莪术醇通过PI3K/AKT信号通路介导急性髓系白血病细胞程序性死亡

目的:探讨莪术醇对急性髓系白血病(AML)细胞恶性生物学特性的影响及其分子机制,为传统中医药抗白血病治疗提供理论与实验依据。方法:用不同浓度莪术醇作用于AML细胞株HL-60、KG-1细胞后,CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot检测凋亡蛋白和PI3K/AKT信号通路蛋白的表达变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测Caspase家族mRNA的表达情况。结果:莪术醇可抑制HL-60、KG-1细胞的增殖活性,并诱导细胞凋亡,其通过上调Bax蛋白表达并下调Bcl-2蛋白的表达以促进细胞凋亡(P<0.05)。当莪术醇干预HL-60、KG-1细胞后,其亦可通过抑制PI3K/AKT信号通路激活而诱导AML细胞的程序性死亡。此外,莪术醇干预后可上调HL-60细胞的Caspase 3、Caspase 6、Caspase 8以及Caspase 9的表达(P<0.05),可显著上调KG-1细胞的Caspase 3、Caspase 8和Caspase 9的表达(P<0.01),对Caspase 6的表达影响微弱(P<0.05),但低浓度(<60μg/ml)莪术醇对KG-1细胞Caspase 6的表达基本无影响(P>0.05)。结论:莪术醇可能通过抑制PI3K/AKT信号通路的激活、影响Bcl-2家族蛋白表达以及促进Caspase家族核心成员活化等介导AML细胞程序性死亡,从而发挥抗白血病作用。

基于NF-κB信号通路探究木犀草素对宫颈癌细胞增殖和凋亡的调控作用

目的:探讨木犀草素对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其对核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法:将HeLa细胞分为对照组、5μmol/L木犀草素组、10μmol/L木犀草素组、20μmol/L木犀草素组和抑制剂组。5、10、20μmol/L木犀草素组HeLa细胞分别经不同浓度(5、10和20μmol/L)木犀草素处理24 h,对照组HeLa细胞不做处理。筛选出10μmol/L为木犀草素最适浓度,然后将细胞分为对照组、10μmol/L木犀草素组和抑制剂组[10μmol/L木犀草素+2.5μmol/L BAY 11-7082(NF-κB信号通路抑制剂)]。采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)测定细胞增殖情况,平板克隆测定细胞克隆情况,Hoechst 33258测定细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA和细胞周期素D1(Cyclin D1)mRNA表达,蛋白免疫印迹(Western blotting)法测定Caspase-3、Cyclin D1、NF-κB和p-NF-κB蛋白表达。结果:10、20μmol/L木犀草素组细胞增殖率、克隆形成率、Cyclin D1 mRNA和Cyclin D1蛋白相对表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);10、20μmol/L木犀草素组细胞凋亡数、Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。因此本实验选择低浓度(10μmol/L)木犀草素加入NF-κB通路抑制剂作为抑制剂组进行后续验证实验。抑制剂组细胞增殖率和克隆形成率低于10μmol/L木犀草素组,差异有统计学意义(P<0.05)。10μmol/L木犀草素组Cyclin D1 mRNA、Cyclin D1蛋白、p-NF-κB蛋白相对表达量低于对照组,Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);抑制剂组Cyclin D1 mRNA、Cyclin D1蛋白、p-NF-κB蛋白相对表达量低于10μmol/L木犀草素组,Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量高于10μmol/L木犀草素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:木犀草素可能通过抑制NF-κB信号通路诱导HeLa细胞的凋亡并减弱其增殖能力。

基于RhoA/Rho信号通路探讨产妇子宫平滑肌组织Thr38、KCa3.1、KLF4表达水平与产后出血的关系

目的:基于RhoA/Rho信号通路探讨产妇子宫平滑肌组织CPI-17(Thr38)、KCa3.1、Krüppel样因子4(KLF4)表达水平与产后出血的关系。方法:选择80例宫缩乏力性产后出血产妇为观察组,选择同期80例无产后出血产妇为对照组。采用肌条等长张力测定法检测离体子宫平滑肌的自发收缩活动力,以及加入Rho激酶抑制剂(Y-27632)后的子宫平滑肌收缩活动力。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应法检测子宫平滑肌组织中RhoA、ROCKⅠ以及ROCKⅡmRNA表达水平,采用蛋白质印迹法检测RhoA、ROCKⅠ以及ROCKⅡ以及Thr38、KCa3.1、KLF4表达水平。采用Pearson相关分析RhoA蛋白以及子宫平滑肌收缩活动力与Thr38、KCa3.1、KLF4的关系。结果:观察组的子宫平滑肌收缩活动力、收缩频率以及收缩幅度均低于对照组(P<0.05~P<0.01),加入Y-27632后,2组子宫平滑肌收缩活动力均低于加入前(P<0.05)。观察组RhoA/Rho信号通路相关mRNA以及蛋白(RhoA、ROCKⅠ、ROCKⅡ)表达水平均低于对照组(P<0.01)。观察组Thr38、KCa3.1、KLF4表达水平均低于对照组(P<0.01)。Pearson相关分析显示,子宫平滑肌RhoA/Rho信号通路相关蛋白、收缩活动力与Thr38、KCa3.1、KLF4表达水平均呈正相关关系(P<0.05)。结论:宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌组织的RhoA/Rho信号通路以及Thr38、KCa3.1、KLF4表达下降,且与收缩能力降低呈正相关关系,共同参与产后出血的发生。

长链非编码RNA XIST海绵miR-34通过Wnt/β-catenin信号通路促进结肠癌进展的机制

目的探讨长链非编码RNA XIST海绵miR-34促进结肠癌进展的机制;方法以人类结肠癌组织和相应的非肿瘤组织为研究对象,对人结肠癌细胞系(SW480,HCT116与HT29)和正常结肠上皮细胞系NCM460进行培养和转染,分别对细胞增殖能力、菌落形成能力、细胞迁移能力进行测定,利用qRT-PCR对mRNA表达量进行测定;荧光素酶报告分析实验检测荧光素酶活性;通过Western blotting分析对细胞捏蛋白表达量进行测定;利用动物实验进行皮下异种移植,测定肿瘤重量。结果XIST在结肠癌组织中的表达高于癌旁组织,XIST上调与晚期TNM分期、淋巴管及远处转移呈正相关,与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无相关性;结肠癌细胞系的XIST表达水平与正常细胞系相比上调,XIST沉默抑制了细胞的入侵能力;结肠癌组织中miR-34a水平降低,荧光素转运体实验证实了在miR-34模拟物和XIST野生型中荧光强度降低的结合;miR-34a抑制剂能够缓解si-XIST对细胞增殖的抑制作用且对两个细胞集落数和迁移数的抑制作用;WNT1水平在结肠癌组织中高于相邻正常组织;si-XIST能抑制c-Myc、cyclinD1和MMP-7的表达。结论XIST通过激活WNT/β-catenin信号通路调节结肠癌细胞的增殖和侵袭。

绞股蓝皂苷通过Nrf2/NF-κB信号通路发挥抗小鼠急性酒精性肝损伤作用

目的研究绞股蓝皂苷抗小鼠急性酒精性肝损伤作用及机制。方法 BALB/c小鼠分为对照组、酒精肝损伤模型组和绞股蓝皂苷3个剂量保护组。皂苷保护组每日给予低、中、高剂量绞股蓝皂苷灌胃连续1周。HE染色观察肝组织病理学改变;全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平;荧光定量PCR检测TNF-α、IL-6 mRNA水平;试剂盒检测氧化损伤相关指标; Western blot检测Nrf2和NF-κB信号通路蛋白水平。结果与对照组相比较,酒精模型组动物ALT、AST、TC和TG水平明显升高; TNF-α和IL-6表达水平明显升高;氧化损伤产物明显升高,抗氧化蛋白活性明显降低; Nrf2信号通路蛋白明显降低;细胞核内p65蛋白水平明显升高。不同剂量绞股蓝皂苷能够明显抑制模型组上述各项指标的变化。结论绞股蓝皂苷通过激活Nrf2/NF-κB信号通路有效地保护小鼠急性酒精性肝损伤。

大建中汤介导ERK1/2信号通路调控脾阳虚胃癌动物模型MMP-9的表达

目的:探讨大建中汤对SD大鼠脾阳虚胃癌模型胃癌组织中细胞外调节蛋白激酶1、2(ERK1、ERK2)、基质金属蛋白酶-明胶酶(MMP-9)mRNA的影响。方法:将健康SD大鼠随机分为正常组(A)、模型组(B)、大建中汤高、低剂量组(C、D组,给药剂量为生药10.8、5.4 g/kg)、西药对照组(E组,给药剂量为0.019g/kg)。A组予生理盐水,1次/d;B、C、D、E组予番泻叶水浸液灌胃、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)储存液自由饮用,并使其饮食失节、疲劳过度复制脾阳虚胃癌动物模型。5个月后,B组予生理盐水,1次/d;C、D组予大建中汤,1次/d;E组予环磷酰胺,1次/d。15d后,处死大鼠。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,检测大鼠ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的表达量。结果:模型组ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的表达量明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);大建中汤高、低剂量组、西药组ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的量明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大建中汤可通过调节ERK1/2信号通路调控MMP-9的表达。

从肠道有益菌群可激活AhR/ILC3s信号通路探讨解毒化浊法改善2型糖尿病胰岛素抵抗的理论机制

AhR/ILC3s通路与2型糖尿病胰岛素抵抗密切相关,调节肠道菌群可激活AhR/ILC3s通路从而改善胰岛素抵抗。浊毒与2型糖尿病胰岛素抵抗密切相关,解毒化浊法可改善胰岛素抵抗,且其机制与调节肠道菌群,抑制代谢性炎症有关,但是否通过AhR/ILC3s通路起作用尚未可知。笔者通过对胰岛素抵抗、代谢性炎症、AhR/ILC3s信号通路、浊毒理论等相关古今文献进行研究,对解毒化浊法与AhR/ILC3s改善胰岛素抵抗的理论机制相关性进行探讨。研究表明,肠道菌群—代谢性炎症—胰岛素抵抗是2型糖尿病发生发展的重要调节轴。肠道有益菌群可激活AhR/ILC3s信号通路,抑制代谢性炎症,是改善2型糖尿病胰岛素抵抗的关键环节。解毒化浊法可通过调节肠道菌群,激活AhR/ILC3s信号通路,抑制炎症反应,从而改善胰岛素抵抗,这可能是解毒化浊法改善2型糖尿病胰岛素抵抗的重要信号通路,也可能是解毒化浊法改善胰岛素抵抗的重要机制。

NF-kB/IκB-α信号通路对ATRA诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨NF-kB/IκB-α信号通路对全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞凋亡的影响。方法将HL-60细胞与不同浓度的ATRA共同孵育,MTT法观察ATRA对细胞增殖作用,流式细胞术及电镜分析细胞凋亡,Western-Blot检测NF-κB及IκB-α的变化。结果MTT显示ATRA呈时间-剂量依赖方式抗HL-60细胞增殖,作用72h流式细胞术DNA直方图上出现典型的亚二倍体凋亡峰,透射电镜下见细胞核染色质致密浓缩,凋亡小体形成,Western-Blot产物显示HL-60细胞NF-κBp65下降,而IκB-α上升。结论ATRA能抗HL-60细胞增殖诱导凋亡,该过程可能与抑制IκB-α的降解阻止NF-κB的活化有关。

Bph36介导的抗性机制及相关信号通路的研究

褐飞虱(Nilaparvata lugens St?l., BPH)是水稻最主要的害虫之一,给水稻生产造成严重的危害。携带不同抗性基因的抗褐飞虱水稻材料抗性机制不同,挖掘普通野生稻抗褐飞虱基因并研究其介导的抗性机制及相关信号通路对水稻育种具有重要的意义。本研究基于课题组前期从广西普通野生稻‘W2183’挖掘出的位于4号染色体InDel标记S13和X48之间38 kb处新基因Bph36,以‘9311’和‘抗蚊青占’为感性对照,05RBPH16和NIL-Bph36为抗性对照,通过褐飞虱宿主选择性、蜜露量测定、褐飞虱存活率及褐飞虱生长速率等方法分析Bph36介导的抗褐飞虱机制;同时,以‘抗蚊青占’为感性对照,NIL-Bph36为抗性对照,通过qRT-PCR分析植物防御昆虫侵害的三大信号途径:水杨酸、茉莉酸和乙烯相关基因表达量的差异。抗性机制研究结果表明:褐飞虱在抗性材料植株上的虫口密度显著低于感性材料植株,抗性材料上的褐飞虱存活率、群体生长率及取食后排泄的蜜露量均比感性对照显著降低。Bph36介导的抗性机制是寄主抗生性和害虫趋避性相互作用的结果。qRT-PCR结果表明:褐飞虱取食后,各个时间段抗性材料NIL-Bph36植株中水杨酸合成相关基因EDS1、PAD4、PAL和水杨酸途径病程相关蛋白基因PR10的表达量显著高于感性材料‘抗蚊青占’植株中的表达量;抗性材料NIL-Bph36植株中,茉莉酸合成基因LOX2和茉莉酸积累基因AOS2的表达量比褐飞虱取食前显著提升,但是比同时段感性材料植株中表达量显著降低;褐飞虱取食后,抗、感性材料植株中乙烯信号途径基因EIN2的表达量都受到抑制,基因ACO3表达量都提高,但2种材料间的差异不显著。茉莉酸途径和乙烯途径参与了NIL-Bph36植株抗褐飞虱的基础防御反应,但Bph36激活的抗性不是茉莉酸和乙烯依赖的信号防御途径而是激活水杨酸依赖的系统获得性抗性。研究结果为进一步研究Bph36与其他抗性基因聚合,培育兼有多种抗性机制和防御信号途径的优良品种奠定基础。

重楼皂苷Ⅰ通过调控Notch信号通路对前列腺癌PC-3细胞迁移侵袭力的影响

目的观察重楼皂苷Ⅰ对前列腺癌PC-3细胞迁移侵袭力的影响并探讨其作用机制。方法体外培养前列腺癌PC-3细胞,将细胞分为模型组、阳性对照组(顺铂2.5μg/mL)、重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组(0.25、0.5、1.0μg/mL)。实时荧光定量PCR检测Notch1、Jagged1及split多毛增强子5(Hes5)mRNA表达;Western Blot检测Notch1、Jagged1及Hes5蛋白表达;细胞划痕实验和Transwell实验检测PC-3细胞迁移及侵袭力的变化;透射电镜观察PC-3细胞的伪足形态变化。结果模型组PC-3细胞表面可见较多伪足样突起。与模型组及阳性对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组PC-3细胞表面伪足样突起结构数量减少。与模型组比较,阳性对照组和重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组Notch1、Jagged1、Hes5 mRNA及蛋白表达、划痕实验伤口愈合率、侵袭细胞数降低(P<0.01)。与阳性对照组比较,重楼皂苷Ⅰ中、高剂量组Notch1、Jagged1、Hes5 mRNA及蛋白表达、侵袭细胞数降低(P<0.01)。与阳性对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组划痕实验伤口愈合率降低(P<0.05,P<0.01)。结论重楼皂苷Ⅰ具有抑制前列腺癌PC-3细胞迁移和侵袭作用,其作用机制可能与其下调PC-3细胞Notch信号通路关键蛋白、抑制PC-3细胞表面伪足形成有关。

信号相关杂波下MIMO探通一体化信号设计方法

以探测功能为主的雷达通信一体化(Dual Function Radar and Communication, DFRC)系统发射一体化信号,能够在保证探测性能的条件下,尽可能高效地与合作目标通信,使其在设备集约化要求高的电磁对抗环境中占有一席之地。因此,探通一体化信号设计是以探测功能为主DFRC系统研究的关键科学问题之一。但电磁对抗环境复杂多变,可能存在非均匀、多变和强独立散射的散射体与雷达探测信号相互作用,使DFRC系统接收的回波中含有在空间上呈现非均匀特性的杂波分量,从而给雷达目标检测带来挑战。针对杂波环境中DFRC系统探测性能下降的问题,本文采用认知系统架构,获取空间非均匀杂波先验知识,以信干噪比(Signal Interference to Noise Ratio, SINR)为准则,保障雷达的探测性能。引入发射方向图主瓣和旁瓣约束,使天线方向图具有低旁瓣特性同时集中探测能量在目标所在的方位,进一步保障探测性能。此外,考虑信号变模约束平衡雷达系统发射机功放的非线性失真和优化自由度。采用了一种空间合成信号频谱置零的方法实现信息传输,构建了通信调制约束。为求解上述多约束高维非凸优化问题,研究了一种联合序列块增强(Sequential Block Enhancement, SBE)、丁克尔巴赫(Dinkelbach’s Iterative Procedure, DIP)、凸序列逼近(Sequential Convex Approximation, SCA)和内点法(Interior Point Method, IPM)的迭代求解算法。理论分析了该算法的收敛性和计算复杂度。仿真结果表明,所设计的波形能够在信号相关旁瓣杂波下,同时实现探测和多用户通信。

肾纤维化相关信号通路研究进展

肾纤维化是各种肾脏病发生发展的基本病理改变和共同途径,以大量细胞外基质（extracellular matrix,ECM）在肾间质聚集、肾脏组织结构破坏和功能丧失为主要特征.在各种肾脏病中,细胞信号通路可通过细胞因子的过度表达而导致肾纤维化.其中,TGF-β1/Smad通路、PDGF/PDGFR信号通路、Wnt/β-catenin通路等多条信号转导通路在肾纤维化过程中交互影响、共同作用.本文就参与肾纤维化过程中主要的和新近发现的信号通路的研究进展及其相互关系进行综述.

铁路应急通信系统视频流卡顿问题分析

针对某铁路局应急通信系统转发视频流至国铁集团应急通信系统时出现视频卡顿的问题,利用数据网业务质量智能感知系统对应急通信视频业务进行监控分析,确定视频卡顿原因,提出采用RTP+实时传输控制协议(Real-Time Control Protocol,RTCP)传输UDP数据包以保证视频流数据传输可靠有序的解决方案。

通络保肾复方对糖尿病大鼠肾脏内质网应激介导的凋亡信号通路JNK、Caspase-12的影响

目的:探讨通络保肾复方及其拆方对糖尿病大鼠肾损伤内质网应激凋亡通路的影响。方法:将SD大鼠随机分成正常组、造模组,腹腔注射STZ建造糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分成模型组、缬沙坦组、通络保肾复方组、中药通络保肾补虚组、中药通络保肾解毒组。喂养6周后测大鼠血糖(GLU)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、血浆白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr)及肾组织GRP78、p-JNK、Caspase-12蛋白及基因的表达。结果:6周时与正常组比较,模型组GLU、HbA1c、BUN升高(P<0.01);与模型组比较,缬沙坦组GLU、HbA1c、BUN下降(P<0.01);各中药治疗组HbA1c下降(P<0.01)。Western blot、qRT-PCR结果:与正常组比较,模型组大鼠GRP78、p-JNK表达上调(P<0.01);与模型组比较,各治疗组表达下调(P<0.01,P<0.05)。结论:通络保肾复方及其拆方可抑制内质网应激诱导JNK凋亡通路激活,6周时无Caspase-12信号激活。结合中医学方证理论,以方测证,推测糖尿病肾损伤的中医核心病机为本虚标实。

光纤通信信号通断的极快转换

为从大多数光纤通信网络获得大容量信息,人们希望能使信号尽快通断,以最大量地传输0和1。液晶的接通时间为几毫秒,因而太慢。现在使用铌酸锂,接通时间为几分之一纳秒。但为达到所希望的皮秒或皮秒以内的开关时间,则必须依赖分子中电子的快速运动。共轭芳香族分子由于其电子在电场或光场中的再分配,最可能使折射率发生很大变化。但至今尚未发现完全适用的材料。英国通信研究实验室的C. S. Winter等人没有因此而受挫,现在他们提出的镍二硫戊环显示有很大希望。以前文献曾指出,一种可能的开关是采用马赫-陈德尔干涉仪,光信号在此一分为二:一路通过光学活性材料传播。

一种模拟信号选通运算电路的设计

设计了一种运算电路,通过运算放大器和模拟开关组成信号选通电路,将两路模拟信号经模拟开关选通后输出一路传送给减法器电路单元,与另一路模拟信号进行运算放大,输出可调的直流电压。适用于高频信号处理,输出电压稳定。

基于薄膜压力传感器的多路选通信号调理电路设计

针对电气连接器使用中存在的缩针问题,根据保持力检测原理,设计基于薄膜压力传感器的多路选通信号调理电路,包括传感器信号驱动电路、信号滤波电路和多路选通电路。将薄膜压力传感器集成到运算放大器的反向端,运用CD4051模拟电子开关和反相器串联的方法实现信号的多路选通,并采用一阶低通滤波器对传感器采集到的信号进行降噪处理。将一阶滤波器设计成一个模块,使用示波器对采集的信号断开和接入滤波模块进行特征观察,前后对比可知,采集信号经过滤波器能较好地去除噪声。故设计的硬件电路能达到测量要求,能对信号进行有效不失真的采集。

关于科学设置交通信号灯 提高城市道路通行率的建议

探讨了目前城市道路信号灯设置和信号配时过程中所存在的主要问题，提出了改进信号灯设置和配时的对策建议。

白藜芦醇对新生大鼠神经元缺血缺氧时SDF-1/CXCR4通路抗凋亡作用的调控机制

目的:探究白藜芦醇(RSV)对缺血缺氧诱导的新生大鼠脑神经元凋亡及基质细胞衍生因子1(SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)通路的作用和机制。方法:体外培养新生大鼠皮质神经元,给予氧糖剥夺(OGD)模拟新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)模型。首先将细胞随机分成4组:对照(control)组、HIE组、HIE+RSV低剂量(10μmol/L)组和HIE+RSV高剂量(50μmol/L)组。OGD处理2 h后加入相应剂量的RSV继续培养24 h,通过流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白及SDF-1和CXCR4的蛋白表达水平,real-time PCR检测SDF-1和CXCR4的mRNA表达水平。然后使用CXCR4抑制剂AMD3100与RSV共同处理OGO损伤的细胞24h,检测SDF-1/CXCR4通路阻断后RSV对细胞凋亡和凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果:RSV能够抑制OGD诱导的神经元凋亡,下调活化的caspase-3和细胞色素C的水平,上调Bcl-2/Bax比值(P<0.05)。与对照组相比,OGD导致SDF-1和CXCR4表达增加;与模型组相比,RSV能够上调SDF-1和CXCR4的表达(P<0.05);使用AMD3100阻断SDF-1/CXCR4通路减弱了RSV抑制OGD诱导的细胞凋亡的作用。结论:RSV可抑制缺血缺氧诱导的新生大鼠神经元凋亡,其机制可能是通过上调SDF-1/CXCR4通路发挥作用的。