活化蛋白C通过调控Nrf-2/HO-1信号通道改善大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的作用研究

目的:研究活化蛋白C(Activated protein C,APC)对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法:将80只SD雄性大鼠随机分为四组:对照组、药物对照组、模型组和治疗组,每组20只。观察术后72 h内模型大鼠皮瓣形态变化,HE染色观察大鼠皮瓣组织病理学变化,TUNEL法染色观察皮瓣组织细胞凋亡,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6水平,用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸TBA比色法分别测定皮瓣组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,Westernblot法检测皮瓣组织中Nrf-2、HO-1、γ-GCS蛋白表达水平。结果:与模型组比较,治疗组皮瓣红肿、坏死程度、病理损伤程度减弱;TUNEL法染色观察,与模型组比较,治疗组皮瓣组织细胞凋亡率减少(P<0.05);ELISA法检测发现,与模型组比较,治疗组血清中TNF-α、IL-6降低(P<0.05);与模型组比较,治疗组SOD活性升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);Westernblot法检测发现,与模型组比较,治疗组Nrf-2、HO-1、γ-GCS蛋白相对表达水平上升(P<0.05)。结论:APC能改善大鼠皮瓣缺血再灌注损伤,其机制可能与激活Nrf-2/HO-1信号通路,抑制氧化应激反应和减少细胞凋亡、炎症反应有关。

基于反向荧光增强双信号通道免疫层析方法检测动物源食品中克百威残留

本研究建立了可视化-反向荧光增强双信号通道免疫层析技术(V-rFICTs),通过观察多巴胺包金的显色减弱以及量子点荧光的反向增强,实现对克百威的双信号、半定量检测。通过设计合成半抗原制备获得特异性单克隆抗体,以多巴胺包金核壳纳米材料标记抗体作为检测探针,将量子点(QDs-OVA)与包被原(CAR-OVA)喷涂于硝酸纤维膜(NC膜)上作为检测线(T线),同时喷涂兔抗鼠IgG抗体作为质控线(C线),组装成免疫层析试纸条。当样品不含克百威时,标记抗体结合在T线,裸眼可见明显紫红色条带,荧光猝灭,当克百威存在时,T线紫红色条带变弱或消失,而紫外下绿色荧光显现并随着克百威浓度的升高而增强。方法研究结果显示,V-rFICTs在可见光检测模式下的检测限为50 ng/mL,在荧光模式下的检测限为3.13 ng/mL,灵敏度提升15倍以上,15 min内可完成检测,与其他结构类似物无交叉反应。经方法验证,检测结果与液相色谱-串联质谱方法一致,具有较好的应用潜力。

百脉根结瘤信号通道蛋白NSP1和NSP2的相互作用

豆科植物百脉根是研究共生固氮体系的模式植物之一,对其根瘤菌共生信号转导途径和作用机制的研究,有助于揭示根瘤菌与豆科植物共生关系建立和共生体形成的奥秘。本研究利用酵母双杂交系统和体外蛋白质相互作用技术,证明百脉根GARS类家族转录因子结瘤信号通道蛋白NSP1和NSP2在体外体内均可以相互作用,并将相互作用的位点定位在NSP1的GRAS结构域的LHRII区域和NSP2的LHRI区内。

黄连碱基于NF-κB信号通道的体外抗炎实验研究

目的探讨黄连碱体外抗炎作用及其机制。方法采用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症反应模型,用黄连碱对其进行干预,实验结束后,Western Blot技术检测RAW264.7巨噬细胞p-ERK1/2、IκBα和iNOS蛋白的表达。结果与LPS组比较,黄连碱可显著下调LPS所致炎性RAW264.7巨噬细胞中p-ERK1/2和iNOS蛋白表达(P<0.05);显著升高IκBα蛋白的表达(P<0.05)。结论黄连碱抗炎作用机制与其下调LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞ERK1/2蛋白磷酸化水平,减少IκB-α蛋白磷酸化降解和抑制iNOS蛋白表达等环节有关。

温郁金二萜类化合物C对幽门螺杆菌诱导人胃GES-1上皮细胞炎症的抑制作用及其对NF-κB信号通道的影响

目的通过体外实验研究温郁金二萜类化合物C对幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)诱导炎症的抑制作用及对NF-κB信号通路的影响。方法选用Hp I型菌株感染人胃上皮细胞株GES-1,建立体外Hp感染细胞模型,并予不同浓度温郁金二萜类化合物C、阿莫西林等进行干预,ELISA法检测上清液中IL-8、IL-4,并应用Wester blot方法检测NF-κB中p65、IKKα、IKKβ蛋白表达。结果 MTT法显示温郁金二萜类化合物C对胃GES-1细胞的IC5为5 mg.L-1,阿莫西林为5 mg.L-1,Hp作用于人胃GES-1上皮细胞后,上清液中IL-8明显升高,其中以12 h浓度最高,而予不同浓度温郁金二萜类化合物C、阿莫西林组干预后,IL-8水平在各个时间段均低于模型组,其中以高浓度温郁金二萜类化合物C组下降最为明显(P<0.05)。而IL-4水平在Hp作用于人胃GES-1细胞后下降,予中浓度温郁金二萜类化合物C组、高浓度二萜类化合物C组干预后IL-4水平明显升高(P<0.05)。温郁金二萜类化合物C具有抑制Hp促p65进入胞核,抑制Hp所刺激的IkBα的降解,抑制p65、IkBα磷酸化,抑制蛋白IKKα、IKKβ的表达等作用。结论 NF-κB信号通路在Hp引起慢性胃炎的发病机制中起到核心作用,采用温郁金二萜类化合物C可阻断NF-κB信号通路,可以有效减少Hp诱导的促炎性因子的分泌与增加抑炎因子的分泌。

赤道太平洋次表层海水温度异常的信号通道

应用热带太平洋上层XBT温度资料,分析探讨了西太平洋暖池区次表层海温冷暖异常信号的变化规律,揭示了影响西太平洋暖池区次表层海温冷变异常的信号通道。分析表明,西太平洋暖池区的次表层海温异常变冷与太平洋北赤道流的海温冷异常信号西传有重要关系。北赤道流的海温异常冷(暖)信号是沿温跃层由赤道中东太平洋潜沉向西太平洋暖池区传播,与西太平洋次表层海温异常(冷)暖信号向赤道中东太平洋传播构成了热带海洋信号的气旋式"环流通道"。在这一"环流通道"中,北赤道流的海温异常信号西传是导致西太平洋暖池区及西太平洋次表层海温异常的重要机制,是影响厄尔尼诺(ElNino)和拉尼娜(LaNina)事件发生的关键。

太平洋次表层海温异常年际变率的信号通道与ENSO循环

利用SODA海洋同化资料,分析了太平洋次表层海温异常(SOTA)年际信号变异特征与ENSO循环的联系。结果表明,热带太平洋的年际变率表现为以160°W为纵轴的东西向和以6°—8°N为横轴的南北向的跷跷板分布,南太平洋和北太平洋中高纬度海洋的SOTA则与热带西太平洋SOTA同号,但强度较弱,这些变化都与ENSO事件密切相关,是ENSO事件的两个主要模态,具57和44个月显著周期。ENSO循环期间,热带西太平洋SOTA强信号中心沿赤道东传,到达赤道东太平洋后加强并北扩,导致ElNi?o或LaNi?a事件,同时从热带西太平洋有较弱SOTA信号向东北和西南传播,在南、北太平洋中高纬度海域产生弱SOTA;同期位于热带东太平洋反号的SOTA强信号中心沿10°—15°N(平均12°N)西传,至热带西太平洋后加强并南扩,为下次LaNi?a或ElNi?o事件准备条件,同时在北太平洋中高纬度海洋还存在着反号弱的SOTA。如此周而复始,完成ENSO循环。太平洋次表层海温年际变化信号除在赤道及以北的热带太平洋存在一个逆时针方向的传播通道外,同时在热带西太平洋有异常信号向南、北太平洋中高纬度海域传播,并指出ENSO循环期间太平洋次表层海温异常年际变率信号传播的可能通道。

川芎嗪对正常及致敏豚鼠以及人离体气道平滑肌蛋白激酶C信号通道功能的影响

蛋白激酶 C(PKC)通道是一条重要的细胞内信号传递通道,近年来发现它参与了气道平滑肌张力的调节,并在哮喘发病的多个环节中起重要介导作用。川芎嗪是从伞形科植物川芎中提取的一种生物碱,动物实验研究表明它对哮喘的防治有一定的意义。其机制尚待阐明。本研究的主要目的即探讨正常与致敏豚鼠离体气道平滑肌 PKC 通道功能上的差异及川芎嗪对其功能的影响,同时也观察了川芎嗪对正常人离体支气管平滑肌 PKC 通道功能的影响。

与c-fos基因相关的细胞因子、小分子物质及信号通道

目的:综述c-fos的研究概况,进一步探讨c-fos基因相关的细胞因子、小分子物质参与机体调节及其相关作用。资料来源:应用计算机检索CNKI中国期刊全文数据库1990-01/2007-06与c-fos基因相关的文献,检索词"c-fos",限定文献语言种类为English。同时计算机检索Medline 1990-01/2007-06与c-fos基因相关的文献,检索词"c-fos",限定文献语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取包括c-fos基因的文献,开始查找全文。纳入标准:与c-fos表达相关的涉及细胞因子及小分子物质的文章。排除标准:与脑功能相关的c-fos表达内容相对独立数量庞大,宜另做讨论,暂不列入本次讨论范围。多个类似研究只纳入其中一个。资料提炼:共检索到74篇关于c-fos基因的文献,最终纳入25篇符合标准的文献。资料综合:c-fos基因是原癌基因的重要成员。其表达受多种细胞活性物质的影响,通过其表达产物c-Fos蛋白参与转录激活蛋白1的组成发挥生物学作用,并可以反过来对细胞因子进行调节,从而参与细胞的生长、增殖、分化途径上环节的调控。内皮素1、碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、人血小板源生长因子、白细胞介素8、血管紧张素Ⅱ、胰岛素、神经肽Y、半胱氨酸、过氧化氢等可以诱导c-fos的表达;c-fos的表达则可以使转化生长因子β,碱性成纤维细胞生长因子、白细胞介素8的水平发生改变;糖皮质激素受体与c-fos表达产物存在着相互作用,影响它们各自同DNA结合的能力,上调c-fos表达的信号通路多与蛋白激酶C、ERK1/2有关。结论:在细胞因子及小分子物质调节机体功能过程中,c-fos表达改变是一个比较重要的共同途径,c-fos表达改变同时也对部分细胞因子进行调节。

HIF-1及相关信号通道在糖尿病视网膜病变中的研究进展

糖尿病视网膜病变(DR)是最常见的糖尿病微血管并发症,早期即出现视网膜缺血缺氧,进而导致一系列细胞因子紊乱,局部内环境失衡。而低氧诱导因子(HIF-1)与细胞内的缺氧反应密切相关,在DR早期多条信号通道通过调控HIF-1活性提高血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达,其与DR新生血管的形成有直接关系。理论上,干预信号通道中任何一种激酶都有可能阻止DR的发展。因此,参与信号通道的各级分子都有可能成为治疗DR的潜在靶目标。

宫颈癌中JAK2/STAT3信号通道介导bax、bcl-2的表达

目的探讨JAK2/STAT3信号通道的激活及其介导bax/bcl-2在宫颈癌中的表达作用。方法选取本院2011-2014年宫颈癌患者40例,CINⅠ级组28例,CINⅡ/Ⅲ级组12例;选择正常宫颈15例为对照组。病理切片采用免疫组织化学方法测定P-JAK2、P-STAT3、bax、bcl-2的表达。结果1）对照组未见P-JAK2、PSTAT3蛋白表达;与对照组比较,CINⅠ级组及CINⅡ/Ⅲ级组表达增多（P〈0.05）;与CINⅠ级组比较,CINⅡ/Ⅲ级组表达增多（P〈0.05）。2）对照组可见少量bax、bcl-2蛋白表达;与对照组比较,CINⅠ级组及CINⅡ/Ⅲ级组表达增多（P〈0.05）;与CINⅠ级组比较,CINⅡ/Ⅲ级组的bax/bcl-2比率降低（P〈0.05）。3）CINⅠ级组和CINⅡ/Ⅲ级组通道蛋白P-JAK2、P-STAT3与bax/bcl-2比率呈正相关（P〈0.05）。结论宫颈癌患者JAK2/STAT3信号通道激活,可能与上调bax/bcl-2的表达和调节细胞凋亡有关。

锂盐对中枢神经系统ERK-1/2信号通道活性和Bcl-2家族蛋白表达的影响

目的 :分析长期服用锂盐对中枢神经系统ERK 1/ 2信号传导通道活性以及Bcl 2家族蛋白表达的影响 ,探讨锂盐治疗躁狂抑郁症作用的可能分子机制。方法 :将 40只健康的雄性Wistar大鼠随机均分为锂盐组和对照组。锂盐组大鼠用每公斤含 2 .4g碳酸锂的饲料喂养 ,对照组大鼠用常规饲料喂养 ,4周后取大鼠海马和额叶制备蛋白样本 ,WesternBlotting分析海马和额叶组织MEK ,ERK 1/ 2 ,RSK1,CREB的磷酸化水平 (活化程度 )以及Bcl 2和Bax蛋白的表达水平。结果 :与对照组比较 ,锂盐增强大鼠海马和额叶MEK ,ERK 1/ 2 ,RSK1和CREB的活性 ,上调海马和额叶Bcl 2表达 ,下调海马和额叶Bax表达。结论 :长期服用锂盐激活中枢神经系统ERK 1/ 2信号传导通道 ,调节中枢神经系统Bcl 2家族蛋白表达 ,这些作用可能与锂盐抗躁狂抑郁症的作用有关。

面向STD标准的信号通道模型研究

IEEE 1641(STD)标准是IEEE标准委员会制定的新一代面向信号测试标准;首先对STD标准定义的连接及其动态模型进行了分析,梳理了常用的开关类型;接下来,提出了信号通道系统的描述模型和控制模型,并针对常用的多路开关和矩阵开关,给出了开关能力描述模型和开关组件接口定义,总结了资源管理器的工作步骤和虚拟连接的资源共享判断准则;最后,给出了该信号通道模型的实现方法,并通过开发的一个图形化信号通道系统管理软件,简化了用户的开发工作。

蛋白激酶C信号通道在阻塞性黄疸肝损害发生发展中的作用

目的 探讨阻塞性黄疸肝损害的调控机理。方法 ①采用胶原酶原位肝灌注法获取大鼠肝细胞 ,行原代培养 ,用蛋白激酶C(PKC)激动剂帕斯酶埃 (PMA)、拮抗剂切勒斯埃 (chelerythrine)作用于肝细胞 ,再用 5 0 μmol/L甘氨鹅脱氧胆酸钠 (GCDC)作用后行流式细胞术 (FCM )及用末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT)介导的脱氧核苷酸 (dUTP)缺口末端标记技术 (TUNEL)检测肝细胞凋亡情况。②分别于结扎大鼠胆总管后 3d、7d、14d及 2 1d处死大鼠 ,用TUNEL技术及免疫组织化学方法检测阻塞性黄疸大鼠肝脏组织细胞凋亡状态及PKC蛋白的表达。结果 ①随PMA浓度的增加 ,肝细胞的凋亡明显增加 ,随Chelerythrine的增加 ,肝细胞的凋亡明显减少。②大鼠胆总管结扎后随结扎时间的延长细胞凋亡指数 (AI)增加 ,结扎 14d后AI达高峰。PKC蛋白表达越强 ,AI就越高。结论 蛋白激酶C信号通道参与了阻塞性黄疸肝细胞凋亡的调节 。

肿瘤RNA转染DCs与同源CIKs共培养调控Akt/NF-κB细胞生存信号通道的实验研究

目的研究肿瘤RNA转染树突状细胞(DCs)与同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIKs)共培养对前列腺癌细胞PC3内Akt/NF-κB生存信号通道的影响,探讨这种免疫治疗引起肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法体外培养CIKs、DC-CIKs和RNA转染的共培养的DC-CIKs作为效应细胞,以传代培养的PC3细胞作为靶细胞,分别加到TRANSWELL 6孔细胞培养板上、下室。收集靶细胞,分别提取细胞可溶性总蛋白和核蛋白,利用Western Blotting检测Akt,phospho-Akt,phospho-IKKα/β以及NF-κBp65的表达量,以未干预的PC3细胞总蛋白和核蛋白作为阴性对照,以PI3K抑制剂LY294002作为实验的阳性对照。以β-actin作为内参照,利用Quantity One软件定量分析。结果以未干预的PC3细胞作为阴性对照,CIKs、DC-CIKs和RNA-DC-CIKs各免疫效应细胞处理组均显著抑制细胞浆中磷酸化Akt和磷酸化IKKα/β的表达。转录因子NF-κBp65的核定位减少,表达量降低。但胞浆中总Akt表达在实验组和对照组之间无显著性差异。各实验组间表达量比较,结果显示在RNA-DC-CIKs组phospho-Akt和phospho-IKKα/β和转录因子NF-κBp65表达量比CIK组更低,但无显著性差异。结论肿瘤RNA负载DC-CIKs、DC-CIKs和CIKs均能显著抑制PC3细胞内Akt的活化,降低活化的IKKα/β的表达,导致转录因子NF-κBp65核内定位和表达降低,从而抑制细胞生存信号通道,诱导肿瘤细胞凋亡。

自动测试系统中信号通道自动配置技术研究

针对自动测试系统中信号通道配置和管理的复杂性,基于模型间信息共享和路径以逻辑开关描述的思想建立了路径模型。介绍了该模型的具体内容和软件实现方法。将路径模型与测试系统的其他资源模型(仪器模型、ICA模型、ITA模型、UUT模型)进行关联实现了信号通道的自动配置。该配置技术将信号通道的搜索变成了对路径模型库的简单查询,从而大大缩短了路径搜索时间,提高了系统配置效率。

双黄连注射液对血管内皮细胞NF-κB信号通道靶分子活性抑制作用的研究

目的:探讨中药复方双黄连注射液对血管内皮细胞作用. 方法:用双黄连注射液与人脐静脉血管内皮细胞株(ECV-304)共同培养后,采用MTT法及形态学法观察双黄连注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用及细胞脱氧酶的活性,用Sandwich ELISA法定量分析法和定量免疫细胞技术,检测NF-κB活性及胞浆内IκB含量.

Wnt信号通道组成及其在成骨细胞分化增殖中的效应

种植体周骨形成及骨结合情况直接影响种植修复的长期疗效。近年来的研究发现Wnt信号通道在骨形成和改建中有重要作用,通过对该通道的研究有可能发现骨形成信号网络中的一些关键环节,进而通过临床干预措施加速骨形成。

炎症信号通道与前列腺癌关系的研究进展

在正常前列腺上皮中,雄激素通过上调干扰素介导的急性炎症信号通道和下调白细胞介素介导的慢性炎症信号通道来抑制前列腺癌的发生、发展。一旦雄激素调节的急慢性炎症信号通道发生失衡,则会促进前列腺癌的形成及进展。揭示这种失衡的发生机制是预防和治疗前列腺癌的关键。现就上述两种炎症信号通道与前列腺癌的关系予以综述。

卵巢癌治疗新靶标:Hedgehog信号通道

上皮性卵巢癌是卵巢恶性疾病中最常见的类型。在美国,卵巢癌是最致命的妇科恶性疾病。到目前为止,即使采取彻底的卵巢肿瘤细胞减灭术配合有效的术后化疗,临床预后仍然不尽人意。近来,我们逐渐认识到,在许多情况下,调控不同组织发育过程的细胞信号通道及信号分子是相类似的。当调控机制紊乱时,这些信号通道及信号分子将促使各种肿瘤形成及癌症发生。在这里,我们将讨论Hedgehog信号通道与卵巢正常生物学及癌症发生的相关性。通过一些体内外实验,我们已经逐步探索出Hedgehog信号通道促使卵巢形成及生长的分子机制。基于近年的研究成果,我们推断Hedgehog信号的抑制可以干预卵巢癌球样结构的形成。该信号通道的信号分子可能将成为一系列重要的药物治疗靶标,成为晚期卵巢癌重要的联合治疗方案的战略选择。