保护素DX减轻老龄大鼠髋部骨折后急性肺损伤的作用及机制

目的探讨保护素DX(PDX)对髋部骨折后急性肺损伤的保护作用及相关机制。方法将30只24月龄的健康老龄雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和PDX干预组,每组10只。对照组和模型组在造模1 h后腹腔注射500μl生理盐水,PDX干预组于造模1 h后腹腔注射500μl浓度为0.002 mg/ml的PDX。所有大鼠于造模24 h后处死并采集相关标本。对各组肺组织进行病理评分,计算各组肺组织湿干质量比,检测各组动脉血氧分压,检测肺泡灌洗液中的总蛋白浓度及相关炎性因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]的含量,蛋白免疫印迹实验检测肺组织中Toll样受体9(TLR9)、核转录因子-kappaB(NF-κB)蛋白的表达水平,免疫组化实验检测肺组织中性粒细胞的髓过氧化物酶(MPO)。结果三组肺组织湿干质量比、肺泡灌洗液总蛋白、动脉血氧分压、肺损伤评分、TNF-α和IL-6水平、肺组织中TLR9、NF-κB的相对表达水平及组织中MPO比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组湿干质量比、肺泡灌洗液总蛋白、肺损伤评分、TNF-α和IL-6水平、肺组织中TLR9、NF-κB的相对表达水平及组织中MPO水平高于对照组,动脉血氧分压低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PDX干预组湿干质量比、肺泡灌洗液总蛋白、肺损伤评分、TNF-α和IL-6水平、肺组织中TLR9、NF-κB的相对表达水平及组织中MPO水平低于模型组,动脉血氧分压高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PDX能够明显降低老龄大鼠髋部骨折后的肺损伤程度并明显改善肺功能,这种作用与抑制肺组织中TLR9、NF-κB蛋白的表达和活化,从而抑制中性粒细胞聚集,减轻肺部炎症反应密切相关。

保护素DX对类风湿关节炎大鼠模型中PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

目的:研究保护素DX(PDX)对类风湿关节炎(RA)大鼠模型的治疗作用及机制,及其对PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法:通过皮下注射牛Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂诱导RA大鼠模型,建模后将SD大鼠随机分为4组:对照组(n=12):正常SD大鼠;RA组(n=12):RA模型大鼠;低剂量PDX处理组(n=12,L-PDX组):接受10μg/kg/d PDX治疗的RA模型大鼠;高剂量PDX处理组(n=12,H-PDX):接受20μg/kg/d PDX治疗的RA模型大鼠。各组大鼠治疗4周后,采用ELISA法检测血清中Ig A、Ig G、Ig M、TNF-α、IFN-γ、IL-4和IL-10的水平。通过苏木精伊红(HE)染色评价大鼠踝关节病变。通过免疫组化染色或Western blot检测滑膜组织中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、p-mTOR、Bcl-2、Bax、LC3-I、LC3-II和Becline-1的表达。结果:与RA组相比,L-PDX组和H-PDX组的关节炎指数(AI)评分均显著降低(P<0.05),炎性细胞浸润、软骨破坏程度及滑膜上皮细胞增生减轻。与RA组相比,L-PDX组和H-PDX组的血清Ig A、Ig G和Ig M含量均降低(P<0.05)。与RA组相比,L-PDX组和H-PDX组的血清TNF-α和IFN-γ水平均降低,IL-4和IL-10水平均升高(P<0.05)。与RA组相比,L-PDX组和H-PDX组大鼠踝关节滑膜组织中的p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR和Bcl-2的蛋白相对表达量均降低,而Bax、LC3-II/LC3-I和Becline-1的蛋白相对表达量均升高(P<0.05)。结论:本研究表明PDX可有效减轻RA大鼠症状,其机制与调节B淋巴细胞活化和体液免疫、纠正Th1/Th2失衡、抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

Protectin DX对小鼠急性肝损伤的作用及相关机制

目的 探讨炎症消退介质保护素DX(protectin DX,PDX)对脓毒症小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 雄性C57BL/6小鼠30只,6~8周龄,体质量20~25 g,采用随机数字表法分为三组(均n=10):假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)和脓毒症+PDX干预组(CLP+PDX组).采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型.于CLP后1 h时,CLP+PDX组腹腔注射PDX 1μg,Sham组和CLP组均腹腔注射等容量生理盐水.三组均在CLP后24 h时收集血清、肝组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;采用全自动生化分析仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;ELISA检测血清中的TNF-α、IL-6、IFN-γ 和IL-10水平;Western blot检测肝组织中NF-κB活性;比色法检测肝组织中髓过氧化物酶(MPO)活性.应用SPSS 18.0软件,采用双侧t检验的统计学方法,对结果进行统计学分析.结果 与Sham组相比,CLP组HE染色显示:肝索排列紊乱,肝细胞肿胀坏死,炎性细胞浸润,可见淤血及出血,肝损伤评分显著增加;血清中的ALT、AST、TNF-α、IL-6、IFN-γ 和IL-10水平均明显升高(均P<0.05);肝组织中NF-κB、MPO活性显著增强(均P<0.05).CLP+PDX组与CLP组相比,肝组织结构形态损伤明显较轻;血清中的ALT、AST、TNF-α、IL-6和IFN-γ 水平均降低,抗炎因子IL-10水平升高,肝组织NF-κB、MPO活性明显被抑制(均P<0.05).结论 PDX可通过抑制NF-κB活性,进而减轻小鼠脓毒症导致的急性肝损伤.