Cu^(2+)作用下辣椒膜脂过氧化及倍半萜环化酶基因转录

分析了在ＣｕＣｌ２作用下辣椒叶片倍半萜环化酶活性、倍半萜环化酶ｍＲＮＡ表达、细胞ＧＳ Ｈ和ＧＳＳＧ代谢及膜脂过氧化。结果表明，Ｃｕ２＋能诱导辣椒叶片表达倍半萜环化酶活性，酶活性的表达与相应的基因转录有关。辣椒叶片在ＣｕＣｌ２作用下合成了含－ＳＨ的螯合肽，相应地ＧＳＨ含量下降，ＧＳＳＧ的含量有所上升，细胞膜脂过氧化作用加剧。推测细胞膜脂过氧化产物或ＧＳＨ氧化产物可能参与了ＣｕＣｌ２诱导辣椒倍半萜环化酶基因表达的信号传递作用。

辣椒倍半萜环化酶基因在几种非生物诱发因子作用下的表达

报道了在CuCl2 、HgCl2 及NaCl、紫外线等几种诱发因子作用下辣椒倍半萜环化酶活性表达 ,并利用从辣椒中克隆出来的 2个倍半萜环化酶等位基因cDNA的特异性片段 ,研究这两个等位基因在上述诱发因子作用下的表达情况 .结果表明 :在CuCl2 、HgCl2 、NaCl、紫外线诱发作用下 ,离体辣椒叶片均能表现一定的倍半萜环化酶活性 ,而CK中几乎检测不出倍半萜环化酶活性 .NorthernBlot分析表明 ,辣椒倍半萜环化酶基因在逆境下被诱导转录 ,两个cDNA在不同的诱发因子在相同的逆境胁迫下的表达有一定的特异性 ,推测该基因家族的不同成员在辣椒适应不同逆境的防御反应中有一定的意义 .图 5参

外源水杨酸对辣椒倍半萜环化酶基因表达及抗氧化酶系的作用

分析了外源水杨酸对辣椒叶片倍半萜环化酶基因表达及抗氧化酶系的作用 .结果表明 ,在 0 .5～4mmol·L-1的浓度范围内 ,SA处理均能不同程度地诱导辣椒叶片中倍半萜环化酶基因转录并表达酶活性 ,但是酶活性较低且在SA处理 36h后才出现 ;SA处理后 ,辣椒叶片SOD和POD酶活性较对照增高 ,CAT酶活性较对照降低 ,相应地 ,H2 O2 浓度升高 .H2 O2

一个辣椒倍半萜环化酶cDNA克隆及其经紫外线和CuCl_2处理后的表达特征

从经紫外线处理的辣椒(Capsicum annuum)叶片mRNA建立的cDNA文库中筛选出1个长度为1 955 bp的克隆,SCCCA#2.该cDNA编码560个氨基酸的蛋白,与SCCCA#1分别有80.0%和77.2%的核苷酸和推测氨基酸序列同源性,但在3'非翻译区核苷酸同源性很小.此外,还与烟草的TEAS、天仙子的CVS、辣椒的EAS(can5588)、番茄的germacrene合成酶基因、棉花的(+)-delta-cadinene合成酶基因等倍半萜环化酶基因分别有78.0%,71.6%,74.8%,74.6%,40.0%～50.0%的氨基酸序列同源,认为这是1个辣椒倍半萜环化酶的cDNA.Northernblot分析表明,正常情况下SCCCA#2在辣椒叶片中不表达,而在紫外线、CuCl2作用下有不同程度的表达.

EGTA和La^(3+)对几种逆境诱导辣椒样半萜环化酶基因表达的影响

用钙离子螯合剂EGTA及细胞膜钙离子通道拮抗剂La3 +预处理辣椒叶片 ,以破坏辣椒叶片中的钙信使系统 ,再用紫外线、CuCl2 、HgCl2 处理辣椒叶片 ,研究表明EGTA和La3 +预处理未能降低CuCl2 、HgCl2 、UV诱导辣椒倍半萜环化酶活化的作用 ,EGTA预处理反而对CuCl2 、HgCl2 、UV的诱导辣椒倍半萜环化酶活性作用有一定的促进效应 .单独用EGTA处理也能诱导离体辣椒叶片表现出倍半萜环化酶活性 .NorthenBlot分析结果表明 ,EGTA能诱导辣椒倍半萜环化酶基因转录 .研究表明 ,在辣椒倍半萜环化酶基因表达过程中 ,还存在钙信使系统以外的信号传递途径 ;非生物诱发因子对倍半萜环化酶基因表达诱导作用与生物Elicitor的诱导作用在信号传递上有差异 .

细菌中倍半萜生物合成的研究进展

萜类化合物是一大类小分子天然产物,在生物体内扮演重要的角色。植物和真菌中萜类化合物的生物合成已被广泛研究,但是在真核生物中克隆或改造萜类化合物生物合成途径还有较大难度。许多细菌同样可以产生萜类化合物。在过去十多年间细菌萜类合酶的研究进展为我们对萜类化合物生物合成的理解做出了显著的贡献。这里我们主要关注细菌中合成的倍半萜化合物,概述其化学结构、倍半萜合酶对法尼基焦磷酸环化的机制、后修饰酶特别是氧化还原酶所参与的后修饰、代谢调控以及合成途径中尚未解决的问题等。

亚洲棉(+)-δ-杜松烯合成酶基因CAD1-A的分离及其在幼苗中的表达特征分析

棉花倍半萜环化酶，即（＋）－δ－杜松烯合成酶（ＣＡＤ），由一个基因家族编码．该 基因家族可分为两个亚族：ＣＡＤ１－Ａ和ＣＡＤ１－Ｃ．分离了亚洲棉ＣＡＤ１－Ａ基因．对亚洲棉 ７天龄幼苗的ｍＲＮＡ原位杂交表明，ＣＡＤ１－Ａ和ＣＡＤ１－Ｃ的转录子主要分布在侧根原 基、顶端分生组织和新生侧根的维管组织中，在幼苗下胚轴的原形成层和部分表皮、下 表皮细胞中也有分布．ＣＡＤ１－Ａ启动子在转基因烟草中表现出相似的活性．组织化学实 验发现，倍半萜醛类分布于侧根根尖的外层细胞以及地上部分的色素腺体中．ＣＡＤ１基 因在亚洲棉幼苗中的表达特征，以及倍半萜醛类的分布特征，组成了棉花幼苗的化学 防御体系。