信号识别颗粒14调控肝细胞癌进程并影响患者预后

目的:探究信号识别颗粒14(SRP14)在肝细胞癌(HCC)中的表达及功能。方法:利用生物信息学、定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫组织化学染色和蛋白质印迹法等明确SRP14在HCC中的表达;应用Kaplan-Meier法分析SRP14 mRNA表达变化与HCC患者的总生存期、无进展生存期及疾病特异性生存期的相关性;通过5-乙基-2′-94脱氧尿苷(EdU)染色、MTS实验、Transwell小室实验及细胞划痕实验等探索SRP14对HCC细胞增殖和迁移的作用;利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体(GO)富集分析以及qRT-PCR初探SRP14在HCC中的作用机制。结果:在GSE14520数据集、TNMplot数据库和临床标本中,与配对癌旁组织、非配对癌旁组织或正常组织比较,HCC组织的SPR14 mRNA表达均有不同程度的升高(均P<0.05)。在临床标本中,与配对癌旁组织比较,HCC组织的SPR14蛋白表达上调(P<0.05)。SRP14表达上调的HCC患者具有更长的总生存期、无进展生存期及疾病特异性生存期(均P<0.05)。细胞实验结果显示,SRP14能抑制HCC细胞的体外增殖和迁移。KEGG和GO富集分析结果显示,在HCC中,与SRP14共表达的基因主要调控蛋白质合成、加工和运输等相关细胞活动或功能;在非酒精性脂肪性肝病相关HCC中,与SRP14共表达的基因主要调控MAPK、cAMP、PI3K-Akt、Wnt等多条信号传导通路。SRP14抑制HCC细胞中已知抑癌基因GPRC5A的mRNA表达(P<0.05)。结论:SRP14可能调控HCC进程并影响患者预后。

Hv古细菌SRP19基因的克隆、表达、重组蛋白的纯化及生物学活性的研究

目的:构建Hv古细菌SRP19蛋白的表达载体pET23d-Hv SRP19并在大肠杆菌中表达后进行纯化和研究其生物学活性,为研究SRP循环的分子机制奠定基础。方法:用体外合成的重组DNA技术,先合成具有重叠碱基的10个寡核苷酸短序列,通过拼接,获得Hv SRP19基因全长DNA后,克隆到pET23d载体上。重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中的大量表达产物经Q-Sepharose离子交换层析柱纯化后再用蔗糖密度梯度超速离心法分析其生物学活性。结果:正确构建了pET23d-Hv SRP19表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中获得良好的表达;成功地纯化了表达产物,纯度达95%;证明了具有SRP19蛋白的生物学活性,能够与Hv SRP RNA相互作用形成SRP19-SRP RNA的复合物。结论:纯化的Hv SRP19蛋白与Hv SRP RNA相互作用所形成的复合物,被认为是启动SRP颗粒形成和功能发挥的开始。

信号识别颗粒调控蛋白转运系统

蛋白质是一类重要的生物大分子。在蛋白质转运系统中,很多蛋白质在核糖体中合成,然后通过内质网或质膜的转运到达相应的细胞器发挥生物学功能。蛋白质的分泌表达途径总共分为三类,分别为Sec分泌途径、双精氨酸途径和信号识别颗粒转运系统。本文简要介绍蛋白质的基本转运途径,主要介绍由信号识别颗粒所介导的蛋白质转运。分别概述信号识别颗粒及其受体的组成与功能,并对其调控途径做简要的介绍;同时也简单介绍与其相关的Yid C膜蛋白家族;对信号识别颗粒蛋白调控系统存在的必需性提出新的见解。

信号识别颗粒(SRP)在膜蛋白定位中的作用

依赖信号识别颗粒(signal recognition particle,SRP)的共翻译转运是所有生命体中的一个保守途径,它将新生肽链的翻译与转运耦联在一起。超过30%的新合成的多肽链被SRP转运到正确位置。最近的研究表明,大肠杆菌中SRP抑制子可以规避SRP的需求。当SRP缺失时,翻译控制在介导膜蛋白定位方面起着关键作用。本综述总结了SRP底物如何在存在或缺失SRP的情况下转运到适当的位置以及翻译速率降低如何补偿SRP的缺失。我们还讨论了不同蛋白质对SRP的依赖程度。这一回顾将为进一步研究SRP功能及膜蛋白定位提供新思路。

依赖SRP对大肠杆菌膜蛋白定位的研究

大肠杆菌中,信号肽识别颗粒(signal recognition particle,SRP)识别并绑定核糖体正在翻译的信号肽,引导新生肽链到细胞膜上。根据靶向膜蛋白生物素酰化原理,本研究利用Western blot方法,对构建的HDB51菌株及野生型菌株MG1655进行大肠杆菌膜蛋白定位研究。对比不同菌株中是否含有SRP,结果发现,在缺失SRP的HDB51菌株中检测到依赖SRP的底物蛋白FtsQ的定位,缺失SRP明显影响了FtsQ的定位,SRP具有辅助膜蛋白定位的功能,从而为研究依赖SRP性大肠杆菌膜蛋白定位提供理论依据。

肿瘤分泌蛋白质组研究进展

分泌蛋白质是指在细胞内合成后，分泌到细胞外起作用的蛋白质，包括各种肽类激素、细胞因子、免疫球蛋白、补体、蛋白水解酶等。一般的分泌蛋白质在其N末端具有特征性的信号肽结构。在分泌蛋白质的合成过程中，信号肽能够被胞质中的信号识别颗粒（signal recognition particle，SRP）所识别，并引导核糖体结合到内质网膜。随后，内质网膜上核糖体合成的不断延长的多肽链进入内质网腔，并在该处经过折叠和糖基化修饰后运输到高尔基复合体。

whi3对蛋白质命运的调制作用

许多分泌型膜连蛋白都有-末端信号肽序列．这一序列在翻译过程中可以为信号识别颗粒（SrP）所识别。但是此信号可促使新生蛋白质跨越内质网（ER）膜；此外．并非所有的结合于ER的蛋白质都具有SrP标签．而且由于缺乏SrP的细胞仍然具有正常功能．所以细胞里一定还有另外一些蛋白质定位的决定因素。本文作者提出名为Whi3的酵母RNA结合蛋白．他们认为这种蛋白可能具有蛋白质定位调节功能。Whi3已知可以结合于细胞周期蛋白Cln3基因（cyclin Cln3）的mRNA上．使其翻译接近于ER部位：