STAT3/iNOS通路在慢性阻塞性肺疾病伴气道重塑中的作用

目的探讨信号传导子及转录活化因子3(STAT3)/诱导型一氧化氮合酶(iNOS)通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)伴气道重塑中的作用。方法(1)采用气管滴注脂多糖加烟熏法构建COPD大鼠模型,并将其分为模型组、STAT3抑制剂组、阳性对照组,每组10只,另取正常大鼠10只作为对照组。建模结束后,给予STAT3抑制剂组大鼠尾静脉注射STAT3特异性抑制剂Stattic,阳性对照组大鼠灌胃醋酸地塞米松溶液,对照组和模型组灌胃生理盐水,均干预28 d。干预结束后,在光学显微镜下计数大鼠肺泡灌洗液中白细胞数量及其他分类细胞比例;采用HE染色法观察大鼠肺组织病理学变化;采用Image J软件测定大鼠支气管管壁面积及支气管平滑肌厚度;采用ELISA检测大鼠肺组织中分泌型IgA(SIgA)、分泌成分(SC)、转化生长因子β1(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)含量;采用Western blot检测大鼠肺组织中STAT3磷酸化水平和iNOS蛋白表达水平。(2)将大鼠支气管上皮细胞分为正常组、模型组、si-NC组、si-STAT3组,si-NC组细胞转染载体质粒si-NC,si-STAT3组细胞转染载体质粒si-STAT3,模型组和正常组细胞不给予干预。转染24h后,使用含3.0%香烟烟雾提取物的DMEM培养模型组、si-NC组和si-STAT3组细胞,使用DMEM培养正常组细胞。培养48 h后采用实时荧光定量PCR检测各组细胞的白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、STAT3、iNOS mRNA表达水平。结果(1)对照组大鼠肺组织结构正常,气道上皮结构完整,无明显炎性细胞浸润。与对照组相比,模型组大鼠肺组织出现大量炎性细胞浸润,肺泡结构紊乱,上皮组织脱落,肺泡腔不规则扩张,肺泡灌洗液中白细胞计数及淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞比例增加,支气管壁面积及支气管平滑肌厚度增加,肺组织中SIgA、SC、TGF-β1、VEGF含量及STAT3磷酸化水平、iNOS蛋白表达水平均升高,而肺泡灌洗液中单核巨噬细胞比例降低(均P<0.05)。STAT3抑制剂组与阳性对照组大鼠的上述指标较模型组均改善(均P<0.05),但两组上述指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)与正常组相比,模型组和si-NC组细胞的IL-1β、TNF-α、STAT3、iNOS mRNA表达水平均升高(均P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-STAT3组细胞的IL-1β、TNF-α、STAT3、iNOS mRNA表达水平均降低(均P<0.05)。结论在香烟烟雾诱导的COPD伴气道重塑中STAT3/iNOS通路处于激活状态,抑制该通路的激活可减轻肺组织和支气管上皮细胞的炎症反应,改善气道重塑。

百里醌调控M2型巨噬细胞表型极化的机制研究

目的考察黑种草子中的活性成分百里醌(thymoquinone)对M2型巨噬细胞极化的调控机制。方法利用白介素4(IL-4)诱导鼠源巨噬细胞为M2型巨噬细胞模型;MTT法观察百里醌对细胞活力的影响;Trans-well小室迁移实验考察巨噬细胞造模前后自身迁移力的变化、对乳腺癌4T1细胞的迁移能力变化及百里醌干预的影响;qRT-PCR法考察百里醌对M2型巨噬细胞内精氨酸酶1(Arg1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)m RNA的影响;Western blot法考察百里醌对细胞内ARG1、i NOS蛋白及信号传导与转录激活因子6(STAT6)信号通路的影响。结果百里醌不仅抑制巨噬细胞向M2表型极化后自身迁移力的提高,也抑制M2型巨噬细胞促进乳腺癌4T1细胞的体外迁移加剧。百里醌呈剂量依赖性抑制Arg1同时提高i NOS的表达,降低STAT6蛋白的磷酸化水平。结论百里醌逆转巨噬细胞M2表型极化,部分通过抑制IL-4/STAT6信号通路的活化,调控Arg1/iNOS的表达消长而干预M2表型极化进程中巨噬细胞自身及其促乳腺癌细胞的体外迁移加速。

和血明目片改善老年性黄斑变性的机制

目的:探讨和血明目片通过调节STAT3-iNOS信号通路改善老年性黄斑变性的机制。方法:选取老年性黄斑病变患者100例,分为治疗组53例及对照组47例,其中治疗组服用和血明目片,对照组服用维生素C、E。治疗3个月后,检测并比较两组治疗前后的矫正视力及STAT3-iNOS mRNA的表达。结果:治疗组较对照组STAT3、iNOS mRNA表达降低、视力值升高(P<0.05)。结论:和血明目片可通过促进STAT3-iNOS信号通路的表达改善老年患者黄斑变性带来的视力影响。