慢性疼痛保留性神经损伤模型两种建立方法比较

目的通过改进大鼠保留性神经损伤(spared nerve injury,SNI)疼痛模型,将大鼠单侧腓总神经结扎后,比较离断与不离断大鼠腓总神经的痛阈值差异。方法选择30只健康雄性SD大鼠,随机分为结扎离断组(A组)、结扎未离断组(L组)和假手术组(C组),每组10只。A组和L组分别用丝线对大鼠右侧腓总神经进行结扎离断和单纯结扎,C组只暴露右侧腓总神经但不进行任何处理。建模后于不同时间点测量各组大鼠机械刺激缩足痛阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热刺激缩足痛阈值(thermal withdrawal threshold,TWT)。结果结扎离断和结扎未离断腓总神经均能引起大鼠痛阈的降低,至术后7 d降至最低,其后趋于平稳(P<0.05)。A组和L组的MWT[(2.33±0.36)g和(4.40±0.75)g vs(11.80±4.43)g]和TWT[(33.50±1.29)ms和(36.75±1.26)ms vs(46.75±4.50)ms]显著低于与C组,差异均有统计学意义(P均<0.05),且A组较L组更明显。结论通过结扎离断大鼠右侧腓总神经建立的SNI模型较结扎未离断建立的模型能更为明显地降低痛阈。

聚乳酸-羟基乙酸导管移植修复坐骨神经损伤后的力学特性分析

背景:有关自体神经和聚乳酸-羟基乙酸导管移植修复坐骨神经损伤后的拉伸、应力松弛力学特性测试鲜有报道。目的:对比分析自体神经和聚乳酸-羟基乙酸导管移植修复坐骨神经损伤后的拉伸、应力松弛力学特性。方法:取死后24 h内的新鲜人尸体坐骨神经标本60条,加工成长35 mm试样,分为3组,正常对照组不做任何处理,人工导管移植组、自体神经移植组切断坐骨神经标本,形成20 mm缺损,分别以聚乳酸-羟基乙酸人工导管、自体神经吻接修复,3组均进行拉伸和应力松弛测试。结果与结论:1各组坐骨神经试样应力最初600 s下降较快,600 s后下降缓慢,7 200 s时应力松弛曲线接近水平,各组坐骨神经试样的应力松弛曲线为对数关系变化趋势;2自体神经移植组、人工导管移植组拉伸弹性限度载荷、弹性限度应力、最大载荷、最大应力、弹性限度应变、最大应变小于正常对照组(P<0.05),人工导管移植组拉伸弹性限度载荷、弹性限度应力、最大载荷、最大应力、弹性限度应变、最大应变大于自体神经移植组(P<0.05);3结果表明,聚乳酸-羟基乙酸人工导管具有很好的拉伸和应力松弛力学特性,符合坐骨神经损伤移植修复生物材料的拉伸力学特性和应力松弛力学特性要求。

IFN-α对SNI神经源性疼痛模型小鼠中的镇痛作用

目的:研究IFN-α2a在小鼠SNI神经痛模型中的镇痛作用。方法:采用SNI疼痛模型小鼠,以VonFrey Filaments刺激法和冷盘法测定腹腔给予IFN-α2a的镇痛作用,并测定阿片肽受体拮抗剂纳洛酮对其镇痛作用的阻断。结果:①IFN-α2a的给药剂量为1 000 U/g体重时,基本无镇痛作用;剂量为5 000 U/g体重时,给药后30 min有明显的镇痛作用,持续5-20 min;剂量为10 000 U/g时,镇痛作用可维持50-60 min。②纳洛酮可以完全阻断IFN-α2a的镇痛作用。结论:①IFN-α2a在小鼠SNI模型中具有镇痛作用,且呈剂量效应。②IFN-α的镇痛作用可能通过阿片受体传导。

新疆阿魏干预神经源性疼痛模型大鼠痛阈及脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞的表达（英文）

背景:新疆阿魏主要由挥发油、树脂和树胶组成,具有抗炎、抗过敏及解痉镇痛作用。但其镇痛作用机制尚不明确,目的:观察新疆阿魏对神经病理性疼痛大鼠热痛及机械痛及脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞表达的影响。方法:成年SD大鼠80只制备慢性坐骨神经松结扎大鼠模型后随机分为5组:分别灌胃低、中、高剂量阿魏0.075,0.15,0.30 g/kg,赛来昔布和生理盐水。各组分别在术前1 d及术后1,2,3,5,7,14 d进行热痛及机械痛测定,并取S4-5脊髓组织,并采用免疫组织化学染色的方法观察脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞表达变化。结果与结论:给药后1,5 d,低、中、高剂量阿魏组均高于生理盐水组(P<0.01),中剂量阿魏组热痛阈值下降幅度最小(P<0.05),高剂量阿魏组机械痛阈值减小幅度最小(P<0.01)。术后各时间点低、中、高剂量阿魏组及赛来昔布组在的Fos蛋白阳性细胞数均小于生理盐水组(P<0.05),中、高剂量阿魏组各时间点Fos蛋白阳性细胞数均高于赛来昔布组(P<0.05)。高剂量阿魏组及赛来昔布组在术后各个时间点的脊髓组织星形胶质细胞阳性细胞数均明显少于生理盐水组(P<0.05);中、高剂量阿魏组与赛来昔布组各时间点的星形胶质细胞阳性细胞数比较差异有显著性意义(P<0.05)。结果证实,新疆阿魏可以有效缓解大鼠神经病理性疼痛,其机制可能与脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞的激活有关。

外周神经损伤降低背侧海马的突触可塑性导致短期记忆障碍

目的探讨保留性神经损伤(SNI)模型对小鼠背侧海马Schaffer-CA1的突触可塑性及短期记忆功能的影响。方法比较了Sham组和SNI组小鼠的新物体识别记忆(NOR)。用全细胞细胞内记录的方法记录了背侧海马Schaffer侧支到锥体细胞的LTP并比较Sham和SNI模型小鼠背侧海马的N-甲基-D-天冬氨酸受体电流(NMDAR current);用Western blot的方法比较了Sham组和SNI组小鼠背侧海马BDNF的蛋白表达量。结果与Sham组相比,SNI组小鼠新物体识别指数、背侧海马Schaffer-CA1的LTP幅度、NMDAR电流和BDNF的蛋白表达量均有下降(均P<0.05)。结论SNI导致了背侧海马NMDAR依赖的Schaffer-CA1突触可塑性降低,可能导致短期记忆功能受损。

去甲肾上腺素对SNI大鼠背根神经节神经元及其传入纤维兴奋性的影响

目的:研究去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)对保留性坐骨神经损伤(spared nerve injury,SNI)模型Sprague-Dawley大鼠背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)神经元及其传入纤维兴奋性的影响。方法:(1)将40只雄性大鼠随机平均分为8组,每组5只。NE干预(SNI+NE)组、手术对照(SNI+Vehicle)组、去甲肾上腺素干预假手术(Sham+NE)组、假手术对照(Sham+Vehicle)组,每组再随机均分为C纤维记录组与A纤维记录组。SNI手术造模后7天内up-down法监测下肢痛阈变化,确认造模成功。术后第14天,采用在体脊髓诱发电位(spinal evoked field potential, SEFP)记录技术,研究外源性100μM NE干预L4、L5 DRG对刺激C纤维、A纤维诱发的脊髓背角SEFP的作用。(2)按前述将30只雄性大鼠随机平均分组。采用全细胞膜片钳技术研究100μM NE灌流对离体打散的手术侧L4、L5 DRG大、中、小直径神经元诱发动作电位基强度(current threshold, CT)和两倍基强度诱发动作电位次数(No. of APs at 2×rheobase)的作用。结果:(1)SEFP记录实验发现:100μM NE干预SNI侧DRG,可抑制A纤维诱发的脊髓背角SEFP (P <0.01)并增强C纤维诱发的脊髓背角SEFP (P <0.01)。(2)离体膜片钳实验发现:在钳制电压为-80 mV时,与Sham+Vehicle组相比,SNI+Vehicle组DRG神经元CT下降(P <0.001),两倍基强度诱发的动作电位放电次数增加(P <0.001),即SNI组神经元兴奋性增加;而100μM NE灌流,SNI+NE组和Sham+NE组的动作电位的放电次数与同组NE灌流前相比,未见明显变化(P> 0.05)。结论:NE通过抑制SNI大鼠DRG中大、中神经元的兴奋性,同时间接兴奋小神经元而参与痛觉传入信号的调控。

α2肾上腺素受体亚型对神经病理性疼痛大鼠镇痛作用的电生理研究

目的:研究α2肾上腺素受体(α2-adrenoceptors,α2-AR)不同亚型在神经病理性疼痛中的作用及其可能机制。方法:成年SD大鼠行保留性脊神经损伤手术(Spared Nerve Injury,SNI),术后14天测缩足阈值(Paw withdrawal threshold,PWT),以PWT≤4 g为造模成功。通过胞外电生理记录的方法,脊髓表面给予α2-AR三个不同亚型(α2A-AR,α2B-AR,α2C-AR)激动剂和拮抗剂,观察其对脊髓背角广动力范围神经元(wide-dynamic range neurons,WDR)诱发放电影响。通过连续鞘内给药方法,进一步验证α2-AR特定亚型激动剂对SNI大鼠50%PWT的影响。结果:(1)α2A-AR激动剂可以显著地抑制WDR神经元的诱发放电(P<0.01,n=10),而α2A-AR拮抗剂能够逆转这种作用。(2)α2B-AR拮抗剂、α2C-AR激动剂和α2C-AR拮抗剂对WDR神经元的诱发放电均无明显的影响(P>0.05,n=9)。(3)鞘内给予α2A-AR激动剂可以显著的提高SNI神经病理性痛大鼠50%PWT。结论:α2-AR激动剂在神经病理性疼痛大鼠脊髓水平的镇痛作用可能主要是通过激动α2A-AR而实现的。

和厚朴酚对神经病理性疼痛小鼠背根神经节TTX-R钠电流的影响

目的在小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型上,观察和厚朴酚(Honokiol,Hon)对急性分离的背根神经节(DRG)细胞河豚毒素不敏感型(TTX-R)钠电流的作用,探讨其镇痛机制。方法应用CCI方法诱导神经病理性疼痛,全细胞膜片钳技术记录钠电流。结果与正常组比转,CCI模型使TTX-R钠电流明显增加,激活曲线向左偏移4.8 m V,不改变稳态失活曲线。Hon 30 M明显抑制CCI模型TTX-R钠电流的幅度,使激活曲线恢复趋向正常范围,失活曲线较CCI组向左偏移8.9 m V。结论 Hon对CCI模型增加的TTX-R钠电流有抑制作用,并影响其动力学特征。

高压氧对保留性神经损伤模型小鼠神经病理性疼痛治疗作用的行为学研究

疼痛控制日益受到医务工作者的重视,如果不能有效缓解疼痛,会导致临床转归不佳,患者生活质量下降.然而,至今疼痛的治疗方法和药物仍很匮乏.高压氧虽已在临床应用多年,疼痛仍未纳入其适应征,有文献报道临床上观察到高压氧能缓解包括复杂区域疼痛综合征（complex regional pain syndrome,CRPS）、原发性三叉神经痛、纤维肌痛综合征、偏头痛、丛集性头痛等慢性疼痛疾患;基础研究初步发现高压氧处理能降低周围神经损伤大鼠的痛觉异常敏感,减轻实验性关节炎疼痛.但是,关于高压氧对神经病理性疼痛的确切作用及其相关机制尚不明确.

外源性神经生长因子(NGF)对坐骨神经损伤后脊髓前角细胞脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响

目的:探讨坐骨神经损伤后脊髓前角细胞BDNF表达变化及外源性NGF与BDNF表达的关系。方法:采用大鼠坐骨神经损伤动物模型,分为药物组、对照组,每只大鼠又分为损伤例组(L组)和健侧组(R组)两个亚组。用原位杂交、免疫级化技术检测BDNF的表达水平,现察各组在1d、7d、14d、21d及28d时的变化。用计算机图像自动处理系统进行定量分析研究。结果:药物组损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平除1d,7d组外其余均多于对照组(P<0.05);而两组健侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平无统计学意义(P>0.05),坐骨神经损伤后损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平在最初的3周内逐渐下降,然后开始恢复,但至第4周尚未恢复到开始时的水平;而两组健侧BDNF表达水平则无明显差异(P>0.05)。结论:外源性NGF能促进坐骨神经损伤后损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平的增加;而对健侧BDNF表达水平无明显作用。

不同体表刺激对CCI大鼠环跳、阳陵泉穴区5-HT、CGRP、NPY的影响

目的:通过观察不同体表刺激方式对坐骨神经痛大鼠环跳、阳陵泉穴区局部皮肤组织相关化学物质5-羟色胺(5-HT)、神经肽Y(NPY)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响,初探电针、艾灸、刮痧治疗坐骨神经痛的生物学机制。方法:将35只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针+模型组、艾灸+模型组、刮痧+模型组,每组7只,造模第3天选取大鼠左后肢环跳、阳陵泉穴,分别按组进行电针、艾灸、刮痧干预,以4%甲醛灌流固定,取穴区局部皮肤组织进行组织形态学检测。结果:环跳穴区局部皮肤组织的表皮层、真皮层均有5-HT阳性标记,阳陵泉穴区局部皮肤组织表皮层、真皮层、皮下组织均有5-HT阳性标记,其在表皮下与真皮浅层形成与表皮平行的不连续细胞带,在真皮深层主要分布在毛囊、腺体、血管周围,在皮下组织主要聚集在血管旁。与空白组比较,模型组环跳、阳陵泉穴区5-HT阳性标记均显著升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组环跳、阳陵泉穴区5-HT阳性标记均显著减少(P<0.05)。NPY主要以串珠形式分布在环跳穴区局部皮肤组织的真皮深层绕毛囊或血管分布。与空白组比较,模型组NPY阳性表达纤维显著减少(P<0.05);与模型组比较,各治疗组NPY阳性表达纤维显著增多(P<0.05)。阳陵泉穴区局部皮肤组织中CGRP主要呈串珠样,在真皮浅层接近表皮部位呈现游离状态,真皮层深部及皮下组织绕血管分布,与空白组比较,模型组CGRP阳性表达纤维显著增多(P<0.05);与模型组比较,各治疗组CGRP阳性表达纤维显著减少(P<0.05)。结论:电针、艾灸、刮痧均可使坐骨神经痛大鼠穴区局部皮肤组织中5-HT、NPY、CGRP表达向着正常水平方向逆转,表明5-HT、NPY、CGRP参与了坐骨神经治疗,其可能是针刺、艾灸、刮痧治疗坐骨神经痛的共同物质基础。