丙型肝炎病毒基因变异及候选保守表位分析

ＨＣＶ分离株主要分为４个基因型（ＨＣＶⅠ～Ⅳ），各型间的氨基酸及核苷酸组成同源性均小于８０％，氨基酸变异率分别为Ｃ８％，Ｅ１３５％，Ｅ２／ＮＳ１５３％，ＮＳ３２７％，ＮＳ４３５％，ＮＳ５３９％．不同型别的ＨＣＶ有不同的地区分布特征．根据ＨＣＶ表达产物多肽的保守性、亲水性、抗原性及空间构型等特性，已在ＨＣＶ表达产物中鉴定出一些高度保守的候选Ｂ细胞表位及Ｔ细胞表位，其中Ｂ细胞表位一般为１２～４０肽，Ｔ细胞表位一般为７～９肽，这些Ｂ／Ｔ细胞保守表位的鉴定，将有助于推动ＨＣＶ的免疫治疗及疫苗研究的发展．

流感病毒血凝素表位通用疫苗设计的研究进展

尽管流感是一个可预防性疾病,但它仍然是一个持续性的公共卫生问题,据统计每年可导致数十万人死亡。由于流感病毒的高度可变性,不可避免地存在疫苗与流行毒株抗原不一致的风险,迫切需要一种具有广泛保护作用或通用的流感病毒疫苗,以预防所有季节性、人畜共患和新出现的大流行流感病毒。流感病毒表面糖蛋白血凝素具有广谱中和抗体识别的位点,被认为是通用疫苗研发的关键靶标,因此血凝素保守保护性表位及中和表位的鉴定对于设计通用流感疫苗和新的靶向治疗至关重要。在这里,本文综述了基于流感病毒血凝素保守表位及中和表位的通用疫苗设计研究进展。

基于甲型流感病毒血凝素及联用其他保守表位的通用流感疫苗研究进展

流感病毒每年造成大量感染及死亡病例,对人类健康构成重大威胁,接种疫苗是预防流感病毒感染的最有效措施。然而,目前的季节性流感疫苗只能预防密切匹配的流行毒株,即使有了广泛的监测和每年的重新制定,每年更新的疫苗仍然比快速演变的病毒落后一步,往往导致匹配度不高或疫苗效力低。由于甲型流感病毒的进化变异相对复杂,利用一系列创新技术开发通用流感疫苗对流感病毒提供广泛和持久的保护,是预防流感流行的新思路和新手段。本文对近3年来以血凝素(hemagglutinin,HA)为靶位的通用疫苗研究进行全面整理,综述了基于流感病毒全HA、HA茎部、串联HA和其他保守表位的通用疫苗设计方法及其在疫苗研究中取得的最新进展,同时比较了不同技术优劣和免疫程序及策略的影响等,并强调了有待克服的潜在挑战,为成功开发通用疫苗提供经验和借鉴。

人类免疫缺陷病毒/艾滋病患者中和抗体保守表位氨基酸变异研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒/艾滋病(HIV/AIDS)患者中和抗体保守表位氨基酸变异特征,为开展中和抗体免疫治疗和疫苗设计奠定理论基础。方法RTPCR及nestPCR扩增HIV/AIDS患者HIV1外膜envC2～C3区基因,双脱氧终止法进行核酸序列测定,翻译为氨基酸序列,并与HIV1SequenceDatabase参考毒株中和抗体表位数据比对辨别其保守表位氨基酸突变情况。结果HIV1外膜蛋白gp120C2～C3区,HIV感染者和AIDS患者CD4结合位点(CD4BS)、CD4诱导(CD4i)、2G12三种类型中和抗体保守表位氨基酸均存在突变,两组病例表位突变率差异无统计学意义(均P>0.05);CD4BS保守表位突变有370E/Q(12.1%),370E/K(4.5%),266A/S(1.5%),368D/E(1.5%);CD4i保守表位突变有370E/Q(12.1%),370E/K(4.5%),381E/D(7.6%),381E/V(1.5%);2G12保守表位突变有295N/V(19.7%),295N/T(6.1%),295N/D、295N/K、295N/E(各1.5%),297T/I(9.1%),297T/S、297T/N(各1.5%)。结论我国HIV/AIDS患者HIV1外膜蛋白gp120C2～C3区中和抗体CD4BS、CD4i、2G12保守表位氨基酸均存在突变,但尚处于低突变水平;不同类型中和抗体保守表位各氨基酸位点的变异程度有差异。

甲型流感病毒血凝素HA蛋白保守抗原表位的鉴定

流感大流行对人类健康危害严重,流感病毒型别多,易变异,现有疫苗不能诱导机体产生不同亚型间的交叉保护力,造成预防困难,因此,精细定位甲型流感病毒保守抗原表位是研究重点。本研究通过使用单克隆抗体和计算机模拟预测两种技术,采用免疫学方法和生物信息学方法,获得了4株识别血凝素(HA)保守抗原表位的单克隆抗体,以这4株单抗为研究工具,最终明确HA茎部区域多肽STQNAID(409~415 aa)是甲型流感病毒HA保守区抗原表位,为开发甲型流感通用疫苗提供理论和实验基础。

丙型肝炎病毒多表位抗原基因的构建与免疫原性研究

摘要丙型肝炎病毒(HCV)基因易发生变异,尤其是含中和抗原表位的高变区1(HVR1)变异性最大.模拟HVR1的B细胞表位具有涵盖多种天然表位的抗原特性,保守的T细胞表位具有各型间的相对保守性.为解决HCV高变性造成的疫苗研究障碍,我们选取HCV E2区HVR1(384～410aa)模拟B细胞表位9条、C区的保守CTL表位2条(35～44aa,132～140aa)、NS3区保守的CTL表位1条(1073～1081aa)及NS3区保守的Th表位1条(aa1251～1259),各表位之间以插入3个氨基酸为连接臂,人工合成上述13条表位基因串联的HCV多表位抗原基因(mfc).将mfc与gst基因融合,表达了多表位抗原蛋白GST-MFC.同时,构建了白介素-2信号肽基因、PADRE表位基因和mfc基因串联的候选HCV DNA疫苗,即质粒pVAX1.0-st-mfc.以GST-MFC蛋白免疫家兔和质粒pVAX1.0-st-mfc免疫小鼠,采用ELISA和Western blot方法,应用10条具有代表性的HCV HVR1合成肽进行检测,证明有9条HVR1合成肽能与所有免疫动物血清反应,交叉反应率(crossr eactivity,CR)为90%.应用HCV抗体阳性的感染者血清与多表位抗原GST-MFC蛋白进行反应,证明其反应识别率(reactivity frequency,RF)为75%.上述结果表明,筛选合成的HCV多表位抗原基因mfc具有HCV中和抗原表位的特征,可作为HCV疫苗研制的候选基因.

HIV-1广谱中和性单克隆抗体的研究进展

从HIV感染患者血清中分离的针对HIV-1包膜上保守表位的中和性单克隆抗体(mAb)很多,识别的表位分别是HIV-1gp120上CD4结合位点(CD4bs),gp41的跨膜前域MPER,gp120表面包膜的高甘露聚糖,gp120上V2/V3环,这些抗体对HIV-1疫苗免疫原的研究设计至关重要。本文主要综述了各中和性单克隆抗体的结构特征,识别的表位,抗体与病毒包膜之间的相互作用。

用ELISA检则牛BDV特异性抗体

荷兰研究人员研制了一种简便、可靠快速的阻断ELISA法,检测牛血清、血浆和散装奶中牛腹泻病毒(BDV)特异性抗体。本法使用针对瘟病毒非结构肽NS3上不同高度保守表位的2个单克隆抗体WB112和WB103。用这种ELISA测试了1000份现地血清。

通用型流感疫苗的研究进展

疫苗接种是目前预防和控制流感大流行的最有效方法。由于流感病毒具有高度的变异性,急需研制一种通用型流感疫苗来应对流感易变异的难题。本文主要从流感病毒的保守性表位及其基于该保守表位通用型流感疫苗的研究进展,产生交叉保护作用的机制和提高交叉保护作用的途径进行了综述。

基于甲型流感病毒血凝素茎部区的流感通用疫苗的研究进展

自16世纪人们发现流感以来,在世界范围内流感每年都会夺去几十万人的生命。疫苗是预防和控制流感病毒感染的最重要手段。传统的流感疫苗针对同一亚型流感病毒的保护效果较好,但不能有效地预防不同亚型流感病毒的感染。近年来研究人员试图研发能同时预防多种流感病毒亚型感染的流感通用疫苗。基于甲型流感病毒血凝素茎部区的流感通用疫苗是近年来流感疫苗研究的一个热点,本文将简要介绍有关这方面的研究进展。