SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段原核表达载体的构建及表达

为构建SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段的原核表达载体,采用人工合成法合成SARS病毒E2蛋白3′端cDNA;用常规分子克隆方法将此cDNA片段克隆入原核表达载体pBV220中,经温度诱导和SDS-PAGE电泳证明外源蛋白表达。结果表明合成的E2蛋白cDNA经序列测定,与报道的SARS病毒相应序列一致,内切酶酶切及PCR均得到456bp的cDNA片段,与实验设计一致,证明此cDNA片段已插入pBV220载体中;SDS-PAGE电泳表明有外源蛋白表达。结论:用本文介绍的方法可成功地合成并克隆SARS病毒E2蛋白原核表达载体,此项研究结果为SARS的诊断和预防奠定了基础。