不同TDS值的水配制抗原修复液对免疫组化结果的影响

在临床病理诊断中,免疫组化技术是病理诊断的重要辅助手段之一。在日常工作中,如果免疫组化结果出现异常,临床上会复盘回顾整个免疫组化操作流程及各种影响因素,通常会考虑修复方式,修复时间,孵育时间等因素,不会考虑配制修复液的纯水离子浓度。2022年10月科室免疫组化结果出现定位不准确,阳性细胞数明显减少以及阳性强度不够,甚至假阴性结果,排除实验中操作流程及试剂效价对免疫组化结果的影响后,检测发现抗原修复液离子浓度(TDS值)偏高,遂溯源,发现纯水TDS偏高,纯水中硝酸盐、硫酸盐、氯化物偏高。采用TDS=0的纯水配制抗原修复液后效果显著改善,现将实验过程做一个回顾性分析。

固定液及抗原修复液pH值对免疫组化染色的影响

目的 :研究固定液pH值和抗原修复液pH值对免疫组化染色结果的影响。方法 :取正常皮肤、胃粘膜、子宫肌瘤、乳腺癌组织 ,分别用 pH值 3.0 ,5 .0 ,7.0 ,8.0 ,10 .0的缓冲福尔马林固定液固定。选用EMA、SMA、ER、CK(AE1/AE3 )为一抗 ,Evinsion二步法免疫组化染色。染色时分别用 pH值 6 .0 ,7.0 ,8.0的抗原修复液或用市售pH值 8.0的EDTA作微波抗原修复。结果 :不同条件可造成阳性细胞数量及染色强度变化 ,本实验得知CK (AE1/AE3 )、ER是以阳性细胞数目改变为主 ,SMA、EMA是以染色强度改变为主。结论 :(1)使用 10 %中性或微碱性缓冲福尔马林固定液 ,固定效果最佳。 (2 )本实验所用的 4种组织 ,抗原修复液选择pH值 7.0、8.0均优于 pH值6 .0 ,皮肤组织选择EDTA(pH值 8.0 ) ,雌激素受体选择 pH值 8.0时染色效果最佳。 (3)固定液pH值 >8.0容易造成背景染色 ,修复液 >8.0影响切片附着 。

修复液预注入对电缆电树引发及树枝生长的抑制

为了研究在交流电压和操作过电压下预先注入修复液对交联聚乙烯电缆中电树的引发和树枝生长的抑制,利用压力注入装置向新电缆样本缆芯注入有机硅修复液,形成预修复电缆样本,然后利用交流高压水针电极法对预修复电缆和未预修复电缆进行加速水树老化,并定期施加操作过电压。通过光学显微镜观察两种电缆样本不同老化时期的树枝生长情况,统计其平均树枝长度和电树引发率,并利用扫描电镜和能谱仪分析预修复电缆绝缘中微观结构和化学元素,结果说明预修复电缆中含有修复液生成物,且能抑制电树的引发和树枝的生长。利用有限元仿真软件建立电缆中树枝缺陷的仿真模型,并仿真分析操作过电压和交流电压下预修复电缆和未预修复电缆中树枝的电场特性,结果表明修复液能降低水针尖端、电树尖端和水树末梢的电场。研究结果表明:预修复能均匀水针尖端电场,降低操作过电压下的电树引发率,也能减弱电树尖端和水树末梢的电场强度,抑制树枝的生长。

修复液沿交联聚乙烯电缆高度方向的浓度分布及其变化对修复效果的影响

为了认识修复液沿交联聚乙烯（XLPE）电缆高度方向的浓度分布及其对修复效果的影响,研究了预修复（老化前预先注入修复液）电缆样本上侧和下侧的水树生长特征以及绝缘层的微观形貌变化。对两组预修复电缆样本分别进行不同时间的加速水树老化。通过光学显微镜观测不同老化时间的样本其上下侧的水树形态和尺寸,同时利用扫描电镜（SEM）和红外光谱（IR）观测（检测）样本上下侧水树区域的微观形貌和修复液浓度变化。测试结果表明：加速老化30天后,样本上侧的水树尺寸达到310.5μm,大于样本下侧的水树尺寸（251.2μm）。此外,样本下侧水树区域C—Si键吸光度（与修复液浓度呈正比）为0.83%,高于样本上侧水树区域的C—Si键吸光度（0.72%）,表明此时样本下侧水树区域的修复液浓度高于样本上侧。而加速老化40天后,样本下侧的水树尺寸达到371.8μm,反而超过样本上侧的水树尺寸（350.3μm）。此时样本下侧水树区域C–Si键的吸光度降至0.48%,低于样本上侧水树区域C—Si键的吸光度（0.63%）,表明此时样本下侧水树区域的修复液浓度反而低于样本上侧。该研究表明,重力对修复液沿电缆高度方向的浓度分布及其变化具有重要影响。受重力作用,修复液在电缆中易于向下渗透,从而使得样本下侧水树区域的修复液浓度降低,并导致样本下侧的水树生长速率和老化程度增加。

高压抗原修复液的pH值对淋巴组织免疫组化染色的影响

目的研究高压抗原修复液的p H值对淋巴组织免疫组化染色的影响。方法运用高压的抗原修复方式,按修复液p H值的不同分为p H 6.0枸橼酸抗原修复组和p H8.0EDTA抗原修复组,对76例淋巴组织进行免疫组化染色,每例分别标记抗体CD3、CD20和CD5。结果 p H 6.0枸橼酸抗原修复组有9例阳性标记不明确,其中5例出现了细胞膜破损,67例符合诊断标准;p H8.0EDTA抗原修复组有60例阳性标记不明确,其中59例出现了细胞膜破损,仅有16例组织染色符合诊断标准,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论免疫组化染色中,使用p H 8.0 EDTA抗原修复液对淋巴组织进行高压修复,致使淋巴细胞胞膜破损,使用p H 6.0枸橼酸高压修复有助于避免这一现象。

抗原修复液pH值及修复时间对免疫组化染色效果的影响

目的:探讨使P504S、P63、CD10、Ki 67抗原抗体复合物在免疫组化检测中获得高表达的抗原修复条件。方法:取前列腺癌、良性前列腺增生、乳腺增生组织和人乳头状瘤病毒感染的外阴上皮组织,用 10% (体积分数 )中性缓冲甲醛固定液固定。用EnVision二步法行免疫组化染色, P504S、P63、CD10、Ki 67分别作为前列腺癌、良性前列腺增生、乳腺增生组织和感染人乳头状瘤病毒的外阴上皮组织的一抗,使用统一的EnVisionTM二抗。每种组织皆分别使用 3种不同的缓冲液进行抗原修复:pH6. 0的枸橼酸缓冲液、pH 8. 0的乙二氨四乙酸二钠 (EDTA)缓冲液和pH9. 0的EDTA Tris缓冲液。对每一种抗原修复液,应用 4个不同的抗原修复时间: 12min、20min、25min和30min。染色完成后,镜下对比不同条件下抗原抗体复合物表达的情况。结果:P504S在pH9. 0的EDTA Tris缓冲液中修复 20min阳性信号最强,阳性细胞比率最高;P63在pH9. 0的EDTA Tris缓冲液中修复 30min阳性信号最强,阳性细胞比率最高; Ki 67在pH 9. 0的EDTA Tris缓冲液中修复 25min阳性信号最强,阳性细胞比率最高;CD10在不同pH值的缓冲液中修复 20min或 25min效果相同,都能得到最强表达。结论:不同的抗原有其各自最适合的抗原修复液、pH值范围和最适修复时间。相对来说,

抗原修复液EGTA的应用体会

在进行免疫组化过程中,为达到良好的染色效果,通常会选择不同pH值的修复液和修复方式,如pH6的柠檬酸修复液、pH9的EDTA和EGTA修复液等,修复方式选择微波修复或高温高压修复、水浴煮沸等。

不同抗原修复液对乳腺癌冷冻组织Ki-67、ER免疫组化染色结果的影响

在临床工作中，由于病理诊断的需要，我们经常需要对冷冻组织进行固定并做免疫组化染色。然而由于多种因素的影响，冷冻组织的免疫组化结果相比常规固定组织往往不够理想，一定程度上影响了病理诊断的准确性。常规的免疫组化组织由于中性甲醛固定造成蛋白质交联，使得部分或大部分抗原决定簇被封闭，一般需要通过抗原修复才能使抗原表位重新暴露并与抗体有效结合，因此抗原修复成为免疫组化染色成功与否的重要环节。

抗原修复液pH值对淋巴组织免疫组化染色的影响

目的:研究抗原修复液pH值对免疫组化染色结果的影响。方法:选用CD3、CD5、CD10、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、CyclinD1、κ、γ为一抗,Elivision二步法免疫组化染色。染色时分别用pH5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0的抗原修复液作微波抗原修复。结果:不同条件可造成阳性细胞数量及染色强度变化。结论:本实验选用淋巴组织,抗原修复液选择pH7.0,8.0柠檬酸盐缓冲液均优于其它pH值,其中pH8.0染色效果最佳。修复液pH>8.0影响切片附着,造成脱片。

正交试验法研究轮胎修复液配方

应用正交试验法研究轮胎修复液配方各组分用量。试验结果表明,轮胎修复液各组分最佳质量分数为:基液0.01,增稠剂0.015,橡胶颗粒0.02,悬浮剂0.02;各组分对修复液封堵效果影响顺序由大到小为:增稠剂,橡胶颗粒,基液,悬浮剂。

一种新型脱蜡抗原修复液在免疫组织化学染色中的应用

目的探讨将新型的石蜡切片脱蜡抗原修复液对免疫组织化学染色结果的影响。方法使用新型的石蜡切片脱蜡抗原修复液替代传统的免疫组织化学操作,将适量20倍稀释的脱蜡抗原修复液用于乳腺癌组织石蜡切片标本雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、表面生长因子受体-2(CerbB-2)表达的检测。结果ER、PR、CerbB-2阳性定位准确。结论将组织切片脱蜡和抗原修复一次性完成具有操作简便,避免二甲苯对人体造成伤害,且染色结果满意。

新型脱蜡抗原修复液应用价值的探讨

目的探讨新型脱蜡抗原修复液在免疫组织化学实验中的应用价值。方法选用乳腺癌较常应用的ER、PR、P53、Her-2免疫试剂盒,采用新型脱蜡抗原修复液与传统操作两种方法进行免疫组织化学实验,对比实验结果。结果新型脱蜡抗原修复液染色结果阳性率与传统操作无差异;Her-2不确定率低于传统操作。结论将组织切片脱蜡和抗原修复一次性完成具有操作简便、染色结果满意、避免二甲苯对人体造成伤害等优点,值得推广。

修复液抑制XLPE电缆局部放电的有效性研究

针对XLPE电缆中存在水树缺陷引起局部放电导致电缆绝缘迅速劣化的问题,提出了一种通过注入修复液修复电缆水树缺陷抑制电缆局部放电的方法,从XLPE电缆试样局部放电特征及缺陷表面微观形貌结构两方面研究修复液对XLPE电缆局部放电的影响。采用水针电极法加速XLPE电缆绝缘水树老化,并对生成水树缺陷的电缆试样进行注入式修复,测试分析修复前后电缆试样的局部放电特征,并对修复后电缆试样缺陷处的表面形貌特征进行分析。此外,建立XLPE电缆水树缺陷的有限元模型,结合水树缺陷处电场仿真进一步阐述修复液对XLPE电缆局部放电的影响机理。结果表明:修复后XLPE电缆局部放电的放电幅值和放电次数均大幅减小,表明修复液可以抑制电缆局部放电的发展,减缓XLPE电缆绝缘的劣化。