血吸虫疫苗候选分子的研究进展

近年来,对血吸虫病疫苗进行了广泛的研究,并取得一些进展,已鉴定、克隆和表达了近百种血吸虫病疫苗候选分子。虽然这些疫苗候选分子都没有获得如照射减毒活尾蚴疫苗那样好的免疫效果,但已有一些被WHO认为是最有希望的疫苗候选分子,它们在各种动物试验中均能诱生一定的免疫保护力。本文将血吸虫疫苗候选分子方面研究作一综述性介绍。

日本血吸虫疫苗候选分子研究进展

血吸虫病是一种分布广泛、危害严重的人兽共患病。近年来随着生物化学、分子生物学、免疫学等学科的飞速发展，人们对血吸虫疫苗的研究工作也取得了很大的进展，目前各国研究的焦点主要集中在疫苗候选分子方面。本文对近年来有前途的几种血吸虫疫苗候选分子的研究进展予以综述。

顶复门原虫棒状体蛋白疫苗候选分子的研究进展

顶复门原虫是一类专一性的胞内寄生性原虫,其种类丰富、分布广泛,包括艾美耳球虫、巴贝斯虫、隐孢子虫、疟原虫和弓形虫等。此类原虫具有保守的棒状体、致密颗粒以及微线等顶端复合器结构,这些细胞器可分泌大量的入侵相关蛋白分子介导虫体入侵宿主细胞。而棒状体蛋白是这类原虫在入侵过程中由棒状体分泌的一类蛋白,其在虫体入侵宿主细胞、纳虫空泡形成及胞内虫体的增殖调控等方面发挥着至关重要作用,是最具潜力的疫苗候选抗原。本文对棒状体蛋白的发现、组成、功能及定位进行概述,以目前研究最深入的弓形虫棒状体蛋白为主,归纳总结近年来关于棒状体蛋白作为顶复门原虫疫苗候选分子的研究进展,以期为新型抗原虫分子疫苗的研制提供理论依据。

用cDNA表达文库连续分组免疫鉴定实验性内脏利什曼病疫苗候选分子

世界上许多地区,内脏利什曼病是一个严重的公共卫生问题。研制利什曼病疫苗已成为一项具有挑战性的任务,但至今仍未鉴定出具有保护作用的重组疫苗候选分子。为了解决这个难题,本文作者采取了一种简化方法,以筛选和鉴定内脏利什曼病小鼠模型中对攻击感染具有保护作用的无鞭毛体cD-NA序列。

日本血吸虫病候选分子疫苗免疫保护力研究进展

血吸虫病是严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,疫苗是预防控制血吸虫病的重要手段。本文对日本血吸虫病蛋白疫苗、DNA疫苗及联合免疫的研究现状、血吸虫病疫苗存在的问题及其展望进行了概述。

玉米大斑病菌全基因组候选效应分子的预测和分析

大斑病是一种世界性玉米叶部病害,可造成玉米产量严重降低,其致病菌大斑刚毛座腔菌(Setosphaeria turcica)可在叶片形成坏死斑,影响玉米品质并造成严重经济损失。效应分子在植物病原真菌对植物侵染过程中发挥着重要作用。根据玉米大斑病菌Et28A菌株全基因组信息,利用Signal P、TMHMM、Protcomp、big-PI Predictor和TargetP生物信息学软件和预测程序对玉米大斑病菌中11698条蛋白序列进行候选效应分子预测,再通过对上述蛋白半胱氨酸含量、信号肽长度及冗余性分析,获得60个符合条件的候选效应分子,其中大部分为功能未知的假定蛋白。利用生物信息学方法预测出玉米大斑病菌的候选效应分子,为进一步研究效应分子在病原菌与玉米互作中的作用奠定了基础,并为其他病原菌效应分子的预测及分析提供了参考。

禾谷炭疽菌候选效应分子评测研究

基于前人对禾谷炭疽菌中已报道的177个候选效应分子的氨基酸数据,结合其他已报道效应分子具有的5个典型特征,通过信号肽预测、跨膜区结构预测以及氨基酸基本特征、半胱氨酸含量等分析,明确82个候选效应分子具有效应分子的典型特征;同时,利用SMART在线分析工具,明确上述效应分子具有高度序列特异性特点.

非编码RNA作为SLE候选分子标志物的相关进展

SLE的发病机制不明,建立早期诊断指标及寻找治疗靶点尤为重要。SLE的传统蛋白标志物特异度差、敏感度低。近年来研究者发现越来越多的分子标志物参与了SLE的发展,为提高其临床诊断效率提供了可能性。RNA标志物是近年来的研究热点,其中,非编码RNA具有准确度高,检测成本低等优点,有成为SLE临床诊断中候选分子标志物的潜力。

基于转录本组和蛋白质组数据的日本血吸虫候选疫苗分子序列的预测和分析

预测了可能模拟致弱疫苗免疫保护性效果的日本血吸虫抗原分子,为实验鉴定抗日本血吸虫候选疫苗分子提供基础.实验基于已发表的辐照尾蚴转化的童虫的特征性转录本组(曼氏血吸虫)和蛋白质组(日本血吸虫)序列,用BLASTP算法等搜寻来源于正常日本血吸虫童虫和成虫的转录本组和蛋白质组中的序列;应用在线软件、相关数据库及文献对这些序列进行序列注释分析.结果获得了与辐照尾蚴转化的童虫特征性表达的分子同源或一致的日本血吸虫序列131条,它们较高比例地出现在正常童虫高表达的分子集类中;进一步文献分析预测得到了52个日本血吸虫候选疫苗分子,它们的序列特征与存在于血吸虫体被的一些分子和已知的抗血吸虫疫苗分子的相类似.用数据挖掘技术获得了一批日本血吸虫候选疫苗分子,为进一步实验研究奠定了基础.

组织蛋白酶L/G对创伤性深静脉血栓模型大鼠静脉壁的影响(英文)

背景:目前,深静脉血栓的分子病因学机制及其形成的核心调控网络仍未完全阐明,对于深静脉血栓的早期诊断预测也无理想的方法。目的:研究组织蛋白酶L/G与创伤性深静脉血栓的预测。方法:采用蚊式钳夹闭50只SD大鼠双侧股静脉的3个不同部位3s随后予以模具制动制备大鼠创伤性深静脉血栓模型,根据股静脉血栓形成的不同阶段和生物学特征,将模型大鼠分为血栓形成前组、血栓形成组和无血栓形成组,另取10只正常大鼠作为对照组。在相应时间点取大鼠创伤静脉,提取总RNA,经过基因芯片技术筛选差异表达基因,并进一步应用real-time PCR进行验证。结果与结论:基因芯片杂交结果发现组织蛋白酶L/G基因在各组间差异表达明显,其中血栓形成组最高,无血栓形成组和血栓形成前组次之,均明显高于对照组(P<0.05);real-time PCR分析结果与基因芯片杂交分析结果相一致。说明局部静脉血管壁中组织蛋白酶L/G表达水平升高与创伤性深静脉血栓形成有关,可作为深静脉血栓形成早期诊断、预测的候选分子标志。

2型猪链球菌层粘连蛋白结合蛋白的原核表达及免疫原性检测

目的表达2型猪链球菌(Streptococcus suis2,S.suis2)层粘连蛋白结合蛋白(Lmb)并检测其免疫原性。方法 PCR检测lmb基因在不同血清型S.suis中的分布。将S.suis2中国强毒株05ZYH33的lmb基因克隆至表达载体pET32a,转化大肠杆菌E.coliBL21,IPTG诱导表达,His亲和层析柱纯化重组蛋白。Western blot检测Lmb的免疫原性。结果 lmb基因存在于大多数S.suis血清型中。诱导表达并纯化后获得较高纯度的重组蛋白。重组Lmb能够和感染05ZYH33全菌的猪恢复期血清反应。结论 lmb基因在S.suis不同血清型中广泛分布,Lmb在细菌感染宿主过程中表达,可以作为疫苗开发的候选分子。

全基因组预测樟疫霉的候选效应分子

为了更好地研究樟疫霉的致病机制及防治方法,笔者基于病原菌效应分子具有的典型特征,利用Signal P、Prot Comp、TMHMM、big-PI Fungal Predictor和Target P等生物信息学预测程序对樟疫霉中328 457条蛋白质序列进行候选效应分子找寻,发现该菌含有3 439个小分子分泌蛋白,同时,对上述蛋白进行冗余性、半胱氨酸数量以及信号肽长度等性质进行分析。结果表明：上述分泌蛋白中存在较多的冗余性蛋白,所占比例为50%以上,并以含有1-10个半胱氨酸、17-26个氨基酸信号肽的分泌蛋白居多。另外,利用卵菌中效应分子所具有的保守基序RXLR,对拥有唯一氨基酸序列的1 549个分泌蛋白进行基序找寻,明确樟疫霉中存在160个候选效应分子。通过上述生物信息学分析方法可实现樟疫霉候选效应分子的预测。

全基因组预测希金斯炭疽菌的候选效应分子

[目的]希金斯炭疽菌可以侵染十字花科诸多植物引起炭疽病,给各国农业生产造成了巨大经济损失。对该菌候选效应分子进行预测,并对其特征进行明确。[方法]利用Signal P、Prot Comp等程序对该菌中分泌蛋白进行找寻,并对分泌蛋白所具有的氨基酸大小、信号肽长度以及理化性质等进行分析。结合已经报道的真菌效应分子具有的典型特征,明确该菌存在的候选效应分子数量及特征。[结果]希金斯炭疽菌含有658个分泌蛋白,氨基酸长度集中于50~300 aa之间;信号肽长度以17~21个aa的序列最为集中;信号肽切割位点属于A-X-A类型;分泌蛋白在分子量、等电点、不稳定系数等方面均存在差异,但大多数分泌蛋白属于亲水性蛋白。其中,预测功能的蛋白为290个,其功能较多的集中于酶类,包括脂肪酶、α-L-鼠李糖苷酶、果胶酯酶等。依据候选效应分子典型特征,明确该菌中含有388个候选效应分子。[结论]通过上述生物信息学分析方法,结合真菌效应分子典型特征,有效地实现了希金斯炭疽菌候选效应分子的预测,其信号肽切割位点类型与其他已经报道的致病疫霉、粗糙脉孢霉等分泌蛋白信号肽切割位点一致,分泌蛋白功能涉及较多的酶类,也与其他已经报道的病菌分泌蛋白功能相类似。

抗鸡球虫病基因重组疫苗的研究进展

鸡球虫病是由艾美耳属球虫引起的鸡的一种肠道原虫病,对养鸡业的发展危害严重。目前主要依靠药物和活卵囊疫苗来防治鸡球虫病,但药物防治存在耐药性和药物残留等问题,而免疫活卵囊疫苗带来的肠道损伤等问题使养鸡业在控制鸡球虫病方面面临巨大挑战,新型防控策略亟待开发。基因重组疫苗生产工艺简单、稳定、安全、高效,在分子生物学技术高速发展的当下,其将成为鸡球虫病防治的新型手段。目前对基因重组疫苗的研究日益增多,但缺乏系统的抗鸡球虫病基因重组疫苗的综述分析。鉴于此,论文从当前抗鸡球虫病措施、鸡球虫病基因重组疫苗候选因子及影响因素等方面对抗鸡球虫病基因重组疫苗的研究进展进行综述,以期为抗鸡球虫病基因重组疫苗的研发提供参考。

免疫印染分析慢性血吸虫病人血清识别日本血吸虫的抗原谱

业已证明,感染血吸虫的人或动物均能建立部分抗感染的抵抗力。分析和确定与建立这种抵抗力有关的血吸虫抗原成分,对筛选血吸虫候选疫苗分子和了解血吸虫抗原与宿主免疫系统的相互作用都是非常重要的。有关这方面的研究以曼氏血吸虫居多。在曼氏血吸虫保护性抗原的研究中,已从童虫、成虫和虫卵的抗原成分中确定了数个具有保护性功能的抗原分子。

疫苗

892583 用盐诱导法提高培养细胞内麻疹病毒的产量[英]/Boriskin,Y.S…//Arch.Virol.-1988,101（1～2）.-131～136[译自 DBA,1989,8（1）,89-00233]在m.o.i.0.03的情况下,用麻疹病毒（MV）株感染初级鹌鹑胚成纤维细胞（QEF）培养物。每天从连续培养基内收获病毒,在p.i.的第2天开始形成稳定的单层,在 p.i的第4天起加微载体,以及在第6天进行滚动式培养。测到镁盐（MgSO4）的浓度范围是0.001～1 M。最适非细胞毒性浓度是0.025～0.05M。

日本血吸虫SjRAD23基因的克隆表达及基因重组抗原的免疫保护效果

辐射敏感蛋白23具有核苷酸切除修复功能,在泛素蛋白酶体途径中起到重要作用。本研究利用PCR技术克隆了日本血吸虫辐射敏感蛋白23(Sj RAD23)编码的c DNA序列,成功获得Sj RAD23的基因序列,其ORF为1 053 bp。构建Sj RAD23基因重组表达质粒p ET28a(+)-Sj RAD23,并在大肠杆菌BL21中成功诱导表达,重组蛋白在上清和沉淀中都有存在。利用免疫组化技术检测该蛋白在虫体的分布情况,该蛋白广泛分布在日本血吸虫虫体被膜。用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫小鼠血清中检测到较高水平的特异性Ig G、Ig G1和Ig G2a。Western blotting分析显示重组蛋白能够被日本血吸虫成虫可溶性抗原免疫小鼠血清所识别。用重组蛋白r Sj RAD23免疫结果与206佐剂对照组比较,r Sj RAD23在BALB/c小鼠中诱导了35.94%减虫率,40.59%肝脏减卵率。结果表明Sj RAD23具有作为疫苗候选分子的潜力。

医学蠕虫水通道蛋白研究进展

水通道蛋白是广泛存在于医学蠕虫中的一类可特异性介导水和其他溶质分子跨膜转运的膜内在蛋白,其在促进水跨膜转运、渗透调节、营养物质吸收、有毒代谢产物排出以及抗寄生虫药物转运过程中发挥重要作用,有望成为抗寄生虫疫苗候选分子和药物靶点。本文综述了医学蠕虫水通道蛋白的结构特征并探讨其作为抗蠕虫疫苗候选分子和药物靶点的可行性,为新型抗寄生虫疫苗或药物研发提供参考。