常见红细胞添加剂成分对双花扁豆凝集素与A1红细胞反应的影响

目的探索常见试剂红细胞添加剂中糖类物质和金属离子螯合剂成分对双花扁豆凝集素(Dolichos Biflorus Agglutinin,DBA,又称抗-A_(1))与A_(1)红细胞间血清学反应凝集强度的影响,为减少临床检测假阴性结果和凝集素功能特性研究提供数据支持,也为当前实验室A_(1)抗原鉴定质控实验提出改进方案。方法以生理盐水为基础红细胞稀释液,在反应体系中分别加入梯度稀释的糖溶液(葡萄糖、蔗糖、甘露醇)和棋盘滴定的强金属离子螯合剂(E_(DTA-Na_(2)))和二价金属阳离子(Ca^(2+)、Mg^(2+)),对不同反应条件下DBA-A_(1)红细胞凝集强度进行评估。结果在DBA-A_(1)红细胞反应体系中C_(E_(DTA-Na_(2)))>0.6 mM时出现了明显的凝集抑制现象,提高C_(Ca)^(2+)或C_(Mg)^(2+)可减弱高浓度E_(DTA-Na_(2))对DBA-A_(1)红细胞凝集强度的影响;另一方面,体系中糖类物质浓度的增高也使DBA-A_(1)红细胞凝集强度产生明显减弱,加入0.6%~5%葡萄糖溶液,1.3%~10%蔗糖溶液或5%甘露醇溶液时,DBA-A_(1)红细胞凝集明显减弱。结论红细胞添加剂中的E_(DTA-Na_(2))和糖类物质对-A_(1)红细胞反应存在凝集抑制,是血型血清学检测中植物凝集素制剂使用的重要干扰因素。

液状保存血液红细胞保存损害作用的研究

为探讨不同温度对血液液状保存时保存损害机制的影响和相应的防范措施 ,取 10名健康献血员静脉血 ,混合于CP2D A保存液中 ,均分为 2组 ,保存于 0℃和 4℃环境条件下 ,分别于设定的时间 (第 2 1天和第 4 2天 )以shafiq UR rehman法检测膜磷脂 ,同步法检测Na+ K+ ATP酶、纯化PDE法检测CaM、分光光度法检测LPO等指标。结果表明 ,固定温度条件下随时间的延长血液过氧化反应增强 ,保存损害作用增加 ;同一时期内保存损害作用随温度的降低而减轻 ,以 4℃组血液老化最明显。提示血液保存损害作用随保存期的延长而增强 ,随保存温度的降低而改善 ,0℃组保存血液的质量优于

聚乙烯吡咯烷酮和葡萄糖在冰冻干燥保存人红细胞中的效果研究

冰冻干燥(冻干)保存人红细胞在临床输血和战伤救治方面具有重要意义。一些研究表明糖类能提高细胞膜的耐干燥性。试验采用葡萄糖和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为主要保护剂进行红细胞的冻干保存研究。首先对影响红细胞葡萄糖吸收率的因素,如浓度、孵育温度和时间进行了优化筛选,而后将负载葡萄糖的红细胞与保护液混合并进行冻干保存。结果表明;红细胞对葡萄糖的吸收率依赖于外源葡萄糖浓度、孵育温度以及时间的变化。另外,随着PVP浓度的上升,保护液的结晶起始温度也随之下降,但过度的玻璃化不利于红细胞的冰冻干燥。试验冻干保存的红细胞再水化后的游离血红蛋白浓度低于1g/L。总之,采用PVP和葡萄糖冻干保存红细胞是可行的,但是如何降低PVP对细胞的渗透压伤害是今后研究的重点。

MAP红细胞保存液与生理盐水混悬洗涤红细胞的临床疗效比较

目的探讨MAP红细胞保存液与生理盐水混悬的洗涤红细胞的临床疗效,为临床精准输血提供理论依据。方法选取2016年6~12月郑州两家三甲医院300例输注洗涤红细胞患者,其中输注生理盐水混悬的洗涤红细胞148例(盐水组),输注MAP红细胞红保存液混悬的洗涤红细胞152例(红细胞保存液组),分别检测两组患者输血前、后24小时的血红蛋白,观察两组患者治疗前、后血红蛋白(Hb)变化,同时观察输血不良反应发生情况。结果两组患者输血前后组内Hb水平比较,输血后均有提高,差异均有统计学意义(P<0.05),组间Hb水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);红细胞保存液组发生输血不良反应2例,盐水组未发生,但两组输血不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 2种洗涤红细胞均安全有效,但对于肾功能不全患者、老年反复输血的溶血性贫血患者、过敏体质患者,应输注生理盐水混悬的洗涤红细胞。

MAP红细胞悬液保存期内生化指标的动态观察

检测保存期内不同时间MAP红细胞悬液的pH值、Na+、K+、C l-、氨、乳酸、游离血红蛋白的含量,以保证红细胞悬液保存期的质量。

NO对不同天龄红细胞保存质量影响的初步研究

目的探讨一氧化氮(NO)对采用percoll密度梯度离心法分离的不同天龄红细胞(RBC)功能状态的影响作用。方法 1)将Percoll细胞分离液配制成5个不连续密度梯度(1.091,1.098 5,1.106,1.113 5,1.121 g/ml),将RBC按平均密度大小分层,依次吸取每层RBC分别做RBC内丙酮酸激酶(PK)含量测定并计算天龄、RBC内ATP含量检测、RBC变形性评价,以及RBC膜蛋白Western Blot。2)从同1份滤白全血中取出2等份,1份为实验组:加适宜浓度的NO溶液,另1份为对照组:加等体积红细胞保存液Ⅲ,分别于保存初期、中期、末期检测2组血液及不同天龄RBC的功能。结果 1)同1份样品经密度梯度离心分离后,RBC随着密度的增大,PK活性逐渐减小(6.192±1.25、5.165±0.84、4.538±0.76,P<0.05)、天龄逐渐增加(10.409、34.957、49.945)、ATP含量逐渐减少(4.755±0.037、3.242±0.445、2.929±0.153,P<0.01)、RBC变形性逐渐降低(200-1切变率下,0.381±0.005、0.340±0.033、0.281±0.028、P<0.05)、RBC膜带3蛋白量减小、聚簇化的带3蛋白量增多、膜上结合的IgG含量增多。2)NO组与对照组相比,全血各指标无明显差异,但NO组保存中、末期老年RBC变形性明显高于对照组(200-1切变率下,中期:0.290±0.021 vs 0.276±0.021、0.229±0.024 vs 0.211±0.027;末期:0.277±0.017 vs0.263±0.019、0.213±0.038 vs 0.193±0.039,P<0.01)。结论 RBC功能随密度的增大逐渐降低;NO可明显改善老年RBC的变形性,但对全血无明显影响。

海藻糖和蔗糖在人红细胞冰冻干燥保存中的效果比较

目的 比较海藻糖和蔗糖在人红细胞冰冻干燥保存过程中对细胞的保护效果。方法 将浓缩红细胞、含有不同浓度海藻糖或蔗糖的30％聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按照1:3(V/V)的比例混合,-80℃冰箱中预冻1h,入冻干机内冻千处理后,用37℃等渗缓冲液快速水化洗涤样品,然后将其分为3个处理组:组1为30％PVP组(简称PVP组),组2、3为含有5％、10％和15％海藻糖或蔗糖的30％PVP组(简称海藻糖组或蔗糖组),测定各项指标。结果 冻干红细胞再水化后,海藻糖组的细胞回收率[(18.86±4.63)％、(21.73±7.32)％和(18.01±4.53)％]显著低于PVP组[(45.97±11.77)％](P<0.01);蔗糖组,蔗糖浓度为5％、10％时,细胞回收率分别为(37.40±2.90)％和(37.77±4.78)％,二者显著低于PVP组(P<0.05),但当蔗糖浓度升至15％时,细胞回收率[(42.54±10.25)％]和PVP组无显著差异;血红蛋白回收率,海藻糖组[(50.00±3.47)％、(40.91±9.09)％和(52.09±7.01)％]显著低于PVP组[(77.27±3.63)％](P<0.05),而蔗糖组和PVP组无显著差异,且显著高于海藻糖组(P<0.05)。洗涤后3组的游离血红蛋白浓度均<1g/L,其余各项指标的对比关系类似于水化后指标。结论 在冻干保护液中添加不同浓度的海藻糖或蔗糖对于提高冰冻干燥保存后红细胞的回收率和血红蛋白浓度作用不明显;

红细胞冻干保存前对海藻糖的负载

目的探寻红细胞负载海藻糖的有效方法,评价负载海藻糖对红细胞各项理化指标的影响。方法设实验组(负载海藻糖红细胞)和对照组(未负载海藻糖红细胞),使用硫酸-蒽酮法测定胞内海藻糖含量,检测负载后红细胞各项理化指标,通过流式细胞术检测负载后红细胞膜的完整性。结果在37℃条件下,红细胞对海藻糖的摄取随胞外海藻糖浓度的增加而增多,当海藻糖浓度为800mmol/L,水浴7h,红细胞负载海藻糖可达到有效浓度;且2组红细胞各项理化指标比较差异无统计学意义(P>0.05);流式结果显示红细胞在高渗环境中负载海藻糖后,细胞膜结合很少量Annexin-V-FITC,并且破损细胞能被有效清除。结论红细胞37℃孵育7h,胞外海藻糖浓度为800mmol/L,能有效摄取海藻糖,且保持红细胞的理化稳定性和膜结构完整性。

保存期间试剂红细胞血型相关膜蛋白抗原性研究

目的研究红细胞膜蛋白抗原稳定性随保存时间变化。方法 D抗原、Fy^a抗原、Jk^a抗原、在保存节点（0、14、28、42 d）,对上述红细胞血型抗原抗原性进行检测。结果在标化后的抗体范围,使用国际标准抗体,应用流式细胞术,在42 d检出对比组之间的D抗原抗原性差异具统计学意义（下降11. 3%; P〈0. 05）; 42 d时,应用微柱凝胶卡,使用国际标准品（下降33%）、单克隆IgG-D（下降66%）、IgM-D（下降26%）,检出对比组之间的D抗原抗原性差异具统计学意义（P〈0. 01）,Fy^a抗原抗原性检出对比组之间的差异具统计学意义（下降33%,P〈0. 05）,Jk^a抗原抗原性未检出,对比组之间的差异具统计学意义。结论实验室应定期对谱细胞进行质控,对于弱抗体的检测宜使用较新鲜的谱细胞或新鲜细胞进行检测及确认。

洗涤红细胞保存期延长效果研究

目的探讨用红细胞保存液(MAP)保存洗涤红细胞,观察洗涤红细胞的保存期能否延长。方法去白细胞悬浮红细胞400ml(2U)20袋用0.9%Nacl生理盐水洗涤后,终产品分别用0.9%Nacl生理盐水和红细胞保存液(MAP)4℃保存。在不同时间段分别无菌留样,检测血红蛋白、上清蛋白质、溶血率、无菌试验。结果用红细胞保存液(MAP)保存洗涤红细胞,分别对制备后9、18、23、27d的血液样品进行检测,检测盐水组和MAP组血红蛋白含量的差异无统计学意义,结果上清蛋白质含量和溶血明显增加,无菌试验均(-),检测结果均符合国家要求,达到满意效果,可用于临床。结论在闭合无菌环境中制备且最后以红细胞保存液(MAP)混悬保存,洗涤红细胞保存期可适当延长。

GZB试剂红细胞4℃保存液的研究及其临床应用

本文介绍一种新的试剂红细胞４℃保存液及其应用。结果表明，用该液保存试剂红细胞在４～６℃下可保存１２０天，较国内外目前已报道的保存期（最长５６天）明显延长。该法不需特殊设备，试剂原料成本低，来源方便易购，保存细胞具有保存期长，使用方便，抗原特异性及强度不受影响，随时可取用等特点。使用效果良好。

悬浮去白细胞红细胞保存的相关质量考察

随着去白细胞血液制品在基础理论、实验研究和临床观察等方面的进步与发展,发达国家的去白细胞产品从储存后由医院血库过滤,过渡到了储存前由采供血机构过滤。我国去白细胞血液制品的应用,正处于从医院血库/床边型向血站型发展的过渡时期,

人红细胞负载海藻糖后冻干保存过程的初步研究

目的探讨红细胞冻干长期保存的有效方法,并评价复水后红细胞各项理化指标的变化。方法设对照组(常规条件下保存的红细胞)和实验组(负载海藻糖冻干-复水后红细胞),在37℃条件下,红细胞负载海藻糖7h后,采用主要成分为含15%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和150mmol/L海藻糖的缓冲液作为保护液,在设定的降温程序下进行红细胞的冻干保存。冻干后置37℃的再水化液快速水化,检测各项理化指标。结果红细胞冻干再水化后红细胞和血红蛋白回收率均在80%以上,且各项理化指标与常规保存的对照红细胞间差异无显著性(P>0.05)。结论红细胞在37℃孵育7h的条件下负载海藻糖后进行冻干,复水后能保持细胞的理化稳定性和结构形态的完整性,为进一步研究长期冻干保存红细胞奠定了基础。

远距离外出采血对红细胞保存质量的影响

目的比较远距离外出采血对红细胞保存质量的影响。方法 20份街头献血屋采集的血液采集后置2～6℃冰箱存放,2 h后分离出红细胞悬液放入2～6℃冰箱贮存,为对照组;20份外出采血血液采集后置室温30～33℃1～2 h,18～22℃路程4 h后分离出红细胞悬液放入2～6℃冰箱贮存为实验组(远距离采血组)。在保存期内每隔3 d检测两组血液红细胞ATP,血浆游离血红蛋白(FHb),棘形红细胞率,细胞外液K+浓度。结果 4个检测值在各时间点的变化都存在非常显著性差异(P<0.01)。随着储存时间的延长实验组的红细胞ATP含量下降的幅度逐渐大于对照组,d 34实验组红细胞ATP值为1.78±0.22 umol/g.Hb,但两组间的变化未见统计学差异(P>0.05)。实验组FHb浓度及棘形红细胞率的升高随时间的变化明显大于对照组,两组间对比有统计学差异(P<0.05)。细胞外液K+浓度在d1的均值两组间差异有统计学意义(P<0.05),且随着储存时间的延长而明显升高,但2组间的差异不显著(P>0.05)。结论因血液受采血后温度、振动及时间等的综合作用,远距离外出采血会影响保存期后期的红细胞质量,应尽早使用。

保存前白细胞滤除对红细胞悬液质量和保存的影响

为研究保存前白细胞滤除对于红细胞悬液质量的影响,用一次性使用去白细胞采血袋(规格200mL)采集健康无偿献血者全血30袋,采集后6h内进行白细胞滤除。通过离心将全血制备为去白细胞红细胞悬液,4℃保存。收集过滤前后全血血样,分别检测过滤前后红细胞计数(RBC),白细胞计数(WBC),游离血红蛋白(FHb),乳酸脱氢酶(LDH),K+,及全血容积变化。计算红细胞回收率和白细胞去除率。取10袋在4℃保存35d后,检测FHb,LDH及K+,并与相同环境保存35d后的未去白红细胞悬液进行比较。结果在保存前进行去白细胞滤除的红细胞悬液其白细胞残留量为(0.72±0.46)×106个/U,白细胞去除率为(97.59±1.47)%,红细胞回收率(87.74±2.42)%。过滤前后全血的血样FHb指标统计学差异无显著性(P>0.05),滤后LDH明显低于滤前(P<0.01)。滤后K+则高于滤前(P<0.01)。保存35d后,去白红细胞悬液K+与未去白组统计学差异无显著性(P>0.05),去白组FHb略高于未去白组(P<0.05),去白组LDH明显低于未去白组(P<0.01)。说明保存前白细胞滤除过程可能会对红细胞造成轻微损伤。但是,保存前白细胞滤除更有利于红细胞悬液的保存和输注安全,更适合临床尤其是白血病患者使用。

红细胞保存液保存冰冻解冻去甘油红细胞的效果

冰冻解冻去甘油红细胞为RH（-）血，是用于临床的主要血液成分，自20世纪70年代Meryman将甘油保存红细胞用于人体输血首获成功以来，冷冻血逐渐在临床输血治疗中得到推广。冷冻血经过洗涤去除了大部分白细胞、血小板、血浆蛋白，能降低不良输血反应的发生率并能随时储备，使临床患者输注更加方便，争取了抢救时间，本中心血站日常用生理盐水保存有效期仅为24h，为使临床更方便用血避免血液浪费，现用红细胞保存液（MAP）保存冰冻解冻去甘油红细胞，观察是否可以延长其保存期，结果如下。

应用血红蛋白释放试验研究红细胞保存液甘露醇腺嘌呤磷酸二氢钠对红细胞的保护作用

为了研究红细胞保存液甘露醇腺嘌呤磷酸二氢钠(mannitol adenine sodium dihydrogen phosphate,MAP)对红细胞的保护作用,将红细胞悬液分为对照组和MAP组,将对照组加入等体积生理盐水和红细胞悬液,将MAP组加入等体积MAP液和红细胞悬液,4℃保存。取作用不同时间的两组反应液,利用血红蛋白释放试验(hemoglobin releasing test,HRT)比较血红蛋白释放差异,并测定相对溶解度。结果显示,相同时间MAP组的Hb释放量明显弱于对照组,红细胞的相对溶解度也较对照组显著降低。说明红细胞保存液能减弱Hb再释放,降低红细胞破膜率,保护红细胞。