反向遗传操作技术产生全禽源致弱的H5N1亚型禽流感病毒的免疫保护性试验

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标,评价其免疫和交叉免疫保护作用。结果表明:反向遗传操作技术为构建新型的流感疫苗株提供了更好的方法。

恶性疟原虫多次部分换血猕猴模型的建立及在疫苗宿主保护性试验中的初步应用

本实验以多次部分换血的方法 ,使恶性疟原虫在猕猴体内进行短期的生长发育 ;并以此模型进行了抗疟疫苗保护性试验 ,以探索此猴模在疟原虫研究中的应用。结果显示 ,恶性疟原虫在多次部分换血猕猴模型中生长良好 ;在猴模外周血中可以见到除疟原虫配子体外的各种虫体形态 ;原虫生存期为 13～ 14d;3只实验猴最高感染率分别达到 8.6 %、6 .5 %和 5 .4% ;接种了恶性疟原虫复合多价疫苗 -痘苗病毒的猕猴 ,在疟原虫的攻击试验中受到了保护。结果表明 ,通过多次部分换血的方法可建立起供短期实验的恶性疟原虫 -猕猴模型 ;

人用精制Vero细胞狂犬病疫苗的保护性试验

用CTN 1V株生产的精制Vero细胞狂犬病疫苗腹腔免疫小鼠后 ,再用狂犬病毒街毒株SBD0 7脑内和肌肉攻击 ,结果表明稀释 5倍疫苗的保护率分别为 88 9%和 90 % ,且 5倍稀释疫苗的保护效果与原苗相当 ,此研究证明CTN 1V株能用来作为疫苗的生产毒株。

MDV-gB重组痘苗病毒诱导的免疫保护性试验

用MDV gB重组痘苗病毒RVV gB,HVT冻干苗、痘苗病毒WR株分别按试验程序,对细胞免疫及体液免疫检测试验中的1日龄SPF鸡进行免疫接种,并于15日龄对各组小鸡攻GA株强毒,后经过IFA检测抗体,以及以PHA为有丝分裂原检测淋巴C转化.结果表明,重组病毒和HVT冻干苗均获得较高保护,体液免疫差异不显著;细胞免疫在攻毒前差异不显著,但攻毒后第2d开始,RVV gB组淋巴细胞转化率明显高于HVT冻干苗.

柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7基因的克隆表达与保护性试验

【目的】克隆鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因并进行原核表达,检测表达产物的免疫原性,为鸡球虫基因疫苗的制备奠定基础。【方法】以纯化的柔嫩艾美耳球虫杨凌(Eimeria tenella YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株的SO7基因,对其测序后进行序列分析。将SO7基因克隆到表达载体pET-32a中,构建pET-SO7重组质粒,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达出重组蛋白,将重组蛋白纯化后免疫雏鸡,评价其免疫效果。【结果】鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因序列的开放阅读框(ORF)为651个碱基,共编码217个氨基酸。E.tenella YL株SO7基因与E.tenella LS18株、E.tenella BJ株、E.tenella GD株SO7基因ORF区序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%,其氨基酸序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%。SDS-PAGE分析表明,表达产物成功地表达出了分子质量为45ku的融合蛋白。各种抗球虫指标的测定结果显示,该蛋白对球虫感染鸡体具有一定的保护性。【结论】SO7基因具有很强的保守性,各虫株之间差异不大;重组蛋白具有一定的保护效果,适合用来制备基因疫苗。

新城疫LaSota活疫苗对基因Ⅶ型分离株的免疫保护性试验

从山东省发病鸡群分离鉴定了一株新城疫病毒（NDV），命名为SDLYOI。经蚀斑纯化后进行毒力测定和序列分析表明分离株SDLY01属于基因Ⅶ型NDV强毒。20只7日龄SPF鸡免疫新城疫活疫苗LaSota后14d{ff别用NDV标准强毒F48E8和分离株SDLYOI攻毒，同时设同日龄SPF鸡为对照组，未免疫任何疫苗。

恶性疟多表位疫苗在鼠疟的保护性试验

为寻找恶性疟原虫基因工程多表位疫苗保护性评价的模型动物,利用鼠约氏疟原虫（Plasmodium yoelii）及伯氏疟原虫小鼠（Phasmodium bergher）模型对本实验室构建的恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）多表位基因工程候选疫苗进行了体内保护性及免疫模式试验。结果在约氏疟原虫,先用该疫苗基因的大肠杆菌表达蛋白免疫、后用含同一基因的重组痘苗病毒加强免疫组与野生型痘苗病毒免疫组及空白对照相比,小鼠的死亡时间延长（P<0.01）。结果初步显示,约氏疟原虫鼠模可用作该基因工程多表位恶性疟原虫候选疫苗的保护性评价。

抗P30 McAb对弓形虫感染的保护性作用

用杂交瘤技术获得抗弓形虫Ｐ３０ＭｃＡｂ，按不同剂量分别与同等数量的弓形虫ＲＨ株（２×１０５／ｍｌ）作用后，经腹腔注射ＢＡＬＢ／ｃ鼠，发现该ＭｃＡｂ对弓形虫感染具保护性作用。ＲＨ株致死量试验显示：每鼠注射１０个虫体，１ｗｋ内死亡率达６２．５％，９ｄ内全部死亡，而在３．００ｍｇ的ＭｃＡｂ保护下注射１０５ＲＨ株虫体的小鼠可在１０ｄ内无一死亡。用目测概率法计算其ＥＤ５０为每鼠１．２３ｍｇ／１０５ＲＨ株虫体。对照组与实验组小鼠存活时间及存活率间经统计学检验均有显著性差异。

无细胞百日咳疫苗中活性PT的保护作用

目的 比较经基因工程方法脱毒的无细胞百日咳疫苗(APV)中不同含量活性PT的保护作用。方法 用小鼠保护性试验(AMPT)评价不同含量活性PT疫苗样品的百日咳效力,组织胺致敏试验(HST)检测不同含量PT样品中PT活性。结果 含5ng活性PT的疫苗与不含PT的疫苗效力差异无显著意义;含50ng活性PT疫苗与不含和含5ng活性PT的疫苗效力差异有显著意义。用HST肛温测定法可以检测到含50ng活性PT的样品中PT活性。结论 AMPT适用于高度脱毒或基因工程脱毒的APV的效力检定,HST肛温测定法可以证实APV中PT的活性。

氯苯胍防治兔球虫病扩大试验报告

家兔球虫病在全国各地较为普遍。关于防治本病的药物,国内外曾有不少研究,但并不广泛。大家的注意力大多集中于鸡球虫病,而对兔球虫病的防治研究较少。在国内曾使用过碘溶液、呋喃西林、呋喃唑酮以及中草药、大蒜、雷公藤、鸦胆子,等等。在国外,曾研究和使用的有:Amprolium,Sulfaguinoxaline:Salfachtoryrazin;Sulfadimethoxine(4～磺胺～2.6～二甲氧嘧啶);Sulfadim

致弱活毒疫苗可保护妊娠牛及其胚胎抵抗BDV感染

加拿大学者Cortese等对用牛腹泻病毒(BDV)1型毒株制得的致弱活毒疫苗进行保护性试验,只用18头肉用母犊(BDV阴性),其中12头免疫按种致细胞病变(NADL)BDV1型毒株的致弱活毒疫苗,另6头作对照。

特异性转移因子免疫活性检测

目的检测及探讨特异性转移因子的免疫活性。方法免疫保护性试验检测甲型副伤寒特异性转移因子对甲型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌攻击小鼠的不同保护作用,计算存活率。结果甲型副伤寒特异性转移因子对甲型副伤寒沙门菌攻击的小鼠的保护作用明显高于其它细菌攻击的小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。结论特异性转移因子的免疫活性既具有区别于非特异性转移因子的相对特异性,又具有针对特定抗原的绝对特异性。

吸附蝮蛇类毒素的免疫原性研究

用常规的效力试验方法对甲醛脱毒的吸附蝮蛇类毒素的免疫原性进行了观察。结果表明：经皮下２次基础免疫和１次加强免疫，家兔在免疫的１８个月内，血清中和抗体的滴度在０．０９０～０．２０９ｍｇ／ｍｌ（几何均数）之间，并能保护１０ｍｇ蝮蛇毒的攻击。免疫的豚鼠在基础免疫后的１４个月内，可对抗３１０．０～３８６．６小鼠单位（ＭＵ）／ｋｇ蝮蛇毒的攻击和再次攻击，提示该类毒素具有较好的免疫原性。

鸭疫里默氏杆菌贵州流行株蜂胶灭活疫苗制备

【目的】制备鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州流行株蜂胶灭活疫苗。【方法】选取RA血清2型贵州流行株(RA-SS-8株)为基础菌株,依次利用分光光度法和平板计数法测定细菌生长曲线,再进行灭活条件筛选,以蜂胶为佐剂制备RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,并进行无菌检验、安全性检验及免疫鸭攻毒保护性试验。【结果】分光光度法测定RA-SS-8株菌液D_(600 nm)值随培养时间变化显示,细菌在0~3 h时增殖缓慢,在3~10 h时增殖趋势明显加快,在10 h以后增殖逐渐趋于平缓,随着培养时间的延长,细菌最终进入衰亡期;平板计数法结果显示,RA-SS-8株D_(600 nm)值为0.1~0.8时,该菌处于对数生长期,且D_(600 nm)值与活菌数呈现良好的线性关系;RA-SS-8株最佳灭活条件为0.2%甲醛溶液、37℃灭活12 h;蜂胶灭活疫苗含菌量为3.810^(9)CFU/mL,蜂胶干物质含量为10 mg/mL;无菌检验巧克力琼脂培养基上未见菌落生长;安全性检验以2倍免疫剂量接种雏鸭在观察期内未表现出不良反应,大体病变观察未见明显病变;免疫鸭攻毒保护性试验显示,蜂胶灭活疫苗免疫组鸭对RA-SS-8株的攻击后保护率为70%,蜂胶灭活疫苗对试验鸭心脏、肝脏组织均具有良好的保护效果。【结论】本研究成功制备了RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,为蜂胶灭活疫苗制备和动物免疫试验奠定基础。

一种新的活毒牛疱疹病毒1型疫苗

最近,西班牙学者Alvarez等研制出了减弱活毒牛疱疹病毒1型（BHV1）疫苗（NobiBovac IBR）,进行了田间保护性试验并与目前使用的灭活多价IBR疫苗（IMV）或四价BHV1毒株疫苗（TS）进行比较。结果在免疫接种后第一个2周内,用NobiBovac免疫的动物中有94％发生血清转变。

锅炉给水加氧处理中钝化膜性能的试验研究

介绍了锅炉给水加氧处理中钝化膜的形成机理和保护性能,并对某厂1000MW超超临界机组锅炉给水加氧停止后钝化膜的保护性能进行了一系列的试验。试验研究结果表明锅炉给水在停止加氧后,钝化膜在很长一段时间仍具有保护性。同时,对锅炉给水采用间断性加氧方式的可行性进行了探讨。

一株兔出血症病毒变异毒株的分离与鉴定

2021年3月份河南省某养兔场肉兔疑似感染兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV),为了分离鉴定肉兔感染毒株,并对所分离毒株特性进行研究,试验对兔场送检的病死兔进行解剖、细菌与病毒分离、RT-PCR检测、纯净性检测、血凝性测定,并进一步进行半数致死量(LD;)、传统疫苗免疫兔攻毒保护试验和免疫原性测定。结果表明:病死兔剖检可见肝脏、心脏、肺脏等实质内脏器官广泛出血。病料未分离到细菌,RT-PCR检测鉴定感染病毒为RHDV;用分离株注射非免疫健康家兔后,兔48 h内死亡,症状表现和剖检病变与兔出血症相似;将所分离RHDV命名为HN株,其对人"O"型红细胞无血凝性,对兔的LD_(50)为1×10^(-6.77)/mL;灭活后免疫兔,能抵抗RHDV HN株攻击。说明养兔场肉兔感染了RHDV,且成功分离鉴定得到一株变异型RHDV,其具有良好的免疫原性。