聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物的修饰条件优化

用化学合成法获得C末端氨基酸为半胱氨酸的Byetta类似物(ByC39),再采用分子量为40 kDa的马来酰亚胺活化单甲氧基聚乙二醇(mPEG-mal-40kDa)对ByC39的半胱氨酸巯基进行定点修饰,修饰产物通过阳离子交换层析和反向层析纯化获得。在已建立的定点修饰反应和分离纯化工艺基础上,通过改变反应条件中修饰pH值、修饰缓冲体系,以及修饰保护剂等因素来得到优化修饰条件:pH值为6.5的CH3COONa-CH3COOH缓冲液,保护剂为2.0mmol/L Lys和5.0 mmol/L EDTA,mPEG-mal-40 kDa/ByC39摩尔比3∶1,25℃反应4 h;经SDSPAGE和RP-HPLC检测,可知提高了修饰率以及增加了修饰产物的稳定性;最后加入TFA终止反应。

基因编辑猪中条件性基因修饰系统的研究进展

条件性基因修饰能够使基因修饰事件在特定组织器官的特定时间内发生,可通过在动物中引入条件性基因缺失系统和条件性基因过表达系统来实现,在小鼠中已被广泛的应用于基因功能的研究。基因修饰猪在农业领域和生物学领域中均具有重要的应用价值。在生物医药领域,由于猪的体型、器官大小、生理、代谢以及寿命与人类具有很多的相似性,基因修饰猪既可用于基因功能的基础研究,也可用作人类疾病模型、异种移植的器官来源以及人类功能蛋白生物反应器。由于最近几年基因编辑技术的进展,使在猪体内引入基因表达条件性系统设想成为可能,构建基因表达条件性调控工具猪模型,将极大地推动其研究进展。本文综述了利用基因编辑技术,构建条件性修饰系统及基因修饰猪模型取得的进展。