A型激酶锚定蛋白及其信号复合物结构与功能

A型激酶锚定蛋白(A-kinase anchoring proteins,AKAPs)是一类结构不同而功能相关的蛋白家族,其主要功能是将cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)锚定于特定的亚细胞结构.PKA是第二信使cAMP的主要效应器,而AKAPs在靶向定位和调节PKA介导的磷酸化事件方面扮演重要角色.AKAPs更为重要的功能是与多种信号分子形成信号复合物,从时间和空间上整合cAMP-PKA和其他信号途径.本文将对AKAPs及其信号复合物的结构特点和参与细胞信号转导的功能机制及其研究现状进行概述.

CD81与免疫信号复合物

CD81是人B细胞上抗增值抗体识别的靶点,是四跨膜蛋白超家族的成员之一,CD81在体内外免疫细胞上广泛表达并参与多种生理反应。CD81存在于除红细胞和血小板之外的几乎所有组织,CD81在不同的细胞的细胞膜上和不同的蛋白相关联,在B细胞上和CD19、CD21、MHCⅡ类分子相关,在T细胞上和CD4、CD8分子相关。本文主要就CD81在免疫信号复合物中的功能作一综述。

信号分子复合物在细胞信号转导中的作用及其研究技术

细胞的代谢、迁移、增生、分化等活动,都是在各种信号分子(signalingmolecules)的控制下进行的。各种细胞过程并非单个信号转导分子的直接作用就能完成的,而是以多个相关分子形成复合物的形式参与调控。例如多种转录因子在调节基因表达时,通常都是相互作用形成复合物而发挥功能的。细胞的生命过程并不仅是许多独立反应的总和,而是由信号分子复合物执行并调控的。通过生物大分子之间的相互作用并形成不同的复合物,从而对细胞信号过程进行精密调控。本文对信号分子复合物的形式、功能域、调节机制以及研究的主要技术手段进行综述,并预测信号分子复合物的研究前景。

肝内信号肽酶复合物表达情况与慢性乙型肝炎临床特征的相关性

目的本研究探索信号肽酶复合物(SPC)在HBeAg(+)慢性乙型肝炎及HBeAg(-)慢性乙肝炎(CHB)患者肝脏中的表达是否存在区别,并结合两类患者肝组织病理改变(炎症、纤维化)、HBV DNA水平、血清HBeAg水平、肝功能损害水平等指标,期望为研究SPC与CHB发展、转归之间的关系提供一些实验室依据。方法选HBeAg(+)患者30例为A组,HBeAg(-)患者30例为B组。采集患者的性别、年龄数据;检查两组患者的肝功能(ALT、AST、TBIL)、血清HBV-DNA定量、血清HBeAg定量;对两组患者行肝穿刺病理活检,确定其炎症程度、纤维化程度;并对肝组织切片行SPC免疫组化染色,根据Shimizu标准作SPC染色积分统计,以了解SPC在肝内的表达。进行统计学分析对比两组患者上述数据的差异。结果 A组肝组织中SPC表达程度、炎症程度、HBV-DNA水平、血清e抗原滴度、ALT水平、AST水平均较B组高,差异有统计学意义(P<0.05)。而纤维化程度、年龄则较B组低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组在性别和TBIL升高幅度上差异无统计学意义(P>0.05)。使用Spearman分析,发现SPC积分与HBeAg滴度呈正相关(r=0.704,P<0.01);与HBV-DNA呈正相关(r=0.571,P<0.01);与ALT呈正相关(r=0.587,P<0.01);与AST呈正相关(r=0.511,P<0.01);与TBIL呈负相关(r=-0.289,P=0.25);与炎症程度呈正相关(r=0.421,P<0.01);与纤维化程度呈负相关(r=0.655,P<0.01)。结论 SPC在肝组织中的表达定量与血清HBeAg滴度呈正相关,并与ALT/AST升高幅度、肝组织病理改变、血清病毒载量、e抗原滴度等相关。

人肝癌相关新基因编码产物LAPTM4B的鉴定及其生物学特性

目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 35× 10 3 和 2 4× 10 3 、等电点分别为 9.0 7和 4 .6 5的两种异型分子。它们在肝癌组织及肝癌细胞系的表达显著上调 ,而相对分子质量为 35× 10 3 者尤为明显 ,并与细胞分化程度相关。LAPTM4B蛋白可与整合素α 6亚单位及表皮生长因子 (EGF)受体形成信号复合物。结论 :LAPTM4B 35蛋白在人肝癌组织及细胞系过表达 ,并可能通过与细胞表面的整合素受体及EGF受体形成复合物而参与细胞外基质成分所启动的信号转导。

蛋白质组学与神经科学:从蛋白质到网络

多蛋白质信号复合物在所有细胞中都很重要 ,它们在脑内信息处理中也有着重要作用。质谱、双向凝胶电泳、蛋白亲和技术、高通量的免疫组化方法和蛋白质组信息学都是蛋白质组学研究的主要手段。应用蛋白质组学方法可以研究多蛋白质信号复合物的功能 ,多样性与组成的动态变化。因此 ,蛋白质组学发展使得人们从单个蛋白质的研究上升到对蛋白质网络的研究。

信号肽酶21启动区SNP分布及其与HBV感染转归的关系

目的了解中国汉族人信号肽酶复合物(SPC)21基因启动区单核苷酸多态性(SNP)的出现情况,探讨其与HBV感染转归的关系。方法收集40例健康人、40例HBV持续感染者和23例HBV自限性感染者的全血并提取全基因组DNA,以PCR技术扩增SPC21启动区约1 200 bp的区域进行DNA序列分析。结果在各组样本中SPC21启动区的SNPs位点-933(A/C)、-885(G/T)、-779(C/T)和-596(C/T)均存在多态性,而在-1189、-1180和-966位点未见多态性。与GenBank登记情况比较显示,-885(G/T)和-779(C/T)的基因型分布与登记数据类似。生物信息学分析提示,-933(A/C)与-596(C/T)存在连锁关系。各SNP的基因型、等位基因和单体型的分布频率在健康人、持续感染者和HBV自限性感染者中的差异无统计学意义。结论在汉族人群中,SPC21启动区存在SNPs多态性,且有自身特点,但其基因型、等位基因和单体型分布与HBV感染转归无明显相关性。

α-常春藤皂苷调控SNX10介导的谷氨酰胺代谢抑制肠上皮细胞恶性转化研究

目的 研究干扰分选连接蛋白10(sorting nexin 10,SNX10)表达对人正常肠上皮FHC、NCM460细胞增殖、谷氨酰胺代谢的影响及α-常春藤皂苷调控作用的分子机制。方法 利用转染技术构建稳定敲低SNX10的FHC、NCM460细胞,qRT-PCR和Western blotting检测敲低效率;CCK-8、克隆形成实验检测细胞增殖能力;MTT筛选α-常春藤皂苷实验浓度并检测其对SNX10表达的影响;检测细胞内还原型谷胱甘肽含量;Western blotting检测细胞SNX10、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,m TORC1)/c-myc信号通路相关蛋白及下游谷氨酰胺转运蛋白SLC7A5表达情况。结果 敲低SNX10后FHC、NCM460细胞增殖异常加快(P<0.01),细胞内还原型谷胱甘肽含量异常升高(P<0.01),m TORC1/c-myc通路被激活,下游SLC7A5表达升高;而α-常春藤皂苷干预SNX10敲低细胞系后,细胞SNX10表达升高(P<0.05、0.01),且上述变化发生逆转并渐趋空载细胞水平。结论 SNX10有望成为结直肠癌临床诊断及防治的新靶点,α-常春藤皂苷可逆转肠上皮细胞因SNX10敲低导致的快速增殖、m TORC1/c-myc信号通路活化及谷氨酰胺代谢的异常升高,从而抑制正常肠上皮细胞的恶性转化。

β-arrestin2在Ⅱ型糖尿病致病机理中的作用

II型糖尿病现已成为世界上影响范围最广、危害最大的疾病之一,其典型特征是外周组织的胰岛素耐受。胰岛素耐受的形成原因主要是血液中循环的胰岛素不能刺激激活脂肪、肝脏、肌肉中的胰岛素信号通路,但其形成的具体机制还不是很清楚。我们发现在II型糖尿病模型小鼠肝脏样品中β-arres-tin2的表达水平显著下调,暗示了其在II型糖尿病中的潜在作用。我们进一步的研究发现β-arrestin2基因敲除可导致严重的胰岛素耐受,而过表达β-arrestin2则能显著提高胰岛素敏感性。我们发现β-arrestin2介导了胰岛素信号通路中新的信号复合物的形成,这一复合物包含IR/Akt/β-arrestin2/Src,并对胰岛素信号的传递以及胰岛素代谢功能的行使起到了至关重要的作用。β-arrestin2在这个复合物中起到了支架蛋白的作用,它将Akt、Src与IR联系在一起,β-arrestin2的缺失或功能异常直接导致复合物的解聚、胰岛素信号的阻滞并最终导致胰岛素耐受。我们的研究工作不仅发现了胰岛素信号途径中一个全新的由β-ar-restin2介导的信号复合物,这个信号复合物对于胰岛素信号传递以及胰岛素敏感性的确立起着重要的作用,而且为II型糖尿病的防治和治疗提供了一个新的理论指导和研究靶点。

纹蛋白在高血压调控中的作用

纹蛋白家族是一类存在于多细胞动物的支架蛋白,除了纹蛋白（striatin、STRN）,还包括SG2NA（STRN3）、zinedin（STRN4）。他们主要分布在神经系统中,而纹蛋白和SG2NA还在心脏、肾脏、血管中分布,参与形成信号复合物、组装细胞骨架、调控细胞周期和囊泡运输。

始基卵泡活化的分子机制研究进展

始基卵泡是哺乳动物整个生殖期限中各级卵泡及卵子发育的源头。始基卵泡的激活既需要卵母细胞内如PI3K-PTEN-AKT-FOXO3、mTORC1及p27Kip1-CDK体系等信号通路的正常激活,也需要一些卵母细胞特异性的分子如Nobox和Sohlh1等的参与,除此之外,始基卵泡周围的前颗粒细胞也发挥巨大作用,其首先在m TORC1等信号通路的调节下分化为立方形颗粒细胞,改变自身形态,启动始基卵泡活化,其次可通过分泌KITL与卵细胞表面KIT结合后激活调节卵细胞生长的关键通路——PI3K信号通路,最终导致卵母细胞生长及始基卵泡的正常激活。了解始基卵泡活化过程有助于阐明卵子发生的分子机制,为女性不孕提供新的治疗靶点。