信号肽引导源基因在昆虫表达系统中的分泌表达

将杆状病来源的gp67信号肽引导的慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因与植物来源的慈姑蛋白酶抑制剂信号肽引导的慈姑蛋白抑制剂(API)基因,分别克隆到昆虫杆状病毒转载体pBacPAK8中,通过共转染将它们分别整合到昆虫病毒表达载体Bm-BacPAK6中,将获得的重组病毒CrBK-API2和CrBK-bpAPI4分别接种家蚕(Bombyxmori)细胞、家蚕幼虫及蛹体中,慈姑蛋白酶抑制剂得到了高效表达。从家蚕细胞的表达来看,外源表达产物大多存在于细胞外的上清液中;从家蚕幼虫体内表达来看,信号肽能引导外源基因高效表达,且表达产物的90%以上能分泌到细胞外;蛹体中的表达情况与幼虫中的相似,但表达产物出了不均一的现象,从表达产物的分子量测定来看,这两种信号肽在表达过程中都没有被切除。