昆葵保肾颗粒提取工艺优化

目的优化昆葵保肾颗粒提取工艺。方法在单因素试验基础上,以加水量、提取时间、浸泡时间为影响因素,莫诺苷、马钱苷、表儿茶素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、金丝桃苷、异槲皮苷、棉花皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素含量及干膏率的综合评分为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为加水量10倍,提取时间40 min,浸泡时间20 min,综合评分为1.452分。结论该方法稳定可靠,可为昆葵保肾颗粒后期开发和应用提供依据,也能为其他医疗机构中药制剂研究提供思路。

保肾颗粒剂对系膜增殖性肾小球肾炎模型红细胞免疫黏附功能和膜分子CD35、CD58的影响

目的:从免疫学角度探讨保肾颗粒剂的药理作用机制。方法:建立兔系膜增殖性肾炎(MSPGN)模型,观察保肾颗粒剂对模型动物红细胞免疫功能的影响。结果:与正常组比较,模型动物的红细胞免疫复合物花环率(E-ICR)升高、红细胞C3b受体花环率(E-C3bRR)、红细胞膜分子CD35、CD58表达水平下降。经保肾颗粒剂治疗后,以上各值均有不同程度的恢复。结论:保肾颗粒剂能提高MSPGN模型动物的红细胞免疫黏附功能和红细胞膜分子CD35、CD58表达水平,其机制可能与保肾颗粒剂的免疫调节作用相关。

虫草保肾颗粒剂对慢性肾衰竭大鼠肾脏MCP-1表达的影响

目的观察虫草保肾颗粒剂对慢性肾衰竭(CRF)大鼠的肾脏保护作用,同时探讨其作用机理。方法将雄性大鼠随机分成假手术组、模型组、治疗组、对照组,除假手术组外均行5/6肾切除手术制作CRF动物模型。给药方案:第1次手术后,假手术组、模型组予以等量的蒸馏水灌胃,治疗组予以虫草保肾颗粒剂水煎剂灌胃,对照组予以福辛普利氯化钠溶液灌胃,每日1次。分别于造模后0、4、8、12周观察大鼠24 h尿蛋白定量,血清尿素氮(BUN)、肌酐(sCr)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)变化。每组大鼠分别于同一时间点处死10只大鼠,用实时定量PCR方法检测肾组织中MCP-1 mRNA的表达。结果虫草保肾颗粒剂能够减轻蛋白尿、降低大鼠血清BUN、sCr及MCP-1的含量,且与对照组比较有统计学差异;虫草保肾颗粒剂可下调CRF大鼠肾组织MCP-1 mRNA的表达,优于对照组(P<0.05或<0.01)。结论虫草保肾颗粒剂可以下调MCP-1 mRNA的表达,有效延缓肾脏纤维化。

保肾颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响

目的:观察保肾颗粒对急性血瘀证模型大鼠血液流变性的影响。方法:SD大鼠60只随机分为空白对照组、模型对照组、复方丹参滴丸(阳性药)组和保肾颗粒3.6,1.8,0.9 g/kg剂量组,连续灌胃给药10 d后,采用皮下注射盐酸肾上腺素加冰水浴法制备大鼠急性血瘀证模型,于禁食20 h后腹主动脉采血,分别测定不同切变率下全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度、红细胞压积等血液黏滞度指标。结果:与模型对照组比较,保肾颗粒3.6,1.8 g/kg剂量组能明显降低急性血瘀证大鼠的全血黏度、血浆黏度、红细胞压积和红细胞聚集指数(P<0.05)。结论:保肾颗粒对急性血瘀证模型大鼠血液流变性具有一定的改善作用,能降低其血液黏度。

参芪保肾颗粒剂对阿霉素肾病大鼠转化生长因子β_1表达的影响

目的 :观察参芪保肾颗粒剂对阿霉素肾病大鼠转化生长因子 β1(TGF—β1)表达的影响 ,探讨本药延缓CRG进展的作用机理。方法 :采用阿霉素肾病大鼠 ,分为 5组 ,分别给予参芪保肾颗粒剂 2 0g/kg·d-1、5 0g/kg·d-1及 0 2 5 %苯那普利 10mg/kg·d-1灌胃 ,给药至第 18W。观察 2 4h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮、肌酐清除率 ,肾小管—间质病理变化 ,并用免疫组化法观察转化生长因子 β1(TGF - β1)在肾组织的表达。结果 :给药组尿蛋白含量、血Scr、BUN明显降低 (P <0 0 1) ,肾小管—间质病理变化 ,给药组明显减轻 ,TGF—β1主要表达于肾小球内皮细胞、肾小管上皮细胞 ,给药组阳性表达率明显减少。结论 :参芪保肾颗粒剂可使尿蛋白量减少 ,降低血Ccr、BUN ,改善肾功能 ,减轻肾小管—间质损伤 ,使TGF—β1在肾脏组织内的表达明显下调 ,此可能是本药延缓CRF进展的作用机理之一。

虫草保肾颗粒剂对慢性肾衰竭大鼠肾脏α-SMA表达的影响

目的:观察虫草保肾颗粒剂对5/6肾切除慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠肾脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、治疗组(C组)、对照组(D组),除假手术组外均行5/6肾切除手术制作CRF动物模型。给药方案:第1次手术后,A、B两组给予等量的蒸馏水灌胃,C组给予虫草保肾颗粒剂水煎剂灌胃,D组给予福辛普利氯化钠溶液灌胃,每日1次。分别于造模后0、4、8、12周观察大鼠24h尿蛋白定量,血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)。每组大鼠同一时间点处死10只大鼠,观察肾脏组织形态学改变及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;用定量PCR方法检测肾组织中α-SMAmRNA的表达。结果:(1)虫草保肾颗粒剂可以减轻蛋白尿、降低CRF大鼠血清BUN和Scr的含量,与对照组比较差异有统计学意义;(2)虫草保肾颗粒剂可抑制CRF大鼠肾脏组织α-SMA的表达,与对照组比较差异有统计学意义,且优于福辛普利组;(3)虫草保肾颗粒剂可下调CRF大鼠肾组织α-SMAmRNA的表达,与对照组比较差异有统计学意义,且优于福辛普利组。结论:(1)虫草保肾颗粒剂可以通过减轻CRF大鼠蛋白尿、降低血清BUN和Scr的含量,从而改善肾功能、减轻肾小球硬化;(2)虫草保肾颗粒剂可以抑制CRF大鼠肾脏组织α-SMA的表达,并下调α-SMAmRNA的表达,有效延缓肾纤维化。

复方保肾颗粒对甘油法致大鼠急性肾功能衰竭模型的影响

目的:研究复方保肾颗粒对甘油法致大鼠急性肾功能衰竭(ARF)模型的影响。方法:用50%的甘油按照10 m L.kg-1分别在大鼠两侧后肢肌肉注射造成急性肾衰模型,将大鼠分为模型对照组、复方保肾颗粒三个剂量组(3.6,1.8,0.9 g.kg-1)、醋酸地塞米松组,另设空白对照组。连续灌胃4天后测定大鼠尿蛋白、血清肌酐(Scr)、血清尿素氮(BUN)、血清总蛋白量、K+、Na+含量及肾脏指数。结果:复方保肾颗粒能明显降低甘油法致大鼠急性肾功能衰竭模型的尿蛋白、Scr及BUN的含量,明显降低肾脏指数。结论:复方保肾颗粒对甘油法致大鼠急性肾功能衰竭模型具有一定的保护作用。

参芪保肾颗粒剂减轻慢性肾衰竭肾小管-间质损伤的临床研究

目的:研究参芪保肾颗粒剂对慢性肾衰竭(CRF)氮质血症期的患者肾功能、肾纤维化的作用。方法:对60例原发病为慢性肾小球肾炎发展致CRF氮质血症期的患者进行了随机对照研究,从临床角度观测参芪保肾颗粒剂对CRF氮质血症期患者的肾小管损伤检测指标NAG(N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖甘酶)、Trf(转铁蛋白)、β2-MG(β2-微球蛋白)及Upr24(24小时尿蛋白定量)、Hb(血色素)、Scr(肌酐)、BUN(尿素氮)等指标的影响。结果:参芪保肾颗粒剂能下调NAG、β2-MG、Trf、Upr24、Scr、BUN指数,通过降低减缓肾小管-间质纤维化及瘢痕组织增生,起到保护肾小管-间质的功能的作用,有效保护肾小管的损伤,起到延缓CRF进展的作用,治疗前后有显著性差异(P<0.05)。结论:脾肾两虚为CRF之主要病机,益气健脾补肾为主应为治疗CRF及延缓其进展的主要方法。慢性肾小球肾炎的肾功能减退更密切相关于间质的纤维化而非肾小球损伤,从保护肾小球间质方面入手是延缓CRF进展的更有远期预防和治疗意义的重要治疗手段。参芪保肾颗粒剂对缓解贫血状态,减少蛋白的流失,保护肾小管的功能,防止间质纤维化有较好的疗效,起到延缓CRF进展保护肾功能的作用。

复方保肾颗粒对C-BSA型肾炎家兔肾组织中ICAM-1和IL-6表达的影响

目的:观察复方保肾颗粒对C-BSA型肾炎家兔肾组织中ICAM-1和IL-6表达的影响。方法:连续6周给家兔耳缘静脉注射阳离子化牛血清白蛋白制得肾炎模型,将动物分为空白对照组、模型对照组、复方保肾颗粒1.2、0.6、0.3 g﹒kg-1剂量组、醋酸地塞米松组,灌胃给药10周后,用免疫组化发检测ICAM-1和IL-6在家兔肾脏中的表达情况。结果:复方保肾颗粒能明显降低C-BSA肾炎模型家兔肾脏中ICAM-1和IL-6的积分光密度值。结论:复方保肾颗粒治疗慢性肾炎的作用机制可能为通过降低ICAM-1、IL-6这两种细胞因子的活性来达到抑制肾脏组织病变,从而达到改善肾功能的目的。

虫草保肾颗粒剂对慢肾衰大鼠动脉粥样硬化程度的影响分析

目的探讨虫草保肾颗粒剂对慢性肾衰大鼠动脉粥样硬化程度的影响。方法选择实验用大鼠30只,诱发大鼠粥样动脉硬化病症。将其随机分为试验组和对照组,试验组大鼠提供虫草保肾颗粒剂进行治疗,对照组则提供无菌生理盐水。分别记录两组大鼠血脂含量和动脉内膜中层厚度。结果试验组大鼠治疗后胆固醇和甘油三酯含量低于对照组(P<0.05),同时试验组大鼠动脉内膜中层厚度低于对照组(P<0.05)。结论利用虫草保肾颗粒剂可以有效缓解慢性肾衰竭大鼠的动脉粥样硬化症状,降低其体内各项血脂指标的含量。

保肾颗粒对庆大霉素所致大鼠急性肾功能衰竭的保护作用

目的:观察复方保肾颗粒对庆大霉素(GM)致大鼠急性肾功能衰竭(ARF)的保护作用并初步探索其可能存在的部分作用机制。方法:Wistar雄性大鼠96只随机分为空白对照组、模型对照组、肾炎康复片(阳性药)组和复方保肾颗粒3.6g/kg、1.8 g/kg、0.9 g/kg剂量组,每组16只。采用腹腔注射庆大霉素(GM)法制备急性肾功能衰竭模型,各组在造模期间同时给予相应药物,连续给药14天。实验第6天和第13天收集大鼠24h尿液,记录尿量并检测尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶);分别在给药第7天和第14天末次给药后4h分别处死8只动物,检测各组血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);取肾脏称重,计算肾脏系数,测肾皮质匀浆MDA含量和SOD、CAT酶活性并作HE染色观察肾脏病理改变。结果:与模型对照组相比,复方保肾颗粒3.6g/kg、1.8 g/kg剂量组能明显减少尿量,降低尿NAG活性,减少血Scr及BUN的含量,明显降低MDA水平,提高SOD和CAT酶的活性,降低肾脏系数;组织病理学检查结果显示复方保肾颗粒3.6g/kg、1.8 g/kg剂量组肾小管上皮细胞染色、形态明显好于模型对照组。结果还表明随着给药时间的延长,复方保肾颗粒对急性肾功能衰竭的改善保护作用愈加显著。结论:复方保肾颗粒对庆大霉素引起的急性肾功能衰竭具有一定的保护作用;其作用机理可能与其减轻肾损伤、抗氧化及促进修复再生等作用相关。

保肾颗粒对家兔C-BSA异种血清免疫复合型肾炎模型的影响

目的:观察复方保肾颗粒对兔C-BSA异种血清免疫复合型肾炎模型的影响。方法:连续6周给家兔耳缘静脉注射阳离子化牛血清白蛋白制得肾炎模型,将动物分为空白对照组、模型对照组、复方保肾颗粒1.2g/kg、0.6 g/kg、0.3 g/kg剂量组、醋酸地塞米松组,灌胃给药10周后,检测动物尿蛋白、血清肌酐、尿素氮浓度及肾脏病理变化等指标的变化。结果:保肾颗粒能明显降低C-BSA肾炎模型家兔的尿蛋白、血清肌酐及尿素氮浓度,减轻肾脏的病理损伤。结论:复方保肾颗粒对C-BSA型肾炎家兔具有一定的保护和治疗作用。

治糖保肾颗粒对人肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响

采用体外培养的MC技术和血清药理学方法,分为治糖保肾颗粒组、贝那普利组、模型组,并设高、中、低三种剂量。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞上清液中FN的含量,放射免疫测定法(RIA)测定细胞上清液中LN、CL-Ⅳ的含量。结果高糖能明显刺激MC增殖,同时促进FN、LN和CL-Ⅳ分泌。而治糖保肾颗粒能抑制MC增殖,抑制MC分泌FN、LN和CL-Ⅳ,并呈一定量效关系。贝那普利也有相似的作用。结论肾小球系膜细胞是治糖保肾颗粒发挥治疗作用的重要靶细胞,抑制细胞外基质聚积可能是该方延缓糖尿病肾病发展的机制之一。

止消保肾宁颗粒的毒理学研究

目的:观察止消保肾宁颗粒对小鼠、大鼠的急性毒性和对大鼠的长期毒性。方法:给小鼠一次性灌胃不同剂量(33.0、29.8、26.9、24.3、21.9、19.8 g/kg)止消保肾宁颗粒,观察小鼠的一般情况及死亡数。给大鼠单次灌胃止消保肾宁颗粒13.2 g/kg,观察大鼠的急性毒性。在长期毒性实验中,给大鼠连续灌胃低、中、高剂量(3.1、6.2、12.4 g/kg)180 d,观察大鼠的体重、血液学指标、生化指标、脏器系数和组织病理学检查结果。结果:止消保肾宁颗粒对小鼠的LD50为26.0 g/kg。长期毒性实验中,第24～26周高剂量组大鼠体重增长较空白对照组明显减慢,第27周恢复。中、低剂量组大鼠的体重与空白对照组无显著性差异。高、中、低剂量组大鼠的血液学指标、生化指标、脏器系数与空白对照组无显著性差异。未发现与用药有关的组织病理学异常。结论:止消保肾宁颗粒的拟定临床剂量(190 mg/d)是安全的。

内质网应激相关蛋白GADD153/CHOP在系膜增生性肾炎肾组织中的表达及中药干预研究

目的:研究系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾脏组织内质网应激相关蛋白生长停滞及DNA损伤基因153(GADD153)/C-EBP同源蛋白(CHOP)的表达、中药保肾颗粒对GADD153/CHOP表达的干预效果,探讨保肾颗粒治疗系膜增生性肾小球肾炎的作用机制。方法:大鼠随机分为中药组、对照组、模型组、空白组,中药组给予保肾颗粒、对照组给予雷公藤多甙片灌胃、空白组和模型组以等量生理盐水灌胃,连续14周。于造模后给药前1 d及实验结束后,检测各组大鼠血清肌酐(SCr),TUNEL检测大鼠肾脏细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)及Western blot法检测肾组织GADD153/CHOP的表达。结果:与模型组比较,对照组和中药组SCr均显著下降(P<0.05)。空白组肾组织细胞凋亡不明显,模型组有大量的肾组织细胞凋亡,中药组及对照组凋亡较轻。与模型组比较,中药组及对照组GADD153/CHOP及GADD153/CHOPmRNA表达水平下降(P<0.05)。结论:Ms PGN大鼠肾组织GADD153/CHOP表达增高,提示内质网应激可能参与了肾脏损害;而保肾颗粒对Ms PGN大鼠肾组织GADD153/CHOP过度表达有较好的抑制作用,且作用与雷公藤多甙片相当,是减轻肾脏损害的重要机制之一。