微小RNA-182-5p和信号转导分子7在翼状胬肉中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-182-5p(miR-182-5p)和信号转导分子7(SMAD7)在翼状胬肉中的表达情况,探讨二者与患者临床病理特征及预后的相关性。方法选择2018年6月—2021年6月在本院眼科进行手术切除的原发性翼状胬肉组织标本150例进行研究,另选择同期因白内障手术获取的正常球结膜标本60例作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测标本miR-182-5p、SMAD7 mRNA表达水平;采用免疫组织化学染色检测SMAD7蛋白表达水平;采用Pearson法分析翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达水平的相关性;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-182-5p和SMAD7的靶向关系。结果翼状胬肉组织中,miR-182-5p表达水平为(2.26±0.45),高于正常结膜组织的(1.05±0.12);SMAD7 mRNA表达水平为(0.67±0.12),低于正常结膜组织的(1.03±0.15);SMAD7蛋白阳性表达率为23.33%,低于正常结膜组织的71.67%;上述组间差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达呈负相关(r=-0.536,P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-182-5p与SMAD7存在靶向关系;miR-182-5p在进展期表达水平高于静止期,SMAD7在进展期阳性表达低于静止期,差异有统计学意义(P<0.05);与治愈组比较,复发组翼状胬肉组织miR-182-5p表达水平较高,SMAD7 mRNA表达水平及SMAD7阳性表达率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论翼状胬肉组织中,miR-182-5p呈高表达,SMAD7呈低表达,且二者均与患者临床病理特征和预后有关,或可成为翼状胬肉的治疗靶点。

食管鳞癌组织miR-106b、Smad7表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系

目的探讨组织微小RNA-106b(miR-106b)、信号转导分子7(Smad7)在食管鳞癌发生、发展中的作用。方法选择食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常组织各97例份。采用qRT-PCR法检测食管鳞癌组织及癌旁正常组织miR-106b、Smad7 mRNA表达,分析二者的关系及其与患者临床病理参数和预后的关系。结果食管鳞癌组织miR-106b相对表达量高于癌旁正常组织,Smad7 mRNA相对表达量低于癌旁正常组织(P均<0.05)。相关性分析显示,食管鳞癌组织miR-106b与Smad7表达呈负相关(r=-0.778,P<0.05)。miR-106b、Smad7表达与食管鳞癌患者临床分期、组织分化程度、淋巴结转移均有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤直径及浸润深度均无关(P均>0.05)。生存分析显示,miR-106b高表达、Smad7低表达患者预后较差(P均<0.05)。结论 miR-106b、Smad7异常表达与食管鳞癌的发生、发展及预后有关,Smad7可能是miR-106b的负性调控靶基因。

抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠心肌TGF-β_1,TGF-βRⅡ及Smad7蛋白表达的影响

目的:探讨糖尿病对大鼠心肌转化生长因子-β1(TGF-β1),转化生长因子-β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)及人信号转导分子7(Smad7)蛋白表达的影响及抵当汤及其拆方的干预作用。方法:105只SD雄性大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型。成模后分为模型组、抵当汤干预组、水蛭虻虫组、桃仁大黄组和缬沙坦组,以12只正常SD雄性大鼠作为正常组,分别给予相应处理。8周末,利用全自动生化仪检测空腹血糖(FBG),HE染色观察心肌病理形态学变化,Western blot法检测TGF-β1,TGF-βRⅡ及Smad7蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌组织细胞肥大,炎症细胞浸润较明显,心肌TGF-β1及TGF-βRⅡ蛋白表达明显升高,Smad7蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,抵当汤可以明显减轻糖尿病大鼠心肌组织的病理改变,抵当汤明显下调大鼠心肌TGF-β1蛋白及TGF-βRⅡ蛋白表达,明显上调Smad7蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。拆方组大鼠与糖尿病模型大鼠组比较,TGF-β1蛋白下调,心肌组织损伤也有好转,但均不如全方明显。结论:抵当汤可减缓糖尿病大鼠心肌纤维化病变,其机制可能与下调糖尿病大鼠心肌中TGF-β1和TGF-βRⅡ蛋白表达,上调Smad7蛋白的表达有关,同时表明,抵当汤全方对DCM病变的防治作用优于拆方,"泻热化瘀通络"治法与抑制TGF-β1/Smad7信号转导通路有关。

B细胞转位基因3在乳腺癌组织的表达及其对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的观察B细胞转位基因3(BTG3)在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响.方法选择80例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织,采用蛋白质印迹法(Western blot)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定乳腺癌组织和癌旁组织中BTG3蛋白和mRNA水平.将MCF-7细胞分为Blank组(不转染)、NC组(转染空载体)和Ex-BTG3组(转染过表达BTG3载体).噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力,Transwell小室测定细胞侵袭能力,划痕实验测定细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR测定细胞BTG3、转化生长因子-β1(TGF-β1)、人信号转导分子7(Smad7)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白和mRNA水平.采用t检验和方差分析.结果乳腺癌细胞MCF-7中BTG3蛋白(0.18±0.06)和mRNA水平(0.56±0.07)均低于正常乳腺上皮细胞HBL-100 (0.44 ±0.09、1.00 ±0.04)(t=5.375、12.203,P<0.05).与Blank组和NC组比较,Ex-BTG3组MCF-7细胞吸光度(A)值降低(t=4.214、4.185、3.941、3.952,P<0.05),侵袭细胞数降低(t=5.624、5.315,P<O.05),划痕面积升高(t=7.426、7.437,P<0.05),TGF-β1、Vimentin蛋白水平降低(t=3.012、3.024、3.105、3.108,P<0.05),BTG3、Smad7、E-cadherin蛋白水平升高(t=4.516、4.518、3.231、3.118、3.402、3.411,P<0.05).结论乳腺癌组织中BTG3水平下降,过表达BTG3可通过抑制TGF-β1/Smad信号通路抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭能力.