济南地区倒瓤西瓜CGMMV的检测

山东省济南地区2011年嫁接西瓜严重发生倒瓤,通过实地调查,初步判断为病毒侵染引起,经对采集的80份西瓜病样进行ELISA(Enzyme-Linked Immuno-Sorbnent Assay)和RT-PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)验证。结果表明:经ELISA检测80份西瓜样本中有70份感染了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaicvirus,CGMMV),证明山东省济南地区嫁接西瓜严重发生倒瓤是由CGMMV引起的。

西瓜倒瓤原因与预防措施

近年,西瓜倒瓤现象越来越多,夏秋茬种植发生较为普遍,春茬西瓜结果期遇上台风或连续降雨、水浸等也较易发生,影响西瓜的正常生长,给瓜农造成巨大的经济损失。一、症状倒瓤又叫水脱瓜,夏季又称高温发酵瓜。西瓜倒瓤在外观上与正常果一样,叶片、茎蔓及果实外表没有明显的症状,拍打时发出当当敲木声,与成熟瓜、生瓜不同。瓤质地变软呈水渍状,瓤色变暗呈紫红色,严重时瓜瓤具有酸败味、酒味。种子密集处及种子周围首先出现症状。西瓜肉质恶变是生理性病害。

西瓜感染黄瓜绿斑驳花叶病毒后糖分代谢与倒瓤的关系

为揭示人工接种黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)后西瓜糖分代谢与倒瓤的关系,采用高效液相色谱法测定了接种CGMMV后西瓜的葡萄糖、果糖、蔗糖含量变化,采用比色法测定了糖酵解途径关键酶及蔗糖代谢相关酶活性的变化。结果显示,西瓜苗感染CGMMV后,果实中葡萄糖、果糖、蔗糖含量均较对照发生明显变化,接种处理后葡萄糖含量在授粉7~28 d显著高于对照,之后迅速下降,35 d时显著低于对照,仅为对照的24.87%;果糖含量仅在授粉后7~14 d高于对照,21~35 d显著低于对照;接种处理和对照的蔗糖含量在授粉后14~35 d均逐渐上升,但14~35 d接种处理显著低于对照。接种处理后己糖激酶、磷酸果糖激酶和果糖激酶活性均在授粉后7~14 d显著低于对照,21~28 d显著高于对照,35 d时显著低于对照;丙酮酸激酶活性授粉后7~21 d显著低于对照,35 d时显著高于对照;酸性转化酶和中性转化酶活性在授粉后7~21 d显著低于对照,35 d时高于对照;蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶活性均显著低于对照,其中蔗糖合成酶活性在授粉后28 d时仅为对照的21.32%。推断西瓜苗接种CGMMV后糖酵解的4个关键酶协同作用,调控糖酵解,进而调控葡萄糖和果糖的积累与代谢,同时蔗糖代谢相关酶活性降低,阻碍蔗糖合成,即西瓜苗感染CGMMV导致倒瓤与其糖分的合成与代谢密切相关。

人工接种CGMMV后与西瓜倒瓤相关部分生理指标的研究

本研究以辽宁省田间主栽西瓜品种“京欣”为试材,通过测定多聚半乳糖醛酸酶（PG）的活性,以及乙烯、丙酮酸及丙酮酸代谢产物—乳酸、乙醛、乙醇含量的变化,明确了西瓜感染黄瓜绿斑驳花叶病毒后上述生理指标的改变与西瓜倒瓤的关系。研究结果表明：接种处理的西瓜果实授粉后7d和28d PG出现2次活性高峰,PG活性过高将导致果肉软化;乙烯含量亦在授粉后21-28 d明显高于健康对照,这一变化将导致果肉水渍化败坏;无论接种早晚,西瓜果实内丙酮酸及丙酮酸代谢产物均有不同程度的积累。定植期接种处理的西瓜,授粉后21d时西瓜果实内丙酮酸含量为健康对照的2.51倍,35 d时达健康对照4.09倍;授粉后7d乳酸含量已显著高于对照,35d时接种处理的西瓜果实内的乳酸含量迅速增加至43.5 μmol·g^-1FW,达健康对照的4.7倍;乙醛含量随着西瓜成熟逐渐增加,尤其是授粉后21-35d乙醛含量增加速度极为迅速,35 d时达健康对照的26.4倍;乙醇含量授粉后7 d最高,达健康对照的10.1倍,随后有所下降。于压蔓期接种处理的西瓜果实,授粉后21d,丙酮酸、乳酸、乙醛含量明显高于健康对照,但均低于定植期接种处理的,乙醇含量与健康对照无明显差异,也就是说,感染该病毒越早,对西瓜的生长影响越明显。

辽宁省西瓜倒瓤病的检疫与防控措施

在调查瓜类生产上重要的检疫性病害西瓜倒瓤病的为害症状、生物学特性的基础上,制定针对西瓜倒瓤病的检疫监管措施与防控技术规范。一旦发病,可综合运用种子处理、农事操作、土壤消毒、药剂防治和检疫监管等措施应对。

黄瓜绿斑驳花叶病毒对西瓜产量、品质及种子带毒的影响

研究了西瓜不同时期接种黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)后对其生长、产量、品质和种子带毒的影响。西瓜植株接种CGMMV越早其生长受到抑制越明显,砧木期、嫁接后定植前、定植期、压蔓期、授粉期各处理的株高、叶片数、叶片长与对照相比差异极显著(p<0.01),而结瓜以后接种CGMMV对西瓜生长状况无显著影响。压蔓期前3个生育期接种该病毒,西瓜产量损失分别为56.49%、55.48%和51.14%。而压蔓期以后接种该病毒,西瓜产量损失与对照相比仍分别降低17%、13.1%和14.35%。关于倒瓤情况,压蔓期前接种该病毒可导致西瓜果实100%倒瓤,压蔓期、授粉期接种处理西瓜倒瓤率分别为48%和34%,即使结瓜后再接种病毒西瓜倒瓤率仍高达18%。血清学检测表明,压蔓期前接种的西瓜其果肉和种子均携带CGM-MV,带毒率达100%;结瓜后再接种CGMMV西瓜种胚和果肉的带毒率仍然高达64%。检测种胚和果肉病毒含量表明,接种时期越早病毒含量越高,但结瓜后接种仍有较高的病毒含量,种胚和果肉的病毒含量分别达5.98 mg/mL和5.64 mg/mL。

春季大棚西瓜栽培管理措施

西瓜是夏季的主要水果,市场需求大。该文主要从选种、整地作畦、施肥、播种育苗、定植与田间管理等方面对春季大棚西瓜栽培技术进行介绍。分析大棚西瓜“倒瓤瓜”的发生原因,并提出预防措施,以期为提高春季大棚西瓜栽培的种植效益。

硼对西瓜蔗糖代谢的影响及对黄瓜绿斑驳花叶病毒的抗性诱导

以辽宁田间主栽西瓜品种"京欣"为试材,通过室内盆栽试验及田间大棚试验,采用病情指数调查、酶联免疫吸附-双抗夹心法、田间倒瓤率调查和蔗糖合成相关生理指标测定,研究了硼元素抗黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber Green Mottle Mosaic Virus,CGMMV)的室内效果、田间对西瓜倒瓤率的控制作用及其对西瓜蔗糖代谢的诱导作用。结果表明:叶面喷施硼元素浓度为30 mg/L时,葫芦的发病程度及病毒含量均显著低于接种对照(P<0.05);单独喷施硼元素和喷施硼元素后再接种CGMMV处理,均可通过调节与蔗糖代谢密切相关的酸性转化酶(AI),中性转化酶(NI),蔗糖合成酶(SS),蔗糖磷酸化酶(SPS)活性,促进蔗糖的合成。此外,田间试验结果表明:西瓜感染CGMMV前,喷施硼元素,可降低西瓜倒瓤率,对西瓜倒瓤的防控作用可达42.9%,且果肉内病毒含量低于接种对照。因此,喷施硼元素后可以通过调控蔗糖代谢相关酶活性,促进蔗糖的合成,从而抑制西瓜倒瓤。

小西葫芦绿斑驳花叶病毒生物学特性及传播方式

小西葫芦绿斑驳花叶病毒(Zucchini green mottle mosaic virus,ZGMMV)是我国新报道的侵染葫芦科作物的烟草花叶病毒属病毒。从感染病毒的葫芦叶片中分离出ZGMMV,摩擦接种西瓜(Citrullus lanatus)、葫芦(Lagenaria siceraria)、西葫芦(Cucurbita pepo)、南瓜(Cucurbita moschata)、丝瓜(Luffa cylindrica)、黄瓜(Cucumis sativus)、甜瓜(Cucumis melo)、西方烟(Nicotiana occidentalis)、本生烟(Nicotiana benthamiana)和心叶烟(Nicotiana glutinosa),通过症状观察、血清学和分子生物学检测明确症状特点和寄主范围;研究病毒的种子传播,以及整枝打杈和滴灌对于病毒的传播。结果表明:ZGMMV可侵染所有供试植物;叶片症状主要为花叶、斑驳和褪绿斑,西瓜茎蔓出现坏死斑、果实倒瓤,甜瓜果实表皮出现褪绿斑;ZGMMV可通过整枝打杈等农事操作机械传播,也可通过滴灌的水在土壤中传播。该病毒在西瓜、葫芦和甜瓜上可以种传,种传率均约为1%。研究结果有助于制订该病害的综合防控策略。

黄瓜绿斑驳花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立

为灵敏、快速地检测西瓜种子和果实中的黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV),根据该病毒的衣壳蛋白(coat protein,CP)序列设计特异性引物,建立基于SYBR GreenⅠ染料的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR)技术,并对采集的12份不同发育期西瓜果实样品进行检测。结果表明,建立的RT-qPCR检测技术可对西瓜种子中的CGMMV含量进行精确检测,检测下限为3.35×10^(2) copies/μL。采集的12份不同发育期西瓜果实样品中有10份被检测出携带CGMMV,病毒含量范围为1.00×10^(4)~4.80×10^(6) copies/μL。随着果实发育,由CGMMV引起的果实倒瓤症状愈加明显,果实中CGMMV的积累量也明显增加。授粉后25 d西瓜果实中CGMMV的含量是授粉后10 d时的30倍,表明病毒在果实中的积累可能受生长发育期的影响且果实倒瓤症状的形成与病毒积累量呈正相关。