慢性疼痛保留性神经损伤模型两种建立方法比较

目的通过改进大鼠保留性神经损伤(spared nerve injury,SNI)疼痛模型,将大鼠单侧腓总神经结扎后,比较离断与不离断大鼠腓总神经的痛阈值差异。方法选择30只健康雄性SD大鼠,随机分为结扎离断组(A组)、结扎未离断组(L组)和假手术组(C组),每组10只。A组和L组分别用丝线对大鼠右侧腓总神经进行结扎离断和单纯结扎,C组只暴露右侧腓总神经但不进行任何处理。建模后于不同时间点测量各组大鼠机械刺激缩足痛阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热刺激缩足痛阈值(thermal withdrawal threshold,TWT)。结果结扎离断和结扎未离断腓总神经均能引起大鼠痛阈的降低,至术后7 d降至最低,其后趋于平稳(P<0.05)。A组和L组的MWT[(2.33±0.36)g和(4.40±0.75)g vs(11.80±4.43)g]和TWT[(33.50±1.29)ms和(36.75±1.26)ms vs(46.75±4.50)ms]显著低于与C组,差异均有统计学意义(P均<0.05),且A组较L组更明显。结论通过结扎离断大鼠右侧腓总神经建立的SNI模型较结扎未离断建立的模型能更为明显地降低痛阈。

外周神经损伤降低背侧海马的突触可塑性导致短期记忆障碍

目的探讨保留性神经损伤(SNI)模型对小鼠背侧海马Schaffer-CA1的突触可塑性及短期记忆功能的影响。方法比较了Sham组和SNI组小鼠的新物体识别记忆(NOR)。用全细胞细胞内记录的方法记录了背侧海马Schaffer侧支到锥体细胞的LTP并比较Sham和SNI模型小鼠背侧海马的N-甲基-D-天冬氨酸受体电流(NMDAR current);用Western blot的方法比较了Sham组和SNI组小鼠背侧海马BDNF的蛋白表达量。结果与Sham组相比,SNI组小鼠新物体识别指数、背侧海马Schaffer-CA1的LTP幅度、NMDAR电流和BDNF的蛋白表达量均有下降(均P<0.05)。结论SNI导致了背侧海马NMDAR依赖的Schaffer-CA1突触可塑性降低,可能导致短期记忆功能受损。

α2肾上腺素受体亚型对神经病理性疼痛大鼠镇痛作用的电生理研究

目的:研究α2肾上腺素受体(α2-adrenoceptors,α2-AR)不同亚型在神经病理性疼痛中的作用及其可能机制。方法:成年SD大鼠行保留性脊神经损伤手术(Spared Nerve Injury,SNI),术后14天测缩足阈值(Paw withdrawal threshold,PWT),以PWT≤4 g为造模成功。通过胞外电生理记录的方法,脊髓表面给予α2-AR三个不同亚型(α2A-AR,α2B-AR,α2C-AR)激动剂和拮抗剂,观察其对脊髓背角广动力范围神经元(wide-dynamic range neurons,WDR)诱发放电影响。通过连续鞘内给药方法,进一步验证α2-AR特定亚型激动剂对SNI大鼠50%PWT的影响。结果:(1)α2A-AR激动剂可以显著地抑制WDR神经元的诱发放电(P<0.01,n=10),而α2A-AR拮抗剂能够逆转这种作用。(2)α2B-AR拮抗剂、α2C-AR激动剂和α2C-AR拮抗剂对WDR神经元的诱发放电均无明显的影响(P>0.05,n=9)。(3)鞘内给予α2A-AR激动剂可以显著的提高SNI神经病理性痛大鼠50%PWT。结论:α2-AR激动剂在神经病理性疼痛大鼠脊髓水平的镇痛作用可能主要是通过激动α2A-AR而实现的。

去甲肾上腺素对SNI大鼠背根神经节神经元及其传入纤维兴奋性的影响

目的:研究去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)对保留性坐骨神经损伤(spared nerve injury,SNI)模型Sprague-Dawley大鼠背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)神经元及其传入纤维兴奋性的影响。方法:(1)将40只雄性大鼠随机平均分为8组,每组5只。NE干预(SNI+NE)组、手术对照(SNI+Vehicle)组、去甲肾上腺素干预假手术(Sham+NE)组、假手术对照(Sham+Vehicle)组,每组再随机均分为C纤维记录组与A纤维记录组。SNI手术造模后7天内up-down法监测下肢痛阈变化,确认造模成功。术后第14天,采用在体脊髓诱发电位(spinal evoked field potential, SEFP)记录技术,研究外源性100μM NE干预L4、L5 DRG对刺激C纤维、A纤维诱发的脊髓背角SEFP的作用。(2)按前述将30只雄性大鼠随机平均分组。采用全细胞膜片钳技术研究100μM NE灌流对离体打散的手术侧L4、L5 DRG大、中、小直径神经元诱发动作电位基强度(current threshold, CT)和两倍基强度诱发动作电位次数(No. of APs at 2×rheobase)的作用。结果:(1)SEFP记录实验发现:100μM NE干预SNI侧DRG,可抑制A纤维诱发的脊髓背角SEFP (P <0.01)并增强C纤维诱发的脊髓背角SEFP (P <0.01)。(2)离体膜片钳实验发现:在钳制电压为-80 mV时,与Sham+Vehicle组相比,SNI+Vehicle组DRG神经元CT下降(P <0.001),两倍基强度诱发的动作电位放电次数增加(P <0.001),即SNI组神经元兴奋性增加;而100μM NE灌流,SNI+NE组和Sham+NE组的动作电位的放电次数与同组NE灌流前相比,未见明显变化(P> 0.05)。结论:NE通过抑制SNI大鼠DRG中大、中神经元的兴奋性,同时间接兴奋小神经元而参与痛觉传入信号的调控。