重型血友病A凝血因子Ⅷ第1号内含子倒位的研究进展

近年来发现凝血因子Ⅷ基因第1号内含子倒位是仅次于第22号内含子倒位、导致重型血友病A的常见原因。现就引起重型血友病A的凝血因子Ⅷ第1号内含子倒位的分子机制、检测方法及与抗体形成关系的研究进展作一综述。

染色体臂间倒位的遗传效应分析

目的：研究人类染色体臂间倒位的遗传效应，分析染色臂间倒位与不育、流产和畸胎的关系．方法：常规取外周血淋巴细胞培养制备染色体Ｇ显带标本，按人类细胞遗传学国际命名体制（ＩＳＣＮ）进行核型分析．结果：染色体臂间倒位在受检的２８７２人中，检出２９例，计有ｉｎｖ（９）２６例、ｉｎｖ（８）（ｐ１１．２ｑ２４．３）１例、ｉｎｖ（３）（ｐ２５ｑ２１）１例、ｉｎｖ（１）（ｐ３６ｑ２５）１例，其中ｉｎｖ（１）（ｐ３６ｑ２５）为世界首报核型．结论：ｉｎｖ（９）本身不具有病理学意义，而其它染色体臂间倒位与不育、流产和畸胎有关。

快速傅立叶变换中的一种倒位序生成法

快速傅立叶变换是离散傅立叶变换(DFT)的一种快速算法,它的出现使DFT的计算大大简化,运算时间可缩短一、二个数量级,从而使得离散傅立叶变换在信号分析与处理领域中得到了广泛的应用。在应用软件和硬件程序设计中要实现快速傅立叶变换算法,均涉及到序列的倒位序排列问题。针对该问题提出倒位序生成法,直接计算各自然顺序位置的倒位序数值,然后通过变址运算完成原数列的倒位序的排列。该方法对任何满足N=2M点的快速傅立叶变换,能很快实现其变换中序列的倒位序排列。该方法只涉及倒位序十进制数和顺序十进制数,不用对二进制数进行转换,简单易行,仿真实验结果证明算法可靠有效。

两例染色体倒位引起的智力残疾

通过对43例弱智儿童的外周血培养,获取38份染色体显带标本。经鉴定,35例正常,3例异常,其中一例为21三体综合征,2例是第9号染色体臂间倒位。

染色体倒位与优生研究

为研究染色体倒位与优生的关系 ,应用外周血淋巴细胞、羊水细胞进行染色体制备和显带 ,并结合遗传咨询和跟踪随访。结果在3727例外周血染色体检查对象中 ,发现44个染色体倒位家系55个染色体倒位携带者 ,检出率为1.47 %。34.54 %倒位携带者有异常表型 ,主要为性分化异常、智能低下、多发畸形。不良孕产是常染色体倒位携带者的主要临床表现 ,其早期自发性流产率为42.86 % ,活产儿占妊娠总数的36.73 % ,其中表型正常14.29 % ,表型异常22.44 %。对9个染色体倒位携带者家系实施产前诊断 ,发现后代均为携带者 ,未见重组染色体异常胎儿发生。提示染色体倒位是常见的染色体结构重排 ,其中Y染色体倒位inv(Y)与性分化、性发育异常有关 ,inv(9)与流产关系密切 ,部分携带者有表型异常。对染色体倒位携带者可通过遗传咨询 ,进行孕前、孕期、产前、产后指导和干预。但对倒位携带者进行染色体病产前诊断是否有必要 ,尚待进一步积累和总结。

产前胎儿染色体倒位的临床诊断分析

目的探讨孕中期胎儿染色体倒位的产前诊断指征分布及临床效应。方法选取2011年2月至2016年12月在我院进行羊水染色体核型分析检出的96例胎儿染色体倒位病例进行回顾性分析。结果 96例病例中产前诊断指征为高龄妊娠者32例、唐氏筛查高风险者26例、倒位携带者20例、不良孕产史者10例及B超结果异常者8例。新发突变倒位9(9.4%,9/96)例,遗传自双亲87例(90.6%,87/96)。新发突变病例中超声异常检出6例(66.7%,6/9),遗传型超声异常检出1例(1.1%,1/87)。96例病例中除5例伴随超声结果异常及2例伴随非整倍体异常选择终止妊娠外,其余均选择了继续妊娠。结论产前诊断中检出染色体倒位应进一步明确倒位是新发突变还是遗传自双亲之一。新发突变者应建议定期超声观察,并结合基因芯片等分子检测手段是确定胎儿是否存在遗传物质的改变,为孕妇提供准确妊娠指导。

9号染色体倒位携带对于胚胎染色体及妊娠结局的影响

目的分析因复发性流产(RSA)行胚胎植入前筛查(Preimplantation genetic test for aneuploidies,PGT-A)包括9号染色体倒位[inv(9)]携带者及非inv(9)携带者胚胎检测结果及妊娠结局,探讨inv(9)携带对于胚胎染色体及妊娠的影响。方法回顾性分析2007年9月至2018年6月我中心就诊的因RSA行PGT-A的165对夫妇。夫妇双方至少有一位染色体核型为inv(9)的30对夫妇作为A组,染色体核型正常的135对夫妇作为B组;比较A组、B组胚胎检测结果以及妊娠结局。结果一次取卵周期中,A组总移植周期为34周期,每取卵周期累积妊娠率为76.9%,流产率为25.0%;B组总移植周期为125周期,每取卵累积妊娠率为74.0%,流产率为16.9%;两组间妊娠率及流产率均无统计学差异(P>0.05),但A组胚胎种植率显著低于B组(41.7%vs.61.4%)(P<0.05)。A组检测胚胎数209枚,胚胎染色体异常率为62.2%,但异常染色体均非9号染色体;B组活检胚胎数532枚,胚胎染色体异常率51.5%,显著低于A组(P<0.05)。结论 inv(9)有增加其它染色体异常的趋势且可能影响胚胎种植,导致RSA风险增加。

染色体倒位对妊娠结局遗传效应的回顾性研究

目的探讨染色体倒位对妊娠结局的遗传效应。方法对2009年1月至2011年2月因不良妊娠生育史在本院妇科门诊及优生门诊遗传咨询的3 610例就诊者取外周血培养进行染色体G显带分析。结果 3 610例中发现76例染色体倒位患者共14种倒位类型,其中46例本人或配偶有自然流产史(流产1次12例,流产2次26例,流产3次8例),不孕不育2例,死胎畸胎8例(合并自然流产2例),精液异常5例,余15例无不良妊娠史。结论染色体倒位可能会导致自然流产、不孕不育、畸胎等不良妊娠结局;必要的产前诊断可防止染色体病患儿出生。

生育障碍患者中染色体倒位核型的特点及临床分析

目的:分析及总结生育障碍患者中染色体倒位核型的特点及临床意义。方法:临床分析不良妊娠结局夫妇双方的外周血染色体核型,对男方及女方不同性别间染色体异常的检出率进行比较并进行临床分析。结果:在2816例(1408对)患者中检出倒位核型31例,检出率为1.10%(31/2816),其中男性占16例,女性占15例。男方染色体倒位检出率为1.13%(16/1408),女方染色体异常检出率为1.06%(15/1408),检出率间无统计学差异(P>0.05)。在31例倒位核型中,共有inv(9)25例,检出率为0.89%(25/2816),占倒位核型总数目的 80.64%(25/31),另外还包括:1例inv(6)(q11q21),l例inv(7)(p15q36),1例inv(18)(p11q21),1例inv(1)(q34q22),1例inv(X)(p22q26)及1例inv(10)(q12q22);检出的染色体31例倒位核型异常均为单方(男方或女方)异常,其中,男方16例,占总的倒位核型数目的51.61%(16/31),女方15例,占总的倒位核型数目的 48.39%(15/31)。倒位核型的临床效应表现为胚胎停育、自然流产及21三体儿生育史等。结论:生育障碍患者中染色体核型倒位以inv(9)最为常见,inv(9)可能还具备某些潜在未知的临床效应,男方及女方核型倒位的检出率无统计学差异,男方染色体倒位核型异常对生育结局的影响需与女方同等评估,需在功能基因组学层面进行染色体倒位的基因重排及异常配对的分子机制研究。

长距离PCR技术检测重型血友病甲Ⅷ因子基因倒位的进一步研究及推广应用

将已研究成功的长距离ＰＣＲ（ＬＤＰＣＲ） 技术［３］在热循环条件、模板ＤＮＡ用量及ｄＮＴＰ用量等方面进行了进一步优化和探索。应用优化后的ＬＤＰＣＲ技术检测了来自天津、江苏、北京、湖北、四川等省市１０８个重型血友病甲家系共１５７ 份ＤＮＡ（患者１０５人， 家属５２人）， 发现４７例患者（或家系） 有凝血因子Ⅷ（ＦⅧ） 基因倒位， 占重型患者的４４％ ； 查出基因倒位携带者３０ 余名。用ＬＤＰＣＲ检测ＦⅧ基因倒位的技术可以准确、简便、快速地直接进行重型血友病甲的基因诊断、携带者检测及产前诊断。

80例染色体倒位核型分析

染色体倒位是染色体畸变之一。实质上是遗传物质或遗传信息的增减,可以产生遗传学的剂量效应和位置效应,一般能不同程度地影响机体的发育和生存,故而产生明显的临床效应。我室自1982年～1998年间,从有不良生育史的8500例患者中发现倒位患者80例,现做如下分析。

运用三色FISH技术确定自然流产夫妇染色体微小区域倒位

【目的】对2例婚后妻子连续2次流产伴21号染色体结构改变病例进行多探针荧光原位杂交(FISH),探讨FISH技术在临床诊断微小区域染色体结构异常的应用价值。【方法】通过染色体常规G显带技术初步确定染色体结构异常类型及染色体断裂的区带位置,然后挑选位于21号染色体长臂位点特异性BAC克隆,缺口平移法将其标记为探针,与21号染色体长臂末端的商品化探针混合,进行三色FISH。【结果】FISH结果排除了涉及其它染色体结构异常的可能,确定这2例均为21号染色体长臂微小区段的臂内倒位,这是首次关于21号染色体臂内倒位导致自发流产病例的报道。【结论】21号染色体臂内倒位与自然流产相关;多色FISH技术在诊断和确定微小区域染色体结构异常中有非常重要的作用和应用价值。

75例血友病A患者内含子22及1基因倒位情况分析

目的:观察血友病A(HA)患者凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子22倒位和内含子1倒位情况。方法:取75例HA患者静脉血,采用长距离PCR扩增技术(LD-PCR)检测内含子22和内含子1倒位情况,观察两种内含子倒位发生率,同时观察内含子22倒位在重型HA中的比例,比较有家族史和无家族史HA患者内含子22倒位发生率。结果:检出22号内含子倒位患者27例,检出率36%(27/75),全部为HA重型患者,占重型血友病A患者的57.4%(27/47);27例中有21例有家族史,有家族史患者内含子22号倒位的发生率高于无家族史患者(P<0.05);检出内含子1倒位1例,占1.3%(1/75)。结论:FⅧ基因内含子22倒位患者患重型HA的几率较高,内含子22倒位检测在重型HA的基因诊断中具有重要意义。

染色体倒位核型报告

染色体倒位是染色体结构畸变之一。我院从１９８２年８月至１９９３年８月共检查染色体２２９０例，其中发现染色体倒位２８例，检出率为１２．２‰，臂内倒位４例检出率为１．７５‰，臂间倒位２４例检出率为１０．５‰。臂间倒位检出率高出臂内倒位６倍。我院检出倒位染色体涉及１、６、７、９、１１、１２、１７、１９号。臂内倒位有６、７、１２号。在臂间倒位中ｉｎｖ（９）有２１例，检出率为９．２‰，占臂间倒位的８７．５％。

倒位PCR法检测血友病A FⅧ基因内含子22/1倒位

目的建立血友病A(hemophilia A,HA)FⅧ基因第22内含子倒位PCR检测法,并初步应用于HA直接基因诊断。方法应用倒位PCR(inversion-PCR,I-PCR)方法对24个HA家系中所有先证者的FⅧ基因22内含子倒位进行检测,对检测阳性者的母亲进一步用上述方法行携带者诊断,并对其中1例进行羊水产前基因诊断。检测阴性者再行内含子1倒位筛查。结果 24个HA家系中,7例先证者的F基因内含子22倒位检测为阳性,阳性检出率、可诊断率分别为29.17%、100%,未发现内含子1倒位;7例内含子22倒位突变阳性患者的母亲有6例为倒位携带者,羊水诊断未发现内含子22/1倒位。结论 I-PCR法能准确地检测F基因22内含子倒位突变,可应用于HA患者及携带者FⅧ基因22内含子倒位基因诊断及产前诊断。

长距离PCR检测重型血友病A病人凝血因子Ⅷ基因倒位

为了筛查山东省重型血友病A(hemophiliaA ,HA)凝血因子Ⅷ基因倒位的患者并检出携带者 ,采用长距离DNA扩增 (LD PCR)方法 ,以 0 .6 %琼脂糖凝胶电泳技术 ,检测临床上确诊的 5 5例重型HA患者及其家系成员中是否存在凝血因子Ⅷ (FⅧ )基因倒位。电泳出现 11kb带 ,示凝血因子Ⅷ基因倒位 ;12kb带 ,示非倒位 ;这两条带同时出现者为凝血因子Ⅷ基因倒位携带者。结果表明 :5 5例无亲缘关系的重型HA患者中 ,发现 2 2例患者 (或家系成员 )有凝血因子Ⅷ基因倒位 ,占重型HA患者的 4 0 % ;15个家系中查出基因倒位携带者 5名。结论 :运用LD PCR技术可以准确、简便、快速地检测重型血友病A患者是否存在凝血因子Ⅷ基因倒位。

6例9号染色体倒位的遗传学分析

通过对本地区9号染色体倒位患者发生率及临床表现的分析,探讨9号染色体倒位与临床效应的关系,为临床遗传咨询提供理论依据。采用微量全血培养及染色体标本制备技术,进行外周血染色体检查。结果显示1314例案例中发现9号染色体臂间倒位6例,发生率为0.46%;发生倒位的断裂点p11一例,p12两例,p13两例,p21一例;q12两例,q13三例,q21一例。说明9号染色体的倒位节段通常为p12→q13。9号倒位携带者会引起不良的遗传效应,如造成流产、不孕、不育、畸胎、其他遗传病患儿。

硬脂酸脱氢酶基因ghSAD-1倒位重复构建的棉花遗传转化(英文)

以种子特异性表达的大豆凝集素基因启动子、终止子以及棉株体内硬脂酰 -ACP△ 9脱氢酶的基因 gh SAD-1进行倒位重复基因构建 ,以农杆菌介导法转化陆地棉品种 Coker3 1 5,获得了较高的转化频率。PCR、Southern杂交及种子内脂肪酸组分含量分析。结果表明 ,该倒位重复基因的表达及沉默效应在不同的转基因品系间存在差异 ,硬脂酸含量分别由对照的 2 %提高至 4%～3 8.2 % ,而棕榈酸含量则明显降低。高含硬脂酸的转基因品系可作为棉子油品质改良的基础材料 。