);P6扩增区的2 053、2 044、2 003位点各基因型分布在湖羊和晋中绵羊间差异不显著(P>0.05),而与陵川半细毛羊间存在显著差异。P2扩增位点仅陵川半细毛羊的基因分布不符合哈迪-温伯格定律;P6扩增区湖羊和晋中绵羊在各突变位点的等位基因频率处于群体平衡状态,陵川半细毛羊除2 003突变位点基因分布处于群体不平衡状态外,其余突变位点的等位基因频率分布符合哈迪-温伯格定律;LHR外显子11区不同基因型湖羊各胎次产羔数差异不显著(P>0.05),表明LHR外显子11对湖羊的性早熟和高繁殖力性状没有显著影响。

金堂黑山羊LHR基因片段的克隆及序列分析

采用RT-PCR法从刚断奶健康金堂黑山羊卵巢组织中扩增出促黄体素受体(LHR)基因部分序列,序列长度分别为1799和1724个碱基。2个序列与牛相比,中间都缺失266 bp;与猪变体B有相同的终止密码,初步确定2个序列为山羊LHR的2个变体。2个序列蛋白没有7个跨膜结构,但有N连接糖基化位点。结果表明:金堂黑山羊LHR RNA中存在一种替代剪接机制,采用不同的相位导致读码框的终止。

雌性哺乳动物LH及其受体的研究进展

本文综述了雌性哺乳动物促黄体素及其受体的结构及其在卵泡发育过程中的表达和功能。阐明了促黄体素及其受体在卵泡的生长发育、优势化及排卵等方面的重要功能。

LHRH及4F_3B_(10)对体外培养HeLa细胞作用的研究

为了研究促黄体素释放激素(LHRH)及4F3B10对宫颈癌He La细胞的作用,试验以Westernblot方法检测了细胞上LHRH受体的表达情况,并利用CCK-8试剂盒检测了LHRH及4F3B10对HeLa细胞的影响。结果表明:LHRH作用He La细胞48 h后,细胞透明并有着较强折光性;在一定浓度范围内,LHRH浓度与细胞增长呈正相关关系;而4F3B10作用He La细胞48 h后,细胞色暗,折光性较差,一定浓度4F3B10与细胞增长呈负相关关系。说明在一定浓度范围内LHRH促进He La细胞生长,而4F3B10抑制He La细胞生长并具有诱导细胞凋亡作用。