不同浓度保护剂对超速冻存小鼠卵巢组织的效果观察

目的:寻找适宜的小鼠卵巢组织超速冻存低温保护剂种类及浓度。方法:以不同浓度二甲亚砜(DMSO)和丙二醇(PROH)(1.5 mol/L、3 mol/L)作低温保护液时,观察超速冻存法对小鼠卵巢组织的冻存效果。解冻后行自体和异体卵巢的肾被膜下移植。通过对受体动情期的恢复及激素水平测定等方法对冻存效果进行观察。结果:低浓度组DMSO和PROH动情期的恢复率分别为75%和71%;血清E2分别为(10.5和16.8)×10-9 mmol/L,与作为对照的慢速程序法组无显著性差异(66.7%和100%;11.7×10-9 mmol/L和12.1×10-9 mmol/L)。高浓度动情期的恢复率分别为100%和62.5%;血清E2分别为14.1×10-9 mmol/L(DMSO)和7.4×10-9 mmol/L(PROH),与慢速组比也无显著性差异。结论:两种浓度的DMSO和PROH均适用于超速冻存法,尽管高浓度的DMSO在超速冻存时可取得较好的动情周期恢复率,但血清E2 水平的结果以低浓度的PROH为好。

冷冻保护剂对神经干细胞球导入过程的模拟分析

建立了以刚性球孔隙模型为基础的神经干细胞球的冷冻保护剂导入模型。在结合跨膜传质扩散的基础上,分别对细胞内空间和细胞外空间列传质扩散方程,并通过计算,得出了不同条件下细胞内外浓度以及细胞膜两侧浓差随时间和空间的变化曲线。从结果中可以看出,细胞外的保护剂浓度变化较快,在第5 s即可接近渗透平衡;细胞内的保护剂浓度变化则较为平缓。保护剂扩散系数对于导入过程影响不大,增加神经球尺寸及溶质胞膜渗透系数可以有效地减少导入过程中的细胞浓差。低温导入过程中细胞浓差较常温导入时更大,对细胞的渗透性损伤也更为强烈。研究结果对优化冷冻保护剂的导入程序有重要的指导意义。

酿酒酵母X330高浓度发酵时耐酒精性能的初步研究

在完全合成培养基条件下,就渗透压保护剂和营养物质对一株产高浓度酒精的酿酒酵母X330高浓度发酵时耐酒精性能的影响进行了初步研究。结果表明,与渗透压相比,营养缺乏对酿酒酵母高浓度发酵时酒精耐受性能可能起着更为关键和重要的作用。发酵培养基中各营养元素对耐酒精性能的影响不同,由高到低的顺序是酵母抽提物>蛋白胨>硫酸镁>维生素C=磷酸二氢钾>氯化钙=硫酸铵。渗透压保护剂(甘氨酸和脯氨酸)能有效提高菌体酒精耐受性能。当甘氨酸添加浓度为20mmol/L或脯氨酸添加浓度为10mmol/L时,发酵终点酒精浓度最高,菌体于30℃在18%(V/V)酒精冲击下的存活率最大,且均高于对照组(未添加甘氨酸且未添加脯氨酸)水平,但甘氨酸的促进作用强于脯氨酸。