巴氏杜氏藻八氢番茄红素合成酶侧翼调控序列的克隆与分析

研究表明八氢番茄红素合成酶(PSY)是巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil)类胡萝卜素代谢途径中的第一个关键调节酶。本实验采用基于LA-PCR的基因组步移法分别设计两组基因特异引物pSP1-3及tSP1-3,克隆巴氏杜氏藻PSY(DbPSY)的启动子和终止子序列,并利用在线启动子分析软件分析其保守调控序列。最后利用生物信息学方法分析预测DbPSY的蛋白质结构。分析结果表明,DbPSY启动子具有两个保守调控序列:BOXLCOREDCPAL和GT1GMSCAM4,其中BOXLCOREDCPAL受紫外光诱导,上调下游基因的表达,GT1GMSCAM4受盐调控,促进下游基因的表达。蛋白结构分析表明,DbPSY的N端在邻近物种间具有较大的多样性。我们推测DbPSY的微调与启动子保守序列及蛋白质N端序列的多样性相关。