分枝链DNA信号扩增试验定量检测慢性乙型肝炎患者血清中HBV DNA

观察干扰素治疗过程中ＨＥＶＤＮＡ量的变化。方法与结果对－组ｅ抗原阴性ＨＢＶＤＮＡ阳性用干扰素治疗的慢性乙型肝炎患者，用分枝链ＤＮＡ（ｂＤＮＡ）信号扩增试验、聚合酶链反应及膜杂交试验检测血清中ＨＢＶＤＮＡ，其检出率分别为７６．５％、１００％和４７．１％用ｂＤＮＡ信号扩增试验观察了这组患者在干扰素治疗过程中ＤＮＡ含量的变化，发现８２．４％的患者治疗后ＤＮＡ降至低于检测水平，其中３２％的患者出现反跳；６１．８％的思者血清ＤＮＡ含量变化与ＡＬＴ反应相一致。结论ｂＤＮＡ信号扩增试验可定量检测病毒核酸，是考核抗病毒药物疗效的较好方法。

HIV-1病毒载量检测常用技术及研究进展

病毒载量检测是HIV-1感染后需要长期观察的重要指标,在基础研究、早期感染的诊断、药物治疗学研究和流行病学监测方面都有特殊的意义。目前普遍使用的HIV病毒载量检测主要是测定血浆中病毒RNA的量,采用的方法包括荧光定量PCR技术、核酸等温扩增技术以及分支DNA杂交技术等。检测的样本包括血清、分泌物及全血制备的干血斑等多种类型,检测的靶点也会涉及到细胞基因组中整合的病毒DNA的应用。反转录酶法检测技术和其他等温扩增技术等许多技术已用于实验检测,一些交叉学科技术正进行着实验性探索。我国已有HIV-1病毒载量检测实验室140余家,3种经典的检测技术均有涉及。各种技术特点不同,但在病毒载量检测工作中均发挥巨大的作用。

血清游离DNA定量检测对宫颈癌临床诊断的价值

目的 探讨血清cf-DNA定量检测在宫颈癌早期辅助诊断及预后判断中的价值.方法 病例对照研究.收集南通大学附属医院2010年11月至2012年6月收治的40例宫颈癌患者,均经组织病理学证实;其中鳞癌患者36例,腺癌患者4例.选择同期CINⅢ患者32例,门诊体检健康妇女58名.采用分支DNA（bDNA）技术检测血清cf-DNA含量,采用化学发光法检测血清中鳞状细胞癌抗原（SCC）、铁蛋白（FER）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原19-9（CA19-9）的含量.统计学分析采用Mann-Whitney U检验、Kruskal Wallis检验及Spearman相关检验.结果 宫颈癌患者、CINⅢ患者和健康对照者血清cf-DNA含量分别为1373.17 （976.13 ～ 2337.08）、225.15（106.89 ～ 313.59）、188.80（111.30～314.15） ng/ml,宫颈癌患者血清cf-DNA含量显著高于CINⅢ患者及健康对照者（Z=-6.312,-7.351,P均＜0.001）,而CINⅢ组和正常对照组之间差异无统计学意义（Z=-0.438,P=0.661）.其中,Ⅱ～Ⅲ期患者的血清cf-DNA水平2490.26（1407.86 ～ 4326.12） ng/ml明显高于Ⅰ期1267.54（633.01 ～ 1586.43） ng/ml（Z=-3.394,P=0.001）.宫颈癌患者血清cf-DNA含量在不同分化程度、病理类型分组间无统计学差异.血清cf-DNA浓度与SCC（r=-0.160,P=0.324）、FER（r=0.032,P =0.842）、CA125（r=0.077,P =0.638）、CA19-9 （r=0.135,P =0.406）没有相关性.使用ROC曲线分析血清cf-DNA浓度对宫颈癌患者的诊断效能,其曲线下面积（0.938）高于传统指标血清SCC （0.772）、FER （0.721）、CA125 （0.615）、CA19-9（0.601）.结论 血清cf-DNA水平有助于宫颈癌的早期辅助诊断及预后判断.血清cf-DNA对宫颈癌的辅助诊断价值要优于传统肿瘤标志物SCC、FER、CA125、CA19-9.

分支DNA技术检测胃癌患者血清游离DNA的应用价值

目的分析探讨分支DNA（branched DNA，bDNA）技术定量检测胃癌患者血清游离DNA（cell free DNA，cf-DNA）水平与临床病理特征间的关系，及其在胃癌辅助诊断中的应用价值。方法病例对照研究。收集2011年9月至2012年2月南通市肿瘤医院经病理诊断确诊的99例胃癌患者和100名健康人血清标本，2010年3月至2012年2月南通大学附属医院经病理诊断确诊的32例胃良性肿瘤患者血清标本。用bDNA技术检测其cf-DNA浓度，化学发光法检测其癌胚抗原（CEA）、糖抗原（CA）19—9、CA50、CA72-4含量。用Dunn’S检验比较胃癌组与对照组（良性肿瘤、健康人）cf-DNA含量的差异；绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估上述5项指标诊断胃癌的效能；Mann—Whitney检验分析血清cf-DNA浓度与患者性别、年龄的相关性；Kruskal—Wallis检验分析血清cf-DNA浓度与患者肿瘤部位、肿瘤分化程度、肿瘤淋巴转移分类（AJCC）分期的相关性。结果胃癌组、胃良性肿瘤组和健康对照组血清cf-DNA含量分别为2316．0（1028．7～3742．1）、423．3（256．3～519．2）、317．5（172．5～499．7）μg/L，胃癌组cf-DNA含量显著高于胃良性肿瘤组（q=7．612，P〈0．01）及健康对照组（q=7．062，P〈0．01），而胃良性肿瘤组与健康对照组差异无统计学意义（q=0．598，P〉0．05）。胃癌患者血清cf-DNA含量在不同年龄（t=1388．000）、性别（t=845．000）、肿瘤部位（H=3．471）、肿瘤分化程度（H=0．288）、AJCC分期分组（H=6．053）间的差异无统计学意义（P均〉0．05）。胃癌组血清cf-DNA与CEA、CA19-9、CA50、CA72-4无相关性（尺^2值分别为0．0385、0．0159、0．0029、0．0079，P均〉0．05）。当上述5项指标的最佳诊断临界值分别为973．6μg/L、4．0μg／L、32．8kU／L、12．8kU／L、5．1kU／L时，胃癌组血清cf-DNA的ROC曲线下面积及诊断敏感度[0．94，76．8％（76／99）]均高于血清CEA[0．66，31．3％（31／99）]、CA19—9[0．63，16．2％o（16／99）]、CA50[0．83，44．4％（44／99）]、CA72-4[0．67，35．4％（35／99）]；血清cf-DNA特异度[96％（96／100）]与血清CEA[98％（98／100）]、CA19-9[78％（78／100）]、CA50[97％（97／100）]、CA72-4[98％（98／100）]较接近。结论bDNA技术定量检测胃癌患者血清cf-DNA比血清CEA、CA19-9、CA50、CA72-4有较高敏感度及特异度。且对胃癌辅助诊断有一定的指导和应用价值。r手华检验医学杂舌，2013，36：699—703）