菊花倍半萜烯内酯诱导人鼻咽癌细胞毒性和凋亡的研究

目的 评价菊花倍半萜烯内酯类化合物 (SL s)对鼻咽癌的抗肿瘤作用。方法 采用 SL s的活性成分parthenolide (PN)为受试物作用于人鼻咽癌高分化细胞株 CNE1,检测细胞毒性和诱导性凋亡指标 ,进行时间 -效应和剂量 -效应作用观察。结果 10～ 10 0 μm ol/ L 的 PN作用 6～ 36 h后与阴性对照组比较 ,CNE1细胞乳酸脱氢酶 (L DH)漏出率明显增加、细胞计数减少、细胞增殖抑制率升高 (P<0 .0 5 ) ;细胞出现凋亡特征形态学改变 ,TU NEL阳性细胞、Sub G1亚群细胞百分数增加 ,细胞失贴壁率明显增高 (P<0 .0 5 ) ;上述指标与 PN剂量存在明显相关 (P<0 .0 5 )和时间循序变化。结论 PN可通过对人鼻咽癌细胞毒性作用和诱导细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用 ,提示

倍半萜烯内酯诱导WEHI-3细胞凋亡的实验

目的探讨内质网Ca2+-ATP酶抑制剂Thapsigargin的抗白血病作用机制。方法利用An-nexin-Ⅴ/PI双染实验和琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色测定鼠白血病细胞株(WEHI-3)细胞凋亡,Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),并检测在此过程中Caspase-12的表达。结果 0.5、1、2μmol/L Thapsigargin作用于WEHI-3细胞后,分别用Annexin-V/PI双染实验、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法测定WEHI-3凋亡率结果均较对照组显著升高(如Annexin-V/PI双染实验测定凋亡率分别为(25.3±3.2)%、(46.7±3.9)%、(70.2±2.3)%较对照组(7.6±0.4)%显著升高(F=26.52,P<0.01)),且凋亡率呈剂量依赖性。Thapsigargin作用后[Ca2+]i分别为(156.5±10.3)nmol/L、(180.3±15.6)nmol/L和(210.7±15.3)nmol/L,均较对照组(78.3±11.2)nmol/L显著升高(F=21.26,P<0.01)。Caspase-12 mRNA的表达随着Thapsigargin作用剂量增加而增加。结论 Thapsigargin通过Ca2+超载后诱发内质网应激诱导了WEHI-3细胞凋亡,Ca2+可能成为抗肿瘤药物作用新靶点。

倍半萜烯内酯通过非caspase途径诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡

目的 :探讨半胱天冬酶(caspase)活化途径是否在倍半萜烯内酯(SLs)诱导人鼻咽癌(NPC)细胞凋亡中起作用。方法 :CNE1细胞株给予SLs的活性成分 parthenolide(PN)处理 ,以及与caspase-3和 -9特异性抑制剂联合作用进行caspase途径阻断实验 ,检测细胞内caspase -9和 -3活性 ,观察其与细胞毒性和凋亡指标的关系。 结果 :PN作用后细胞TUNEL阳性率和SubG1细胞亚群增高 ,细胞失贴壁率和LDH漏出率显著增加(P<0.05) ,但caspase-9和 -3活性未见升高。特异性抑制剂作用后caspase活性明显降低(P<0.05) ,而细胞凋亡和毒性指标未见明显改变。 结论 :提示PN诱导CNE1细胞凋亡作用与其细胞毒性效应有关 。

倍半萜烯内酯对鼻咽癌细胞内核因子-κB活化的影响

背景与目的：探讨倍半萜烯内酯化合物对人鼻咽癌（nasopharyngeal catcinoma，NPC）细胞内核因子-κB（NF-κB）信号转导话化的影响。材料与方法：采用小白菊内酯（parthenolide，PN）作为受试物，以对PN诱导转归敏感的CNE1细胞给予TNF-α预诱导建立模型，PN处理后提取胞质和胞核蛋白，分别检测IκBα降解、NF-κB p65亚单位活化后核内迁移，电泳迁移率改变试验（EMSA）检测核内活化NF-κB的DNA结合活性。进行PN剂量和作用时间依赖关系分析。结果：阴性对照组IκBα蛋白存在于胞质中，PN处理组使TNF-α诱导的胞质IκBα蛋白降解被抑制、胞核内蛋白含量减少；相应地，阴性对照组p65亚单位在胞质中含量高于胞核内。PN处理组抑制TNF-α诱导的胞质p65核转位；同步进行的EMSA呵见，PN处理组NF-κB核结合活性比TNF-α诱导组明显降低。随PN处理时间（0．5—4h）和剂量（5～25μmol／L）增加，胞质中IκBα蛋白降解的抑制作用增强（其蛋白含量增加），胞核内p65亚单位蛋白减少，EMSA结合活性降低，呈明显的剂量和时间依赖性（P均〈0．05）。结论：PN可影响NPC细胞内NF-κB因子的活化，提示PN对TNF-α诱导NF-κB信号的抑制作用可能是PN诱导NPC细胞凋亡敏感性的分子机制之一。

高速逆流色谱法分离野马追乙酸乙酯萃取物中三种倍半萜烯内酯

建立了应用高速逆流色谱(HSCCC)从野马追乙酸乙酯萃取物中分离纯化3种倍半萜烯内酯的方法.采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:4:2:3)作为两相溶剂体系,从900mg野马追乙酸乙酯萃取物中分离得到3β-Hydroxy-8β-[4′-hydroxytigloyloxy]-costunolide 6.5 mg,野马追内酯A28.5mg和野马追内酯B29.3 mg,其纯度分别为92.5%,91.7%和93.9%.3种化合物的结构通过ESI-MS和1H NMR进行了鉴定.

土木香根中抗增殖作用的倍半萜烯内酯

菊科植物土木香（Inula helcuium)的根在欧洲被用作发汗、利尿和化痰剂，在美国用其根的注射剂和煎剂治疗肺部疾病和抗结核。研究发现该植物中含有倍半萜烯内酯、挥发油、酚酸类和黄酮类化合物，其主要成分土木香内酯具有强的驱虫和抗菌活性。在筛选天然的抗增殖成分研究中，发现该植物根的甲醇提取物对人胃腺癌细胞(MK-1)、人子宫癌细胞(HeLa)和鼠黑素癌细胞(B16F10)具有抗增殖的作用，本次从中分离得到7个倍半萜烯内酯。

Jasonia glutinosa中倍半萜烯内酯的体外抗炎活性

曾从西班牙传统药紫菀科植物Jasonia glutinosa中分离出4个倍半萜烯内酯lucinone、粘霉烯酮、5-epi-kutdtriol和kutdtriol,具有抗炎等多种生物活性。本次就其对环氧合酶-1(COX-1)和5-脂氧合酶(5-LOX)的抑制活性进行了研究。

柔毛地胆草中新的倍半萜烯内酯及其杀利什曼原虫活性

在筛选杀利什曼原虫的南美药用植物时发现秘鲁和巴西本土菊科植物柔毛地胆草(Elephantopus mollis)具有较强活性。本次对其化学成分及杀利什曼原虫的活性进行了研究。 秘鲁采集的干燥柔毛地胆草全株(202g)用3L热二氯甲烷提取2d,提取液减压浓缩成浆状。

小白菊内酯及其类似物的药理学研究进展

小白菊内酯（parthenolide）是从木兰科观光木属植物观光木（Tsoongiodendron odorum Chun）、菊科植物野甘菊（Tanacetum parthenium）中提取分离出来的倍半萜烯内酯化合物，作为草药曾被广泛用于治疗多种炎性疾病，包括发热、偏头痛和关节炎等，

地胆草属药用植物研究进展

菊科地胆草属植物被广泛用于多个国家或地区的传统医药中,该属中的地胆草(Elephantopus scaber)具有清热、凉血、利湿的功效;我国多个民族也用来治疗感冒、肾炎、肝炎以及虫蛇咬伤等多种伤病。该属植物含有多种化学成分,按结构类型主要有倍半萜烯内酯、三萜、甾体、黄酮等化合物。现代药理研究证明该属药用植物粗提物及单体具有抗菌消炎、抗病毒、抗原虫以及抗肿瘤等多种生物活性。本文系统综述了该属药用植物传统知识、化学成分及生物活性的研究进展,可为该属植物的进一步开发利用提供参考。

吉玛烯衍生型倍半萜内酯:生物合成的机遇与挑战

倍半萜内酯是一类分布广泛且具有显著生物学活性的天然有机化合物,如抗肿瘤、抗疟疾等活性。根据碳骨架的不同,倍半萜内酯可分为吉玛烷型、愈创木烷型、苍耳烷型、假愈创木烷型、桉烷型和榄烷型内酯等。近年来,伴随着各种组学与合成生物学等技术的发展,不同结构类型倍半萜内酯类化合物的生物合成途径逐渐被解析出来,其中吉玛烯衍生型倍半萜内酯研究报道的相对较多。因此该文重点关注吉玛烯衍生型倍半萜内酯生物合成途径及其关键酶基因,以期为该类倍半萜内酯生物合成途径的深入解析、功能基因挖掘及有效成分的异源合成奠定基础。

具有抗肿瘤活性的青蒿酸衍生物

中药青蒿为菊科植物黄花蒿(Artemisiaannua L.),我国民间用于治疗疟疾,并已从中分离到抗疟药青蒿素。

菊花活性成分Parthenolide对人鼻咽癌CNE2细胞线粒体功能和半胱天冬酶活性的影响(英文)

背景:鼻咽癌是我国南方重点防治的恶性肿瘤之一,探讨天然草本菊花活性成分在NPC化学预防的作用,对建立现代康复体系具有重要意义。目的:研究菊花活性成分倍半萜烯内酯(SLs)对人鼻咽癌细胞中线粒体功能和半胱天冬酶活化途径的影响。设计:完全随机对照分组设计。地点和对象:由中山大学公共卫生学院预防医学系完成,对象为低分化CNE2细胞株。干预:对parthenolide(PN)进行剂量-反应和时间效应作用观察,采用噻唑蓝(MTT)颜色反应检测细胞线粒体功能,底物荧光光谱法测定细胞内caspase-9和-3活性,蛋白免疫印迹法检测线粒体内细胞色素C释放和caspase-3酶原降解片段;并应用特异性抑制剂进行细胞内cas-pase途径阻断实验。主要观察指标:细胞线粒体功能、细胞内caspase-9和caspase-3活性、线粒体细胞色素C的释放和caspase-3酶原的降解。结果:PN(1～100μmol/L)作用12h和24h后,MTT颜色反应抑制率随剂量显著增高,呈明显剂量依赖性(Pearson'sr=0.7322,0.7703,P<0.05),IC50分别为252.94μmol/L和49.63μmol/L;但caspase-9和-3活性未见升高,未见细胞色素C释放和caspase-3酶原降解片段形成。PN与caspase抑制剂联合作用后,caspase-9和-3活性明显低于对照和单独PN作用(t=9.146,8.280,27.325,27.450,P<0.05)。

弯孢马利亚霉SIIA-F12361产生的新代谢产物研究

目的对海洋生境来源菌株SIIA-F12361进行分类学鉴定以及次级代谢产物的化学研究。方法采用形态学与18S rDNA序列分析对菌株进行分类学鉴定。通过硅胶柱层析、LH-20分子筛层析和反相制备HPLC诸方法,对新化合物进行分离纯化,并根据高分辨质谱、紫外、红外光谱和核磁共振数据对化合物SIIA-C12361进行结构鉴定。结果鉴定菌株SIIA-F12361为弯孢马利亚霉,其产生的新次级代谢产物属于倍半萜烯内酯类化合物。结论弯孢马利亚霉SIIA-F12361产生一新倍半萜烯内酯化合物。

小白菊内酯衍生物ACT001对P450酶的诱导作用研究

目的使用原代培养的人肝细胞研究倍半萜烯内酯类化合物衍生物ACT001对P450酶的诱导作用,为ACT001的临床使用提供参考。方法分别将3批次的冷冻原代人肝细胞进行接种培养,使用ACT001对CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4进行诱导,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)测定P450酶m RNA表达水平,液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定P450酶活力。结果 P450酶m RNA表达水平及酶活力的结果均显示模型制备成功;与对照组比较,ACT001 1、6μmol/L组细胞CYP1A2 mRNA表达水平和酶活力未见明显变化;ACT001 30μmol/L组细胞CYP1A2 mRNA表达水平显著降低,酶活力虽出现下降趋势,但不如m RNA下降明显。随着ACT001浓度增加,CYP2B6 mRNA表达水平逐渐升高,与对照组比较,ACT00130μmol/L组细胞CYP2B6 mRNA表达水平显著升高,均超过对照组的7倍,酶活力增加均>4倍,超过苯巴比妥钠诱导倍数的40%。与对照组比较,ACT001 1μmol/L组细胞CYP3A4 m RNA表达水平明显升高,超过对照组的4倍,但未达到阳性诱导剂利福平诱导倍率的40%,且随着ACT001浓度的增加,细胞内CYP3A4 mRNA表达水平逐渐降低;同时,ACT001不同浓度给药后CYP3A4酶活力未出现明显升高,均小于对照组的2倍。结论 ACT001对CYP1A2、CYP3A4没有诱导潜能,对CYP2B6存在诱导潜能,在临床联合用药时应避免与CYP2B6的底物联合使用,以减少因P450酶介导的药物-药物间相互作用(DDI)产生的不良反应。

Kuppel因子4调节人乳腺癌细胞对小白菊内酯敏感性的影响

小白菊内酯（PN）是中药野生甘菊（艾菊属银胶菊）的主要提取成分，它是倍半萜烯内酯的主要成分。近年来研究结果显示，PN在多种肿瘤中发挥抗癌作用。Kuppel因子4（KLF4）锌指转录因子在正常组织的细胞增殖、凋亡、组织内稳态和生长抑制等多种过程中起着重要的作用。Akaogi等研究结果显示KLF4抑制乳腺癌的生长，在乳腺癌细胞中以抑癌基因发挥作用。我们以人乳腺癌细胞为研究对象，探讨KLF4基因对PN抗乳腺癌细胞敏感性的影响及其机制。

ACT001通过STAT3信号通路抑制U87-MG胶质瘤干细胞的成球能力及干性维持的实验研究

目的探讨倍半萜烯内酯类衍生物(ACT001)对U87-MG胶质瘤干细胞(GSCs)的成球能力及干性维持的影响。方法应用生物信息学分析CGGA、TCGA和GEO(GSE4290、GSE16011)数据库中1477例脑胶质瘤患者的信号转导和转录激活因子3(STAT3)mRNA与胶质瘤病理学级别及患者总生存期之间的关系。免疫磁珠法分选获得U87-MG细胞株CD133阳性的GSCs。CCK-8细胞增殖-毒性检测ACT001对U87-MG GSCs增殖活性的影响。通过单细胞成球实验观察不同浓度的ACT001对U87-MG GSCs成球能力的影响。免疫荧光染色检测ACT001对U87-MG GSCs干性标志物CD133、CD44及Nestin表达的影响。蛋白质印迹法(Western blot)检测ACT001处理后STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、CD133及CD44等蛋白的表达。结果生物信息学分析结果显示,随着脑胶质瘤级别的升高,STAT3 mRNA的表达量也逐渐升高(均P<0.05);而且STAT3高表达水平组的患者预后较差(均P<0.01);STAT3在神经球培养及干性细胞株的mRNA表达量较高(P<0.05)。CCK-8细胞增殖-毒性检测结果提示,随着ACT001浓度的增高,U87-MG GSCs的抑制率逐渐升高。单细胞成球实验结果显示,随着ACT001药物浓度的升高,各组的成球数目及细胞球体积逐渐降低(P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,加药组的GSCs细胞球干性标志物CD133、CD44及Nestin的表达降低。蛋白质印迹法检测结果显示,随着ACT001药物浓度的升高,干性标志物CD133、CD44的蛋白表达量逐渐减低(均P<0.01);且STAT3的蛋白表达量的差异均无统计学意义(均P>0.05),而p-STAT3的蛋白表达量均呈降低趋势(均P<0.01)。结论ACT001通过抑制STAT3信号通路,从而抑制了U87-MG GSCs的成球能力并且降低了其干性维持能力。