不同色谱柱和GPC软件对灰树花倍他葡聚糖相对分子质量测定的影响

目的:考察不同的色谱柱和 GPC 软件对灰树花倍他葡聚糖相对分子质量(M_r)测定的影响。方法:分别采用 TSKG4000PW_(XL)和 Shodex OHpak SB-804HQ 色谱柱按高效凝胶渗透色谱法对灰树花倍他葡聚糖的 M_r 进行测定,再分别采用安捷伦公司、岛津公司、龙智达公司和千谱公司的 GPC 专用软件进行计算,并对各 M_r 计算结果进行比较。结果:采用 TSKG4000PW_(XL)和 Shodex OHpak SB-804HQ 色谱柱测定灰树花倍他葡聚糖的 M_r 结果有明显差异,其重均相对分子质量(M_w)相差>10%,峰位相对分子质量(M_p)相差>20%,但 M_r 的分布宽度(D)无明显差异;采用4种不同公司的 GPC 软件进行计算的M_r 结果相差较小,其相对偏差<3%。结论:不同的色谱柱对灰树花倍他葡聚糖 M_r 的测定结果有明显影响,但不同 GPC 软件对 M_r 的测定结果影响较小。

高效液相色谱法测定注射用灰树花倍他葡聚糖的含量及含量均匀度

目的建立高效液相色谱法测定注射用灰树花倍他葡聚糖的含量及含量均匀度。方法采用Shodex OH pak SB-804HQ色谱柱，以0．02％NaN3溶液为流动相，流速为0．5mL／min，柱温为35℃，示差折光检测，采用外标法分别以峰面积和峰高定量。结果在0．2～5．0mg,／mL范围内浓度与峰面积和峰高均呈良好的线性关系，r分别为0．9990和0．9997，平均回收率分别为100．11％和100．08％，方法的最低检测限为0．4μg。结论此法简便、快捷，重现性好，适合于注射用灰树花倍他葡聚糖的含量及含量均匀度测定。

HPGPC测定注射用灰树花倍他葡聚糖相对分子质量的影响因素研究

目的 考察高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定注射用灰树花倍他葡聚糖（GFGt）相对分子质量（Mr）的影响因素。方法 采用HPGPC分别以不同的流动相、色谱柱、上样浓度、上样体积、温度和辅料比例测定GFGI的Mr，并对测定结果进行比较。结果 分别以纯水，质量浓度0.2g·L^-1NaN3，0．1mol·L^-1NaNO3和0．1mol·L^-1Na2SO4溶液为流动相进行测定，GFG1的Mr依次为822410,177520，29112和25066；以0．2g·L-NaN3溶液为流动相时，采用TSKG4000PWxl和Shodex OHpak SB-804HQ色谱柱的Mr测定结果相差12．06％；在0．5～10g·L^-1的上样质量浓度内GFGI的Mr测定结果相差8．33％；在上样体积为5，30μL内相差8．65％；在温度为30～45℃范围内相差7．26％；但在不同的辅料比例下们，的测定结果相近.结论 流动相对GFGI的Mr测定结果有很大的影响，色谱柱、上样浓度、上样体积和测定温度对Mr测定结果有明显影响，辅料比例无明显影响。

灰树花倍他葡聚糖工作对照品的相对分子质量测定方法研究

目的测定灰树花倍他葡聚糖工作对照品的相对及绝对分子质量,并对两种分析方法进行比较。方法色谱柱为TSK-G4000PW,流动相为0.7%硫酸钠(含0.02%叠氮化钠)或0.2%叠氮化钠溶液,流速为0.5 mL.min-1,柱温为35℃,高效凝胶渗透色谱(SEC)法用示差折光检测器,高效凝胶渗透色谱和激光光散射联用(SEC-MALL)法用DNDC仪和激光光散射仪联用。结果采用0.7%硫酸钠为流动相,SEC法(P系列标样)和SEC-MALL法测得的相对分子质量分别为38 893和37 700,采用0.2%叠氮化钠为流动相,SEC法(P系列标样)和SEC-MALL法测得的相对分子质量分别为169 292和37 900。结论SEC法受更多因素的影响,需注意标样和流动相等的选择,SEC-MALL法准确、可靠。

注射用灰树花倍他葡聚糖的高效液相色谱指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法建立注射用灰树花倍他葡聚糖的指纹图谱。方法采用Shodex OH pak SB-804HQ色谱柱,以0.2 mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相,流速0.5 mL/min,柱温35℃,以示差折光检测器(RID)进行检测,建立反映药材、中间体和注射剂多糖活性成分的指纹图谱(1);采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈为流动相A,水(含0.05%磷酸)为流动相B,进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,以二极管阵列检测器(DAD)在波长254 nm处进行检测,建立反映药材其它成分指纹特性的指纹图谱(2)。结果10批灰树花发酵菌丝体药材、中间体和注射剂的相似度均在95%以上,多糖活性成分在药材、中间体和注射剂之间表现出良好的相关性,方法学考察结果也符合要求。结论建立的指纹图谱既体现了多糖活性成分的相关性,又体现了药材其它组分的指纹特征,可用于灰树花药材鉴定和注射剂的质量控制。

注射用灰树花倍他葡聚糖的含量测定方法研究

目的建立注射用灰树花倍他葡聚糖的含量测定方法。方法分别采用甲醇提取法、透析法、凝胶过滤法和超滤离心法去除供试品中的辅料后采用硫酸-苯酚法进行含量测定,并将结果与不去除辅料直接采用硫酸-苯酚法,分别以葡萄糖及含处方量甘露醇的葡萄糖制作标准曲线进行含量测定的结果进行比较。结果各种供试品前处理方法在去除辅料时,都会造成灰树花倍他葡聚糖主药的损失,其中超滤离心法操作简便,主药的损失量最小。在不去除辅料的情况下,采用以含处方量甘露醇的葡萄糖制作标准曲线的方法更能真实地反映供试品的含量。结论采用硫酸-苯酚法以含处方量甘露醇的葡萄糖制作标准曲线,可消除辅料的干扰,并具有良好的精密度和重现性,适合于注射用灰树花倍他葡聚糖的含量测定。